Traces Biologiques

Question 1

De quoi est fait le sang?

Answer 1

55% – plasma sanguin (eau, glucose, protéines, lipides)
45% – globules rouges (99%), globules blancs et plaquettes
~5’000 à 10’000 globules blancs / ml de sang –> ADN du sang

Question 2

De quoi est fait le sperme?

Answer 2

liquide séminal + éléments cellulaires (spermatozoïdes, cellules
épithéliales,macrophages, nutriments, oligoéléments,…)
~20 à 200 millions spermatozoïdes / ml de sperme

Question 3

De quoi est fait la salive

Answer 3

sécrétée par les glandes salivaires (99% eau, protéines, électrolytes, …)
+ cellules buccales –> contient de l’ADN

Question 3

De quoi est fait la salive

Answer 3

sécrétée par les glandes salivaires (99% eau, protéines, électrolytes, …)
+ cellules buccales –> contient de l’ADN

Question 4

De quoi est fait les traces de contact?

Answer 4

composés endogènes (glandes corporelles) + (semi-)exogènes

Question 5

De quoi est faite les cheveux/poil?

Answer 5

cheveu tombé vs cheveu arraché –> présence de la racine
ADN nucléaire si racine (succès <10%)
ADN mitochondrial sinon (succès ~75%)

Question 6

Quels traces biologiques sont riches en ADN? et non?

Answer 6

sang et sperme
le reste:
▪ salive
▪ traces de contact
▪ sécr. vaginales
▪ urine
▪ os/dent
▪ cheveux/poils
▪ ongle

Question 7

Quelles sont les differentes etapes de l’exploitationd es traces biologiques?

Answer 7

Extraction
Quantification –> quantite que l’on va prelever
Amplification –> PCR (polymerase chain reaction) : copie des fragments d’ADN d’interet pour avoir une quantite analysable (32 cycle =1 milliard de copie)
Électrophorèse capillaire
Détermination des allèles

Question 8

Def test d’orientation

Answer 8

Tests de natures diverses qui permettent d’attester de la nature biologique d’une trace

Question 9

Expliquer la partie “nature diverses” de la def de test d’orientation

Answer 9

principaux types:
-observation visuelle
-tests chimiques chromophoriques (activité catalytique du fluide)
-tests immunochromatographiques (reconnaissance moléc.)

Question 10

Expliquer la partie “attester” de la def de test d’orientation

Answer 10

on ne confirme pas, on ajoute une information d’enquete, orientation
spécificité (immunochr. > chromoph.)
faux positifs (chromoph. > immunochr.)
faux négatifs

Question 11

Expliquer la partie “nature biologique” de la def de test d’orientation

Answer 11

strategie de ciblage:
-soit on cible un compose qui est principalement present dans le fluide (choline pour le sperme_
-soit on cible les proteines qui sont dote de proprietes catalytiques (hemoglobline)

Question 12

Def test chromophorique

Answer 12

test qui est base sur une molecule qui a la base est incolore qui est mise en contact avec des reactif et si il y’a une enzyme –> reaction va se faire entre le test et le reactif –> donne un compose qui est colore
si ya pas d’enzyme –> lentement ou pas du tout
aspect catalytique qui va se faire

Question 13

def tests immunochromatographie?

Answer 13

test avec une petite plaquette avec fluide qui migre
test pour le sang:
on cherche a savoir si il ya de l’hemoglobine
la on met le liquide, il y’a anticorps present qui se liront avec l’hemoglobine si il y’en a
–> on met le fluide
–> 2 lignes (controle et la ligne du test dit positif)
–> ligne controle: anticorps qui vont cibler l’hemoglobine qui est deja presente la on mt la goute
–> ligne test: anticorps qui doivent capter ceux qui sont present dans le fluide que l’on met (si y’en a pas, on voit que la barre controle (la 2eme))

Question 14

Detection visuelle du sang

Answer 14

-lumiere blanche
–> tentative de localisation possible
–> caracterisation de trace
–> caracterisation du suppot

-lumiere forensique
–> sang peut absorber certaines longueurs d’onde –> apparait noir/fonce (420-270nm)

Question 15

Quels sont les autres test que l’on peut faire sur le sang en plus de l’optique

Answer 15

test chimiques chromophoriques

Question 16

decrire test chromophorique pour le sang

Answer 16

test sur l’hemoglobine car:
-specifique au sang et activite catalytique (oxyde en presence d’eau oxygene)

on va prendre une mol qui est incolore en presence d’eau oxygene (fforme reduire) et si y’a hemoglobine –> reaction se fait –> apparait colore (forme oxyde)
AH2 + H2O2 = A + 2H2O

Question 17

Donner les differents indicateurs utilise pour le test chromophoriques du sang

Answer 17

phenolphtaleine
tetrametyle
luminol

Question 18

Comment est la specificite du test chromophorique du sang? faut + ? faux - ?

Answer 18

ne permet pas de detecter si cest humain ou non

faux + si le susbtrat a de peroxydase ou agents oxydant (fruits.legume, rouille)

faux - : limites

Question 19

Donner le cas celebre explique lors des test chromophoriques du sang?

Answer 19

dingo case (AU)

Question 20

Test chromophorique, test optique. quoi dautre pour le sang?

Answer 20

test immunochromotogrpahique

Question 21

Expliquer test immunochromatographique du sang

Answer 21

on cible la prot (pas son activite catalytique)
–> hemoglobine et glycophorine A

Question 22

Que fait glycophorine A?

