2.2 Diversiteit van antigeenreceptoren & 2.6 Antigeenherkenning door T-cellen

Question 1

Waaruit bestaat de T-cel receptor?

Answer 1

• 2 constante ketens (a en b of g en d)
• 1 bindingsplaats

Question 2

Hoe verloopt VDJ recombinatie?

Answer 2

Eerst DJ, daarna VDJ:
- d, y, b, a

Question 3

Waar liggen de genen voor de verschillende ketens van T-cel receptoren?

Answer 3

• A en D: Chromosoom 14 (IGH-gencomplex ook)
• B: Chromosoom 7
• Y: Chromosoom 7

IGK-gencomplex ligt op chromosoom 2, IGL-gencomplex ligt op chromosoom 22

Question 4

Uit welke stappen bestaat VDJ recombinatie en met welke enzymen?

Answer 4

• DNA cleavage: RAG1/RAG2 binden aan RSS
• Hairpin cleavage: DNA-PKcs, Ku70/80 en artemis
• Ligase: DNA ligase IV en XRCC4

Question 5

Wat ontstaat er door DNA cleavage?

Answer 5

Signal joint en coding joint

Question 6

Hoe zien recombinatie signaal sequenties eruit?

Answer 6

• Heptameer
• 12 of 23 nt spacer
• Nonameer

12-23 regel: Recombinatie tussen RSS met spacer van 12 nt en RSS met spacer van 23 nt

Question 7

Waardoor wordt de diversiteit vergroot?

Answer 7

• VDJ recombinatie (5 x 10^6)
• Junction diversiteit (>10^12)
• Isotype diversiteit

Question 8

Hoe verloopt de T-cel ontwikkeling?

Answer 8

• Prothymocyt -> Thymocyt -> T-cel
• DN -> DP -> SP

Question 9

Hoe werkt flowcytometrie?

Answer 9

1) Celsuspensie met markes antistof
2) Cellen langs laser
3) Detectie uitgezonden licht (Data processing)
4) Data analyse (Grootte en complexiteit)

Forward scatter (FSC): Afhankelijk van celgrootte
Side scatter (SSC): Afhankelijk van interne structuur (Oppervlakte van de kern, granulen)
Elke dot is een ‘event’/cel bij de laser

Question 10

Uit welke lagen bestaat de thymus en welke cellen zitten daar?

Answer 10

• Corticomedullaire junction: DN (Dubbel negatief, CD4- en CD8-)
• Cortex: Onrijp DP (Dubbel positief, CD4+ en CD8+)
• Medulla: Rijp SP (‘Single’ positief, CD4+ of CD8+)

Question 11

Welke voorloper T-cellen zijn er?

Answer 11

• DN1: CD34 positief
• DN2: CD34 en CD1a positief
• DN3/4: Pre Ta positief
• DN: TCRyd positief
• ISP: CD4 en preTa positief
• DP: CD4 en CD8 positief

Question 12

Hoe ziet de pre B-cel receptor eruit?

Answer 12

• Zware keten (IgH, IgK, IgL)
• Surogaat Lichte Keten (SLC)

Question 13

Hoe ziet de pre T-cel receptor eruit?

Answer 13

Pre Ta en normale B-keten

Question 14

Welke voorloper B-cellen zijn er tijdens antigeen onafhankelijke differentiatie?

Answer 14

Pro B -> Pre B-I -> Pre B-II groot -> Pre-II klein -> Immature B-cel

Question 15

Wat is SCID?

Answer 15

Severe Combined Immunodeficiëntie:
- Blokkade in T- en B-cel ontwikkeling

Door hielprik screening kan dit al vroeg worden gedetecteerd

Question 16

Wat is een TREC?

Answer 16

T-cel receptor excisiecirkel

Question 17

Wat zijn de kenmerken van Signal Joints (4)?

Answer 17

• Bijproduct V(D)J recombinatie
• Uniek voor elke V-J combinatie
• Extra-chromosomaal, circulair
• Stabiel, maar geen replicatie (Uitverdunning na celdeling)

Question 18

Welke chemokinen zorgen voor ontwikkeling van T-cellen?

Answer 18

• CCR7
• CD69
• CD24

Question 19

Welke processen spelen een rol bij T-cel differentiatie?

Answer 19

• Maturatie
• Proliferatie
• Apoptose

Question 20

Welke T-cel receptor selectie vindt er plaats en waar?

Answer 20

• Positief in de cortex
• Negatief in de medulla

Question 21

Wat is een positieve selectie?

Answer 21

Selectie op goede affiniteit lichaamseigen HLA (MHC-Ag) gepresenteerd door corticale thymus epitheelcel

Question 22

Wat is een negatieve selectie?

