1. Éléments de base Flashcards
But biopsie et 3 méthodes de biopsie
But: préciser le diagnostic/pronostic
Méthodes: à l’aiguille fine, par poinçon et en excision
Définition histo, différence avec la physio
histo: science qui étudie la structure microscopique des tissus et des organes
représentation structurelle de fonction, observation de la structure microscopique des tissus
physio: représentation fonctionnelle de la structure
C’est quoi une cellule?
Unité structurelle et fonctionnelle de base
Cellule eucaryote comporte ….
-Cytoplasme avec un noyau
-Membrane cytoplasmique
-organites intracellulaires
Deux types de cellule dans un animal, lesquels?
-somatiques: toutes dérivent de la même cellule, génome identique
-Germinales: gamètes
Quels sont les 4 tissus de base?
-tissu épithélial
-tissu de soutien ou conjonctif
-tissu musculaire
-tissu nerveux
Caractéristiques et fonctions du tissu épithélial?
-cellules polarisées, liens intimes
-tapisse surfaces/cavités
-forme les glandes
Rôles: barrière, protection, absorption, sécrétion
Caractéristiques et fonctions du tissu de soutien ou conjonctif?
-lie les autres tissus
-peu de cellules vs matrice extracellulaire abondante
Rôles: ancrage, milieu d’échanges, protection/défense, stockage
Caractéristiques et fonctions du tissu musculaire?
-capacité de contraction (actine/myosine)
-génère mouvement
-3 types: squelettique, cardiaque, lisse
Rôle: contraction
Caractéristiques et fonctions du tissu nerveux?
-neurones (gèrent information) et cellules gliales (supportent et protègent)
Rôle: Gère information (reçoit, intègre et transmet)
Quels sont les 4 niveaux d’organisation des cellules dans un animal?
Tissu -> organe -> système -> animal
-tissu: cellules et matrice extracellulaire, proportion varie selon tissu
-Organe: au moins 2 tissus (souvent 4)
-Système: groupe d’organes avec des liens anatomiques (gastro-intestinal, urinaire) et/ou fonctionnel (endocrinien, immunitaire)
-Animal: ensemble des systèmes
Objectif de l’histologie (en pratique)?
Obtenir des coupes fines du tissu pour
-Microscopie optique
-conserver les caractéristiques initiales
-limiter la formation d’artefacts
Étapes production d’une lame microscopique (avec mini description)
-Fixation (rapide, préserver tissu, éviter dégradation, formaldéhyde, lie prot et inhibe métabolisme)
-Déshydratation/dégagement (série graduel bain alcool de 50 à100% pour pas dégrader)
-Inclusion/enrobage: support rigide pour faciliter coupe, paraffine
-coupe
-montage: lame de verre, coloration, lamelle
Pourquoi faire une coloration sur une lame?
Coupes transparentes avec densité optiques similaires entre différentes composantes des tissus donc permet de mieux voir les différences
Types de colorants
voir diapo 20 cours 1
Pourquoi utiliser la microscopie? Résolution dépend de quoi?
Agrandir pour mieux révéler les détails
Résolution:
-système optique (objectifs)
-longueur d’onde de la source lumineuse
Microscope optique: éléments et limitations
Éléments:
-source lumineuse
-diaphragme
-condenseur
-plateau
-objectifs
-oculaires
Limitations:
-faut que l’objet soit dans le plan focal
-difficile pour des objets épais, en reliefs ou inclinés par rapport à l’objectif
Types de microscope
-Optique
-Confocal
-Électronique à transmission (MET)
-Électronique à balayage
Caractéristiques microscope confocal
-images de très faible profondeur de champ
-utilise plupart du temps un faiseau laser comme source de lumière
-plan focal à différents niveaux de profondeur dans l’échantillon
-possible d’obtenir une représentation digitale tridimensionnelle de l’objet
Caractéristiques microscope électronique à transmission
-Source lumineuse: faisceau d’électron
-Condenseur et objectifs électromagnétiques
-image bidimentionnelle (région blanches: électrons traversent, régions grises: électrons traversent plus ou moins, régions noires: électrons ne traversent pas)
-techniques spéciales (fixation, enrobage, coloration, coupes très minces)
Caractéristiques microscope électronique à balayage
-source lumineuse: faisceau d’électron, augmente la résolution
-électrons qui ne traversent pas: balayage en surface par des électrons secondaires
-image tridimensionnelle
-techniques spéciales (pas de coupes, enrobage de film de carbone ou d’or)
Autres techniques que la microscopie (2)
-Immunohistochimie
-coupes congelées/cryomicrotome
Quoi immunohistochimie et comment ça marche
Quoi: détection de protéines spécifiques
-Approche directe: génération d’un anticorps (poly-, monoclonaux), liée à la fluorescence/enzyme (HRP). Incubation, rinçage, révélation lame
-Approche indirecte: Va avoir anticorps primaire (espèce 1) et un anticorps secondaire (espèce 2, anti-Ig espèce 1)
Quoi coupes congelées/cryomicrotome? Avantage, inconvénients
Tissu directement dans enrobage, congelé vite
Avantage: rapide (quelques minutes vs jours pour autres méthodes), évite formaldéhyde et paraffine
Désavantages: qualité des lames (image moins nette)