Answer 22

proteine empechant l’agregation des globules

Question 23

Donner les 3 types d’indicateurs commerciaux utilise pour les test immunochromatographique du sang? Specificite ? Faux + ? et faux -?

Answer 23

Hexagon OBTI -> hemoglobine (souvent animaux)
SERATEC Hemdirect –> hemoglobine (des fois animaux)
RSID Blood –> Glycorphorine A (que pour detecter humain)

+ specifique que chromophorique

faux + : + rare que chromophorique (liquide acide)
faux - : certain ne vont pas reagir si trop de sang ou temp ambiante est trop basse

Question 24

Comment peut - on faire la difference entre du sang menstruelle et peripherique ? Commercial?

Answer 24

test immunochromatographique –> hemoglobine + D-dimeres
D dimere = prod de degradation de la fibrine (resp.coagulation) => marqueur de sang menstruel
SERATEC PMB -> hemoglobine _ d-dimere = mais animaux peuvent reagir

Question 25

Quels sont les tests pour le sperme ?

Answer 25

-test de detection visuelle
-test chromophorique
-test immunochromatographique
-confirmation visuel

Question 26

Expliquer Detection visuelle du sperme

Answer 26

-lumiere blanche
–> localisation mais peu detectable car incolore
–> caracterisation de trace
–> caracterisation du support

-lumiere forensique
–> sperme fortement luminescent (420-470nm)

Question 27

Expliquer test chromophorique du sperme

Answer 27

cible :phosphatase acide -> pas specifique au sperme mais en grande quantite + activite catalytique (coupe/hydrolyse les groupements phosphate)
donc mm chose que le sang
marqueur incolore qui presente un groupement phosphate en presence d’eau et si ya de la phosphate acide –> devient colore

A-phosphate + H2O => A + phosphate

Question 28

Donner les brand commercial des test chromophoriques du sperme? specificite? faux +? faux -?

Answer 28

naphtylphosphate + fast blue b
bromochroroindolyhphosphate
methylumbellferyphosphate
phosphatesmo

specificite: pas assez forte pour differencier homme et animaux

faux +: jus de fruit frais, fluide contenant de la phosphatase acide (secretions vaginale mais diff d’intensite (Diff de conc.))
faux -: possible (perte d’activite par deg de la phosphate acide)

Question 29

Expliquer test immunochromatographique pour le sperme

Answer 29

cible: prostate-specific antigen (PSA) ET Semenogeline

Question 30

Def PSA? def semenogeline?

Answer 30

psa: Enzyme (protease) produit par la prostate et ayant pour fonction de degrader la semenogeline

semenogeline: glycoprot resp. de la viscosite du sperme au moment de l’ejaculation et qui va etre degrade (par psa) pour fluidifier et release ls spermatozoide

Question 31

Donner les noms des brands de test immunochromatographique du sperme? avec leur specificite . faux +?

Answer 31

SERATEC PSA -> PSA (homme et primate)
RSID semen -> Semenogeline (homme)
faux +: rare (SERATEC = urine)

Question 32

Expliquer la confirmation visuelle pour le sperme?

Answer 32

Christmas tree
–> test qui permet de colorer le spermatozoide en plusierus couelur
–>
Nuclear Fast Red -> tete coloree en rouge
Picroindigocarmine –> queue colore en vert

si on voit –> confirmation de spermatozoide
si on voit pas –> ya pas de spermatozoide mais sperme

Question 33

Donner les types de test pour la salive

Answer 33

-Detection visuelle
-test chromophoriques
-test immunochromographique

Question 34

Expliquer la detection visuelle pour la salive?

Answer 34

lumiere blanche :
-tentative de localisation posible mais peu detectable car incolore
-caracterisation de trace
-caracterisation de support

lumiere forensique:
-peut luminer faiblement a 420-470nm

Question 35

Expliquer test chromophore pour salive

Answer 35

cible: alpha-amylase (conc eleve dans la salive + activite catalytique (hydrolyse/coupage des saccharides)

conception d’un papier dans lequel un colorant est enferme dans une microsphere d’amidon (il reste d’un cote du papier) MAIS si on met ce papier sur une trace potentiel de salive -> la ou ya de la salive, le colorant se fait attaquer et colorant est liberer est migre sur le papier

papier + amidon = papier + sucre si ya de l’aphaamylase (salive)

Question 36

Donner la brand de test chromophorique pour la salive? specificite? faux +?

Answer 36

phadebas
specificite: homme ou aniamux
faux +: certain aliments, excrement

Question 37

Expliquer test immunochromotographique de salive? brand? specificite? Faux +?

Answer 37

cible: alpha-amylase (pas son activite catalytique)

SERATEC amylase (homme et primate)
RSID saliva (homme et primate)

faux+ connus: rare (rsid= lait maternel, matiere fecale)

Question 38

Quel test utiliser pour l’urine? expliquer . brand? avec specificite

Answer 38

immunochromatographique
cible: uromoduline (prot de tamm-horsfall)
glycoprot produite par les reins: prot la plus abondante de l’urine
brand: RSID urine -> uromoduline (humain + chien gorille)

Question 39

Comment detecter les secretions vaginales ou cell epitheliales?

Answer 39

aucun test d’orientation spec existant. –> traces de contact preleve a l’aveugle

Question 40

QUels sont les points neg des test chromophoriques et immunochromatographiqeu?

Answer 40

-consommation dune fraction du materiel bio requis
-limitation a une seule cible biologique par test
-sensibilite variable
-chromophorique - cher, plus facile