Fall 2 - Karin Palmblad

Question 1

Hur många herpesvirus är humanpatogena?

Answer 1

8 st

Question 2

Hur kan herpesvirus delas in?

Answer 2

Finns 3 subfamiljer; alfa, beta och gamma

Question 3

Vilka virus ingår i alfaherpesvirus?

Answer 3

• Herpes simplex typ 1
• Herpes simplex typ 2
• Varinella zoster

Question 4

Vilka virus ingår i gammaherpesvirus?

Answer 4

• Epstein-barr
• Kaposis sarkom

Question 5

Vilka virus ingår i betaherpesvirus?

Answer 5

• Cytomegalovirus
• Herpes lymfotropic
• Human herpesvirus 7

Question 6

Vilken är alfaherpesvirus primära målcell?

Answer 6

Mucoepiteliala celler

Question 7

Vilken är alfaherpesvirus latensplats?

Answer 7

Neuron

Question 8

Hur sprid alfaherpesvirus?

Answer 8

Närkontakt

Question 9

Vilken är Epstein-barrs primära målcell?

Answer 9

B-celler ocg epitelceller

Question 10

Vilken är Epstein-barrs latensplats?

Answer 10

B-celler

Question 11

Hur sprid Epstein-barr?

Answer 11

Saliv

Question 12

Vilken är cytomegalovirus primära målcell?

Answer 12

Monocyter, lymfocyter och epitelceller

Question 13

Hur sprids cytomegalovirus?

Answer 13

Närkontakt

Question 14

Hur är herpesvirus uppbyggd?

Answer 14

Ikosaedral, linjärt dsDNA, hölje

Question 15

Herpes infektionsprocess

Answer 15

1. Höljeprotein fäster till cellen och fuserar höljet
2. Kapsid och tegument finns i cytoplasman
3. DNAt tar sig till nukleus
4. alfa, beta och gamma-RNA skapas i olika faser

• alfaRNA ger alfaproteiner (omedelbara prodteiner) som hjälper till med replikation och kontroll av värdcellen
• betaRNA ger betaproteiner (tidiga proteiner) om hjälper till med translation, agerar TF och enzymer
• gammaRNA ger gammaproteiner (sena proteiner) som ger strukturella proteiner till nya virionen

Question 16

Hur verkar HSV immunosuppressivt?

Answer 16

HSV hämmar inflöde genom TAP till MHC1-molekylerna i ER mha ACP47 -Z MHC1 skickar till lysosomen

Question 17

Hur verkar EBV immunosuppressivt?

Answer 17

EBV kan undankomma immunförsvaret genom:

• hämma proteasomnedbrytningen mha EBNA-1 -> peptider kan inte presenteras på MHC II
• produktion av IL-10 analog hämmar T-cellssvaret

Question 18

Hur kan herpesvirus verka immunosuppressivt?

Answer 18

Exempelvis:

• Hämma proteasomnedbrytningen
• Hämma TAP
• Stimulera MHC1-nedbrytning från membranet och ER
• Producera IL-10 analoger

Question 19

Hur kommer EBV in i sina målceller?

Answer 19

Genom CD21 och MHC klass II kommer viruset in i cellen

Question 20

Vilka är symptomen för EBV?

Answer 20

Tre klassiska symtom för infektiös mononukleos är lymfadenopati, splenomegali
och exsudativ faryngit tillsammans med feber, obehag och hosta.

• Trötthet
• Febber
• Svullna lymfkörtlar
• Inflammerad svalg/hals
• Utslag på hud och mukosa
• Förstorad mjälte och lever

Question 21

EBV patogenes

Answer 21

• EBV infekterar epitel- och B-celler genom att binda CD21 och MHC II
• Inbindning av CD21 promotar tillväxt av B-lymofcyter men kommer ligga latent (inga virala gener uttrycks)
• Någon typ av reaktivering sker vilket gör att zebraproteinet bildar komplex som får igång avläsningen
• När infektionen blivit lytisk komer B-celler att träffa på T-celler som kontrollerar tillväxten och läker ut infektionen

Question 22

HSV patogenes

Answer 22

• Primärinfektion i epitel eller slemhinna gör att nervändarna blir infekterade och viruset transporteras till nervcellskroppen
• Virusets DNA ligger episomalt latent i cellkroppen
• Vid reaktivering färdas virions tillbaka till slemhinna eller i vissa fall centralt -> encephalit

Question 23

Hur etableras latens i HSV?

