BM9 4) Mécanisme de recombinaison homologue du phage lambda Flashcards Preview

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Flashcards in BM9 4) Mécanisme de recombinaison homologue du phage lambda Deck (23):
1

Que dirige l'intégrase du phage lambda?

L'intégration puis l'excision de l'ADN viral dans un chromosome bactérien hôte

2

Quel est le nom de l'intégrase du phage lambda?

lambda-Int

3

Que catalyse l'intégrase du phage lambda?

La recombinaison entre 2 sites spécifiques: attP (attachement phage) et attB (attachement Bactérie)

4

Pourquoi le complexe Protéine-ADN formé par l'intégrase nécessite des protéines accessoires dites architecturales?

1) Initier la formation du complexe protéine-ADN
2) Intégrer le génome du phage au génome bactérien
3) Exciser l'ADN

5

De quoi est composé le coeur des sites attP et attB?

-Une région centrale de croisement pour l'échange des brins (30 pb)
-Cette dernière est entourée de 2 sites de liaison à lambda-Int

6

En quoi diffère attP d'attB?

Par la présence d'autres sites de liaison à des protéines sur 240 pb supplémentaires

7

Comment sont organisés les sites de liaisons supplémentaires d'attP?

De manière très asymétrique

8

Comment appelle-t-on les sites de liaison supplémentaires d'attP?

Les bras P et P' d'attP

9

Quel rôle joue l'asymétrie des bras d'attP?

Rôle important dans la régulation de l'intégration de l'ADN du phage lambda

10

De quoi est composé l'enzyme intégrase lambda?

2 domaines de liaison (1 avec le coeur, 1 avec le bras)

11

Avec quoi se lie le domaine de liaison avec le bras?

aux sites P1, P2 et P' répartis sur les 2 bras

12

À quoi servent les sites de liaisons à des protéines architecturales des bras?

à déterminer le sens et l'efficacité de la recombinaison

13

Que nécessite essentiellement l'intégration du génome du phage dans le génome bactérien?

attB
attP
lambda-Int
Protéine architecturale
FIH

14

Que signifie FIH?

Facteur d'intégration d'hôte

15

Que sont les FIH?

des protéines de liaison à l'ADN qui courbent la double hélice à 160 degrés

16

Quels sont les sites de liaison de FIH sur les bras d'attP?

H1
H2
H'

17

Qu'arrive-t-il lors que FIH est lié à H'?

Elle va se lier à un des 2 sites de liaison des bras de attP (P1 ou P'1) à lamda-int
et avec 1 des 2 sites présents dans la région centrale (C ou C')

18

Quel type de liaison est la liason à un des 2 sites de liaison des bras de attP (P1 ou P'1) à lamda-int?

Forte

19

Quel type de liaison est la liaison avec 1 des 2 sites présents dans la région centrale (C ou C')?

faible

20

Que permet FIH?

Permet à lamda-int d'accéder au site de clivage

21

Qu'a-t-on une fois que l'ADN du phage a intégré le chromosome de l'hôte?

a) 2 sites hybrides sont créées aux jonctions entre les 2 molécules d'ADN attL et attR. Les bras sont désormais séparés.
b) Aucune des 2 régions du coeurs sont à même d'assembler et d'activer un complexe de recombinase lambda-Int. Le site de clivage est démentelé.

22

Que médie la protéine architecturale Xis?

L'excision de l'ADN du phage

23

Quel est le mécanisme de Xis?

-Xis se lie à l'ADN aux sites X1 et X2 du bras P de attP pour le courber à 140 degrés.
- Xis, lambda-int et FIH stimulent ensemble la formation d'un complexe Protéine-ADN sur attR
-Le complexe protéine-ADN sur attR intéragit avec attL pour initier la recombinaison entre attR et attL.
-En même temps, Xis inhibe une nouvelle intégration d'ADN de phage, ce qui empêche la recombinaison entre attP et attB