Mycobacterium

Question 1

Habitat

Answer 1

• As micobacterias são ubíquas
• Encontram-se maioritariamente no solo, mas podem ser isoladas de água (rio e mar)
• Estamos em permanente contacto com as micobactérias (inalação ou ingestão)
• Consequente colonização (temporária ou permanente) do trato respiratório ou digestivo
• Podem ser detetadas na pele e nas fezes de indivíduos saudáveis

Question 2

Morfologia, Estrutura e Fisiologia

Answer 2

• Bacilos aeróbios estritos que tendem a agrupar-se
• Genoma com elevado conteúdo em G+C (60-70%)
• Organismos não móveis e não formadores de esporos
• Gram-positivo empiricamente (não coram pelo Gram)
• Bacilos ácido-resistentes (resistem à descoloração com soluções de álcool e ácido)
• Parede celular rica em lípidos complexos e ácidos micólicos (60%)
• Coram de magenta escuro — coloração Ziehl-Neelsen (ZN)
• Crescimento variável (media 2 - 60 dias, depende da espécie)

Question 3

Estrutura da Parede Celular

Answer 3

Composição da parede celular (lípidos, ácidos micólitos) responsável por grande parte das propriedades características dos isolados deste género bacteriano

Question 4

Características

Answer 4

• Crescimento lento (M. tuberculosis)
• Resistência ao frio e ao calor (mas não a elevadas temperaturas)
• Resistência à desidratação
• Resistência a biocidas, antibióticos e outros antimicrobianos e à resposta imune do hospedeiro
• Antiginenicidade
• Durante o processo de infeção ocorre uma elevada biossíntese de ácidos micólicos que permite uma maior sobrevivência da bactéria

Question 5

Crescimento

Answer 5

• O crescimento em forma de cordão serpenteado está associado a uma agregação das células tipo lado a lado e ao entrelaçamento das longas cadeias de bacilos
• Este tipo de crescimento deve-se ao glicolípido, o fator cordão (6,6’-dimicoliltrealose)
• Ativa os macrófagos facilitando a formação de granulomas

Question 6

Mycobacterium

Answer 6

• As micobactérias são aeróbias obrigatórias
• Energia a partir da oxidação de compostos simples de carbono
• Crescimento lento: Td cerca de 18h

Question 7

Pigmentação

Answer 7

Algumas micobactérias produzem pigmentos amarelos (carotenóides):
- Fotocromógeneos: somente quando expostos à luz
- Escotocromógeneos: mesmo quando expostos à ausência de luz
- Não-cromógeneos: nunca produzem

Question 8

Mycobacterium — Espécies e Significado Clínico

Answer 8

• Espécies com relevância clínica
• 4 grupos principais:
  » Complexo Mycobacterium tuberculosis (MTBC) — ex.: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. africanum (causam infeções tuberculosas)
  » Mycobacterium leprae (agente causador da lepra)
  » Mycobacterium ulcerans
  » Micobactérias Não-Tuberculosas — M.N.T (várias espécies)

Question 9

Tuberculose

Answer 9

É uma doença causada pela bactéria Mycobacterium tuberculosis, um bastonete delgado, aeróbio obrigatório. Essa bactéria é ácido resistente, pois a sua parede celular é rica em lípidos, apresentando, também, resistência a desinfetantes e muitos antibióticos

Question 10

Tuberculose — Uma Perspetiva Global

Answer 10

Maior incidência da doença está maioritariamente nos países em desenvolvimento como a Índia, Paquistão, Indonésia, África Subsaariana, e parte da Europa Oriental e China

Question 11

Mycobacterium tuberculosis — Transmissão

Answer 11

Os humanos são o único reservatório natural.
M. tuberculosis é transmitida pelo contacto próximo pessoa a pessoa pela via respiratória através da inalação de aerossóis transportadores de partículas infeciosas

Question 12

Risco elevado de transmissão

Answer 12

• Portadores do HIV
• Fatores sociais (ex.: multidões, sem abrigo)
• Prisões, hospitais
• Emigrantes e migrantes de áreas endémicas
• Viagens