Answer 23

Latens etableras vid inhiberad expression av alfa-gener. Detta beror sannolikt på:

• Avsaknad av faktorer i nukleis som krävs för genuttryck
• Hormonellt reglerad inhibition
• LAT-medierad inhibition

Question 24

Var ligger varicella-zoster i latens?

Answer 24

I dorsala ganglier

Question 25

Vilka kliniska manifestationer har HSV1?

Answer 25

Question 26

Ange fyra gemensamma strukturella egenskaper för virus inom herpesfamiljen

Answer 26

Stora upp till 200nm. Dubbelsträngade DNA virus, viralt linjärt DNA skyddad i kapsid med ikosaedral nukleokapsidstruktur och yttre virala höljeproteiner infästa i cell-plasmamembran lipid hölje.

Question 27

I Claras celler pågår just nu en lytisk replikationscykel, vad innebär det?

Answer 27

Viruset tar över värdcellen och replikerar tills cellen lyseras. Viruspartiklarna kan då spridas till andra celler.

Question 28

Beskriv kortfattat de olika stegen i EBVs cellulära lytiska replikationscykel.

Answer 28

EBV replikerar som alla herpesvirus i kaskad, efter att EBV virusets kapsid levererat det virala dsDNA:t till cellnukleus påbörjas DNA-avläsningen med immediate early (alfa), early (beta) och late (gamma) vmRNA transkription och därefter translation och proteinuttryck. Infektionscykeln har annars de typiska 8 replikationsstegen.

Question 29

EBV infekterar främst B-celler och vissa epitelceller, varför infekteras just dessa celltyper?

Answer 29

EBV binder till komplement receptor 2 (CR2) vilken uttrycks av just B-celler och vissa epitelceller i pharynx.

Question 30

Vad är mekanismerna bakom en patient med EBV lymfocytos och förekomsten av atypiska lymfocyter?

Answer 30

Proliferation och aktivering av framförallt CD8+ T-celler som avdödar de infekterade B-cellerna ligger bakom *lymfocytosen.* Aktivering och proliferation gör T-celler större, *atypiska.* De infekterade B-cellerna är också antigenpresenterande celler (MHCI och MHCII) vilket bidrar till kraftig T-cellsaktivering.

Question 31

EBV uttrycker en gen som är en homolog till cytokinen IL10. Vilken betydelse kan uttryck av ”viralt IL10” ha för sjukdomsförloppet?

Answer 31

IL10 är ett reglerande cytokin som begränsar immunreaktionen vilket också ökar virusets chanser att persistera i värden.

Question 32

EBV kan under vissa omständigheter leda till en okontrollerad proliferation av B-celler, B-cellslymfom, vilka är riskfaktorerna?

Answer 32

EBV-orsakande Burkitt lymfom är ovanliga i Europa eftersom Malaria tros vara en co-faktor i lymfomutvecklingen, liksom EBV orsakad nasofaryngeal cancer

Question 33

Vad påvisas i blodet med ett snabbtest för mononukleos?

Answer 33

Snabbtestet påvisar förekomst av ospecifika antikroppar så kallade heterofila antikroppar.

Question 34

Vad kan man se tidigt i serologin vid ett EBV-förlopp?

Answer 34

Tidigt i sjukdomsförloppet (dagar) skulle specifik serologi utfalla negativ (inga specifika EBV antikroppar) eller positiv avseende IgM- antikroppar mot kapsidantigenet VCA.

Question 35

Vilka övergripande angripningsmål kan antivirala medel ha?

Answer 35

Absorption och penetration Transkription Integrering av viralt DNA Viral mognad

Question 36

Vad finnsd det för olika typer av antivirala medel?

Answer 36

* DNA-polymerasinhibitorer (DNA-analoger som fastnar i polymeraset) * Nukleosidanaloger - Tävlar om plats med DNA-polymeraset, kompetetiva (likt cancerbehandlingen, liknande biverkningar om långtidsbehandling pågår) * Non-nukleosidanaloger - Ej kompetetiva, ser ut som händer och fastnar på DNA-polymeraser och hämmar enzymet kompetetivt * Virala proteas-hämmare, falska proteiner som hämmar * Integras-inhibitorer: Hämmar de integrerande enzymerna * Fusions-inhibitorer, antikroppar extracellulärt mot cellreceptore eller peptider * Neuroaminidasinhibitorer - Influenza kan inte göra komplett egress

Question 37

Hur fungerar ribavirin?