Answer 22

Selectie tegen TCR met te hoge affiniteit voor lichaamseigen peptide in HLA -> Apoptose. Gepresenteerd door medullaire TECs en DC’s

Expressie van weefselspecifieke antigenen door AIRE. Negatieve selectie leidt tot tolerantie

Question 23

Wat is AIRE?

Answer 23

Autoimmuno Regulator: Zorgt voor expressie weefselspecifieke antigenen in de thymus

Defect in AIRE zorgt voor een Auto-immuun polyglandulair syndroom (APOCED)

Question 24

Waaruit bestaat de perifere tolerantie?

Answer 24

• Klonale deviatie tot regulatoire T-cel
• Apoptose
• Suppressie
• Anergie

Question 25

Tot welke T-cellen kunnen pre T-cellen zich differentiëren?

Answer 25

Geheugencellen of effectorcellen

Question 26

Wat zijn de kenmerken van de TFH-cel?

Answer 26

• Differentiatie van B-lymfocyten
• Activatie door IL6 en IL21
• Produceert IL21 en L17

Question 27

Wat zijn kenmerken van de Th1 cel (5)?

Answer 27

• Macrofaagactivatie, regulatie humorale immuniteit en celgemedieerde immuniteit
• Hebben invloed op macrofagen, NK-cellen, CD8+ T-cellen en B-cellen -> IgG3
• Activatie door IL12 en IFN-y
• Produceert IFN-y, TNF-a en IL2
• Te veel leidt tot inflammatie

Question 28

Wat zijn de kenmerken van de Treg cel (5)?

Answer 28

• Activatie door TGF-b
• Produceert IL10 en TGF-b
• Zorgt voor onderdrukken van de functie van andere (non-)T-cellen
• Hebben invloed op neutrofiele granulocyten en epitheelcellen
• Afwezigheid leidt tot auto-immuniteit

Question 29

Wat zijn de kenmerken van de Th2-cel (5)?

Answer 29

• Regulatie van humorale immuniteit, allergenen en op wormen
• Hebben invloed eosinofiele granulocyten, B-cellen -> IgE, IgG4
• Activatie door IL4
• Produceert IL4, IL5 en IL13
• Te veel leidt tot allergie

Question 30

Wat zijn de kenmerken van de Th17-cel (5)?

Answer 30

• Regulatie van ontsteking (pro-inflammatoir) en heeft respons op schimmels en extracellulaire bacteriën
• Activatie door IL6 en TGF-b
• Heeft invloed op neutrofiele granulocyten en epitheelcellen
• Produceert IL17, IL22 en TNFa
• Te veel leidt tot inflammatie en auto-immuniteit

Question 31

Welke prikkels zijn nodig voor T-cel activatie?

Answer 31

• MHC-Ag
• CD80/CD86 - CD28

Question 32

Hoe kan de T-cel geremd worden?

Answer 32

• CD80/86-CTLA4 (Ipilimumab)
• PDL1/L2-PD1 (Nivolumab)

Question 33

Wat zijn de kenmerken van TCRyd+ T-cellen?

Answer 33

• Herkenning van antigeen zonder klassiek MHC
• Snelle effector respons
• Tussen adaptief en innate in

Question 34

Welke TCRyd T-cellen zijn er?

Answer 34

• Vd2 cellen in bloed: Herkenning fosfo-antigenen van micro-organismen of dode cellen. En produceren inflammatoire cytokinen
• Vd1 cellen in weefsels: Herkenning stress-geïnduceerde MHC-achtige moleculen

Question 35

Wat is thymic cross talk?

Answer 35

De interactie tussen stromale cellen in de thymus en ontwikkelde T-cellen

Question 36

Wat is het gevolg van een mutatie in het AIRE gen?

Answer 36

Auto Immuun Polyendocrinopathie Syndroom (APS):
- Hypothyreoïdie
- Candidiasis
- Bijnierinsufficiëntie

Question 37

Wat is de volgorde in recombinatie van IG/TCR genen tijdens differentiatie?

Answer 37

• IGH -> IGK -> IGL
• TCRD -> TCRG -> TCRB -> TCRA

Question 38

Welke 2 typen van diversiteit is er en welke 2 markers definiëren thymusstadia?

Answer 38

2 typen:
- Combinatiediversiteit
- Junction diversiteit

2 markers:
- CD4
- CD8

Question 39

Wat is een ezelsbruggetje voor de MHC en CD koppeling?

Answer 39

MHC 1 samen met CD8 (18=8)
MHC 2 samen met CD4 (24=8)

Question 40

Hoe verloopt de differentiatie van Naïeve tot effector cellen?

Answer 40

• Naïef -> Nog geen contact gehad met antigeen (Ag)
• Effector (Geheugen) (RA-) -> Snellere respons bij nieuw Ag contact
• Effector (RA+) -> Raken uitgeput bij chronische Ag stimulatie