Microscopie électronique

Question 1

Quel est le grossissement maximal atteignable en microscopie électronique?

Answer 1

1. 500 000 X.

Question 2

Nommez les deux modes principaux de fonctionnement d’un microscope électronique, et dites lequel est utilisé en pathologie.

Answer 2

1. Transmission et balayage.2. Le mode de transmission est utilisé en pathologie.

Question 3

Nommez le fixateur de préférence et le fixateur alternatif pour la microscopie électronique.

Answer 3

1. Fixateur de préférence : glutaraldéhyde 4%.2. Fixateur alternatif : fluide de Karnovsky.

Question 4

Nommez le composé utilisé en post-fixation des spécimens, ainsi que sa fonction principale.

Answer 4

1. Tétroxyde d’osmium.2. Déflexion des électrons pour la création d’images avec meilleur contraste.

Question 5

Nommez l’étape suivant la post-fixation, et la substance utilisée pour la réaliser.

Answer 5

1. Déshydratation.2. Plusieurs lavages à l’alcool (à concentration de plus en plus élevée).

Question 6

La paraffine n’est pas utilisée pour l’inclusion des blocs en microscopie électronique. Quelle est la substance la remplaçant? Pour quelle raison ne peut-on pas utiliser la paraffine?

Answer 6

1. Résine d’époxy.2. La paraffine est trop molle pour réaliser les coupes ultrafines nécessaires à la ME.

Question 7

Quelle est l’épaisseur des coupes finales à l’ultramicrotome pour la microscopie électronique?

Answer 7

1. 60-90 nm.

Question 8

Quel colorant est utilisé dans la préparation des lames de microscopie électronique?

Answer 8

1. Bleu de toluidine.

Question 9

Quelle est la monture utilisée pour les coupes de tissus?Pourquoi ne peut-on pas utiliser des lames de verre comme en microscopie optique?

Answer 9

1. Grille de cuivre.2. Le verre diffuse le faisceau d’électrons, et donc une image ne pourrait pas être obtenue.

Question 10

Une coloration finale aux métaux lourds est nécessaire afin de disperser suffisamment les électrons. Nommez les deux substances utilisées.

Answer 10

1. Acétate d’uranyle.2. Citrate de plomb.

Question 11

Le choix d’un voltage pour accélérer les électrons vise un équilibre entre deux propriétés que l’on souhaite avoir sur une bonne image. Quelles sont-elles?

Answer 11

1. Résolution.2. Constraste.Plus on augmente le voltage, plus on accélère les électrons et plus on diminue leur longueur d’onde, ce qui améliore la résolution. Par contre plus les électrons vont vite, moins ils sont déviés et moins bon est le contraste. On recherche donc un équilibre entre les deux.

Question 12

Quel type de lentille permet de focaliser le faisceau d’électrons sur le spécimen?

Answer 12

1. Lentilles magnétiques.

Question 13

Quelles sont les deux méthodes de visualisation d’images en microscopie électronique?

Answer 13

1. Plaque de phosphore.2. Caméra numérique.

Question 14

Pour quelle raison doit-on mettre le faisceau d’électrons sous vide?

Answer 14

1. Afin d’éviter les collisions entre les électrons et les molécules d’azote et d’oxygène de l’air ambiant.

Question 15

Quelle méthode permet le diagnostic d’infections virales par microscopie électronique?

Answer 15

1. Coloration négative.

Question 16

Quel est le processus analogue de l’immunohistochimie en microscopie électronique? Expliquer ses trois étapes principales.

Answer 16

1. Immunomarquage2. Étapes :a) Anticorps primaire se fixe à l’antigène.b) Anticorps secondaire marqué par de l’or se fixe à l’anticorps primaire.c) L’or crée une zone dense aux électrons, qui apparaît noire sur l’image.

Question 17

Énumérez six sources d’erreur d’interprétation pré-analytique.

Answer 17

1. Mauvaise identification du spécimen.2. Inversion de spécimens.3. Mauvaise fixation (temps inadéquat, mauvais choix de fixateur, autolyse suite à délai de fixation).4. Mauvais échantillonnage.5. Coloration inadéquate.6. Mauvaise épaisseur de coupe.

Question 18

Énumérez trois sources d’erreur d’interprétation analytique.

Answer 18

1. Mauvais fonctionnement du microscope.2. Mauvaise interprétation de structures normales entrappées (faux positif).3. Faible quantité de structures caractéristiques identifiables (faux négatif).

Question 19

Énumérez deux sources d’erreur post-analytique.

Answer 19

1. Mauvaise intégration des données d’interprétation de microscopie électronique au rapport final.2. Erreur de transmission du rapport.