toxiciteitsonderzoek

Question 1

regulatorische toxicologie

Answer 1

= info verzamelen proeven: chemische stof ziekte of dood veroorzaakt
> standaarden definieren: dosis chemische stof zonder schedelijk effect
- autoriteiten:
> mondiaal: OECD
> europees: REACH, EHA
> nationaal: FAVV, FAGG, FANC,…

Question 2

soorten

Answer 2

-acuten
- sub-chronisch
- chronisch
> carcinogeniteit
> mutageniteit
> reproductieve
> immuno
> neuro
> dermale & andere orgaan testen
> lokale overgevoeligheid

Question 3

in dieren in ideale situatie

Answer 3

• =toediening
• dosis-respons relatie bestuderen
• NOAEL & LOAEL
• plan staalname

Question 4

acute toxiciteitstesten

Answer 4

• 14d opgevolgd
• basis toxicologische info
• info onmiddelijke schadelijke effecten & klinische verschijnselen
• identificatie tetroffen organen
• info werkingsmechanisme
• LD50, LC50, LDlo

Question 5

OECD nr41 (afgeschaft)

Answer 5

• 5 dieren per sex
• 3 dosissen + controle groep > 40 dieren min
• eind = LD50

Question 6

OECD nr 420 (fixed dose procedure)

Answer 6

• 1 species, 1 sex
• eind = mortaliteit
• 5 klasses

Question 7

tekening main study & sighting studie OECDnr420

Answer 7

p153

Question 8

subacute toxiciteitsstudies

Answer 8

• max 1 maand
• short term, repeated dose (dagelijk oraal/dermaal)
• 3 doseringen
• onmiddelijk vs vertraagd effect
• bioaccumulatie
• omkeerbaarheid schade
• ontwikkeling tolerantie
• NOAEL/LOAEL

Question 9

chronische toxiciteitsstudie

Answer 9

• knaagdier + niet
• superhygiënische omstandigheden
• min 4 dosis groepen : NC, midden, hoge, lage
• laattijdig optreden effecten + reversibiliteit
  > +NC, hoge osis
• NOAEL/LOAEL

Question 10

in vitro testen

Answer 10

• cytotoxiciteitsassay (# dode cellen)
• viabiliteitsassay (# levende cellen)
  > integriteit membraan
  > metabole competentie
  > leefbaarheid cellen
  > proliferatie cellen
  > aantal cellen
  > ontsteking/irritatie
• geen info interactie verschillende weefsel

Question 11

viabiliteitsassay

Answer 11

• verlies membraanintegriteit
  > ATP daalt (luciferase)
  > LDH lekkage
  > propidiumiodide test
  > tryptofaan kleuring
• metabole activiteit
  > reductie tetrazoliumzouten (MTT reductie)
  > reductie resazurine
  > merkers voor apoptose

Question 12

tekening LDH assay: reductie INT

Answer 12

p161

Question 13

LDH assay: reductie resazurin

Answer 13

p161

Question 14

propidium iodide test

Answer 14

• penetreert door membraan dode cellen
• intercaleert dsDNA
• rood bij 488nù
• = hvh DNA

Question 15

detectie apoptosis

Answer 15

caspase assays
> -8, -9, -3/7
- TUNEL analyse aanwezigheid oligonucleosomale DNA fragmenten in cellen