Answer 37

**Ribavirin:** RNA-byggsten som hämmar genomreplikationen och RNA-syntes Universaldrogen, stimulerar även våra Tc-celler, man vet inte hur men den gör det! Giftig i lång exponering, ackumuleras i erytrocyter och leder hemolytisk anemi.

Question 38

Hur fungerar amantadine?

Answer 38

**Amantadin:** Svampprotein som fäster i M2-jonkanalen för influensa, sätter sig som propp i vätekanalen så att avklädningen inte kan ske

Question 39

När ska antivirala medel tas i sjukdomsförloppet?

Answer 39

Antivirala medel ska tas under akutfasen som under akuta tillstånd kan vara väldigt kort.

Question 40

Vilka antivirala medel är den huvudsakliga behandlingen mot influensa? Hur fungerar dessa?

Answer 40

*Mot influensa* finns det 4 typer av LM att används: * Amantadine/Rimantadine fungerar mot typ A * Svampprotein som fäster i M2-jonkanalen för influensa, sätter sig som propp i vätekanalen så att avklädningen inte kan ske * Zanimivir/Oseltamivir fungerar mot typ A & B * Blockerar neuroamidasenzymet genom att hindra inbindning av sialinsyra vilket reducerar virusfrisättning och förhöjd aggregering eller hopklumpning av viruspartiklar

Question 41

Hur fungerar nukleosidanaloger och vad används det mot?

Answer 41

**Nukleosidanaloger** - måste ha låg laddningsgrad för att tillåtas passera plasmamembranet, cellen själv aktiverar drogen vilket är vitalt. De cellulära kinaserna bygger LM till en trifosfat, och först då kan den inkorporeras i DNA-syntesen och terminera den. * Man använder detta mot Retro (HIV),hepatit B och herpes

Question 42

Hur fungerar interferonet som antiviralt LM?

Answer 42

Interferoner – Induceras normalt av dsRNA virus och inhiberar cellulär/viral proteinsyntes då det aktiverar 2 cellulära proteiner; 2-5-syntas och dsRNA-beroende proteinkinas (PKR

Question 43

Vilka LM används mot hepatit C och hur fungerar dessa?

Answer 43

*Mot hepatit C* används proteasinhibitorer boceprevir/simeprevir och ibland interferoner + ribavirin. * Proteasinhibitorerna gör att virala proteiner inte kan trimmas. * Ribavirin är en guanosin-analog som stoppar synesen av RNA

Question 44

Vilka biverkningar kan komma av antivirala medel?

Answer 44

Bieffekter av antiviral behandling: * Resistensutveckling * Faktorer som är viktiga för att undvika resistensutveckling är complience, dos och biotillgänglighet, grad av immunosuppression och längs av behandlingen * Analysering av resissensmönster rekommenderas vid en primärinfektion, tidigare misslyckad behandling och ändring av behandling samt graviditet * Förändringar i cellmetabolismen * Exempelvis ökade blodfetter, ändring fettfördelning * Benmärgssupression

Question 45

Vad är LAT?

Answer 45

I celler som promotar latens transktiberar en bit RNA, latency associated transcript, som skapas av det virala DNAt. Har 2 huvudfunktioner: * Suppressar apoptos hos värden * Suppressar lytiska gener av vDNA

Question 46

Hur diagnostiseras EBV?

Answer 46

* EBV-snabbtest där man testar heterogena AK * Serologiskt test * Blodutsryk

Question 47

Vilka olika AK kan man hitta vid serologiskt test av EBV och vad berättar dessa?

Answer 47

**VCA-IgM** ses vid en akut infektion **VCA-IgG** ses månader efter infektionen **EBNA-IgG** och **IgM** ses månader efter infektion

Question 48

Vad kan man se vid blodutryk vid EBV-infektion?

Answer 48

Ökat antal lymofcyter med en tydlig dominans av mononukleära celler (lymfocyter och monocyter) samt stora, atypriska lymfocyter med basofil cytoplasma

Question 49

Vilken AK påvisar akut EBV-infektion?

Answer 49

EVC-VCA av IgM-typ

Question 50

Hur utförs realtids-PCR?

Answer 50

Mäter PCR över tid och kan då detekteraoch kvantifiera mängden virus 1. Först lysera celler/virus/bakterier 2. Rena fram nukleinsyor 3. Tillföra primer, polymeras och dNTPS 4. PCR i tre steg * Öppnar i 96 grader * Tillföra primers vid 45 grader * Bygga på med polymeras och dNTPs vid 72 grader