Question 13

Mycobacterium tuberculosis — Transmissão: Relação direta

Answer 13

1. Extensão da propagação da infeção no pulmão
2. Quantidade de bacilos libertados (aerossóis/gotículas no ar)
3. Frequência de tosse
4. Tempo de exposição
5. Estado imunológico do indivíduo em risco
   No entanto:
6. Micobactérias: sensíveis à luz ultravioleta (UV)
7. Maioria dos doentes não é contagioso 2 semanas após o início do tratamento

Question 14

Tuberculose — Progressão da Doença

Answer 14

Indivíduos não portadores de HIV: a doença afeta principalmente os pulmões em 80% dos casos
Indivíduos portadores de HIV — até 66% dos pacientes com M. tuberculosis: comprometimento de outros órgãos além dos pulmões

Question 15

Mycobacterium tuberculosis — Fisiopatologia da Infeção

Answer 15

No período de exposição a bactéria entra nas vias respiratórias e alcança os alvéolos sendo digeridas pelos macrófagos alveolares
M. tuberculosis impede a fusão do fagossoma com os lisossomas, ao inibir a molécula de união específica, o antigénio endosomal específico 1
O fagossoma funde-se com outras vesículas intracelulares facilitando o acesso da bactéria aos nutrientes e a sua replicação no interior do vacúolo

Question 16

Mycobacterium tuberculosis — Progressão da Tuberculose Latente a Infeção Ativa

Answer 16

TB Latente: a maioria das pessoas não tem sintomas de TB. Não transmitem as micobactérias a outras pessoas. Pode progredir para infeção ativa (raro)
TB Ativa: a maioria das pessoas apresenta sintomas inespecíficos. Transmitem as micobactérias

Question 17

Mycobacterium tuberculosis — Diagnóstico

Answer 17

Exame físico: radiografia (evidência de doença pulmonar)
Deteta Infeção Latente:
- Imunodiagnóstico:
» teste de tuberculina: derivado purificado da proteína
» ensaios de libertação de interferão-γ
Deteta Infeção Ativa:
- Microscopia:
» coloração de Ziehl-Neelsen (método a quente)
» coloração Kinyoun (método a frio)
» coloração pela auramina-rodamina de Truant
- Cultural:
» meios cultura sólidos
» meios cultura sup/ ovo
» meios líquidos
» métodos culturais automáticos

Question 18

Mycobacterium tuberculosis — Microscopia

Answer 18

(A) Com dois fluorocromos frequentemente utilizados, auramina O e auramina-rodamina — fluorescência de amarelo a laranja. Uma das desvantagens dos métodos de fluorescência é que alguns dos microrganismos de crescimento rápido podem não corar. Por esta razão, recomenda-se um novo contraste coma coloração de Ziehl-Neelsen ou Kinyoun quando houver suspeita de microrganismos de crescimento rápido
(B) Após incubação em meio líquido, M. tuberculosis forma grandes cordões em serpentina

Question 19

Mycobacterium tuberculosis — Biologia Molecular

Answer 19

Sistemas moleculares:
- ensaios amplificação de DNA (ex.: Cepheid Xpertt® MTB/rif polymerase chain reaction (PCR))
- sondas (ex.: 16S rRNA, secA)
Sequenciação Genómica Total
- laboratórios de referência: deteção rápida de M. tuberculosis + deteção de genes de resistência a ntibióticos (ex.: rifampicina, isoniazida)

Question 20

Mycobacterium tuberculosis — Classificação de Resistências

Answer 20

• A aquisição de resistência em M. tuberculosis ocorre devido a mutações espontâneas a cerca de 10^8 divisões celulares
• Mudanças em nucleótidos individuais (point mutations) resultam em resistência a drogas individuais
• A acumulação sequencial destas mutações resulta no aparecimento de multiresistências (TB-MR)
• Para um isolado ser considerado TB-MR tem de ser resistente à RPM e INH
• Atualmente muitas estirpes TB-MR mutaram e tornaram-se mais agressivas evoluindo para o tipo tuberculose extensivamente resistente (TB-XDR)
• As TB-XDR são resistentes a um dos antibacilares de segunda linha injetáveis (amicacina - AM, canamicina - KM e capreocimina - CAP) e a uma fluoroquinilona (FQ)