Клетки гостоприемници

Question 1

Определение за клетка гостоприемник

Answer 1

Жива система, в която да се въведе вектора с целевата ДНК последователност.

Question 2

Какви клетки гостопримници се избират в зависимост от целта?

Answer 2

Цел: Изолиране на ген за
структурен анализ -> по-проста система;
Цел: Експресия на генетична информация в по-висш еукариотен организъм -> по-специфична система

Question 3

Изисквания към клетките гостоприемници

Answer 3

• лесни за манипулация и разпространение;
• голямо разнообразие от генетично дефинирани щамове;
• възможност за приемане на редица вектори.

Question 4

Х-ки на E.coli като подходящ гостоприемник

Answer 4

• детайлно проучен, многоразнообразни щамове, необходими за специфични приложения;
• грам-отрицателна бактерия с единична хромозома, пакетирана в компактна структура (нуклеоид);
• размер на генома – 4.6 × 10*6 нд, пълно секвениране;
• иРНК е веднага на разположение за транслация, без посттранскрипционна модификация;

Question 5

Недостатъци при използването на клетки, различни от E.coli (Bacillus, Pseudomonas
и Streptomyces) и как се преодоляват?

Answer 5

• по-малък брой подходящи вектори;
• проблеми при въвеждането на
  рекомбинантна ДНК в клетката;
  Преодоляване на много от недостатъците с помощта на
  следния подход:
• първично клониране в Е. coli;
• изолиране на търсената последователност;
• въвеждане на пречистената ДНК в целевата клетка гостоприемник.

Question 6

Какво са “вектори совалки”?

Answer 6

Вектори, които могат да функционират в целевата клетка
гостоприемник и Е. coli.

Question 7

Недостатък на използването на прокариотни организми като гостоприемник за клониране

Answer 7

• липса мембранно обособени органели;
• вероятност някои еукариотни гени да не функционират в E. coli така, както биха функционирали в нормалната си среда;
• възпрепятстване на тяхното изолиране чрез селекционни механизми, които зависят от генната експресия.

Question 8

Примери за клетки гостоприемници гъби

Answer 8

S. cerevisiae
Aspergillus nidulans
Neurospora crassa

Question 9

Едноклетъчни водорасли, използвани като клетки гостоприемници

Answer 9

Chlamydomonas reinhardtii – всички предимства на микроогранизмите + структурна и функционална организация на растителните клетки

Question 10

Растителни и животински
клетки като клетки гостоприемници

Answer 10

Развитие като клетъчни култури – по-лесни за манипулиране, в сравнение с цели организми;