Practica 7 Flashcards
Nombre de la práctica 7
Análisis electroforético de ADN en gel de agarosa y su aplicación en la interpretación de RLFP para determinar relaciones genéticas entre personas
Herramienta molecular fundamental para aislar y purificar macromoléculas en base a su movilidad dentro de un soporte o matriz sólida en un campo eléctrico
Electroforesis
Los ácidos nucleicos de diferente procedencia pueden ser identificados por:
diferencias en sus corrimientos electroforéticos
Para conocer el número y tamaño de los fragmentos de restricción después de la digestión con enzimas de restricción de un ADN se tiene que:
Analizar las moléculas de ácido nucleico usando electroforesis en gel y luego visualizarlas usando tinción de ADN
Contiene un compuesto catiónico colorido cuyas moléculas son atraídas y se unen a los grupos fosfato negativamente cargados del DNA a pH básico.
Tinción de Fast Blast para geles de agarosa
Se intercala entre las bases y permite visualizar hasta 1ng de ADN de doble cadena al emitir fluorescencia rojo-naranja (560nm) bajo luz UV (260-360nm)
Tinción con bromuro de etidio (BrEt)
El tamaño de una molécula de DNA es su peso molecular y se expresa como el número de pares de bases que forman la molécula, ¿verdadero o falso?
Verdadero
Las moléculas de mayor peso molecular tienen menor movilidad electroforética, por lo tanto:
quedan más cerca del pozo en donde se aplicó la muestra inicialmente
Las moléculas de menor peso molecular presentan mayor movilidad electroforética y por lo tanto:
se desplazan más hacia el frente del gel
Cuanto mayor sea la concentración de agarosa…
menor será el tamaño de los poros y más tardaran las moléculas de ADN en atravesarlos
La agarosa al 1% se emplea para la separación óptima de fragmentos, ¿de qué tamaño?
de entre 500 y 10,000 pb
En los individuos, los sitios de reconocimiento de enzimas de restricción pueden verse alterados por:
variaciones en la secuencia del ADN inherente a regiones polimórficas
¿Qué se hace para calcular el peso molecular aproximado de los fragmentos de restricción de una muestra de ADN?
Se compara la migración de las bandas en una muestra de ADN digerida con las bandas en el carril del marcador de peso molecular
Cada persona hereda la mitad de su ADN de cada padre y por tanto posee una combinación de ambos, ¿verdadero o falso?
Verdadero
