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MCB-1908 > Croissance et division des cellules bactériennes > Flashcards

Croissance et division des cellules bactériennes Flashcards

1
Q

Quelle quantité de m.o. dépose-t-on dans un inoculum?

A

Entre 10^3 et 10^6

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Q

À quel endroit se forme le septum chez les bacilles?

A

Transversal à l’axe longitudinal

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Q

À quel endroit se forme le septum chez les cocci?

A

À l’équateur

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Q

Nommer des organismes qui utilisent la fission binaire transverse pour se diviser?

A
  • Escherichia coli
  • Bacillus subtilis
  • Enterococcus faecalis
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Q

En quoi consiste le bourgeonnement?

A

Formation d’un renflement jusqu’à ce qu’il atteigne la même taille que la cellule mère

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6
Q

Nommer quelques organismes qui utilisent le bourgeonnement comme méthode de division cellulaire.

A
  • Rhodopseudomonas acidophila
  • Hyphomicrobium vulgare
  • Listeria monocytogenes
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7
Q

En quoi consiste la fragmentation d’hyphes?

A

Une cellule filamenteuse donne plusieurs cellules plus petites

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8
Q

Nommer un organisme qui utilise la fragmentation d’hyphes comme méthode de division cellulaire.

A

Nocardia

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9
Q

Où sont situées les exospores dans une cellule?

A

À l’extrémité des hyphes

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10
Q

Nommer un type de cellule qui utilise des exospores.

A

Streptomyces

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11
Q

Quelle est l’étape préliminaire à la formation du septum?

A

La duplication du chromosome

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12
Q

Mésosome

A

Site d’attachement des chromosome, utilisé pour la ségrégation des chromosomes chez les procaryotes

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13
Q

Quel est le rôle général des protéines ParA et ParB?

A

Migration des chromosomes vers les pôles cellulaires

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14
Q

Avec quoi ParB interagit-il?

A

Avec parS près d’oriC-chromosome

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15
Q

Comment est assemblée la protéine MreB?

A

En spirale

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16
Q

À quoi sert l’assemblage en spirale de la protéine MreB?

A

Au déplacement des chromosomes (comme un convoyeur)

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17
Q

Avec quoi interagit la protéine MreB?

A

Avec ParA, ParB et oriC

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18
Q

Qu’arriverait-il si nous portions une cellule E.Coli qui possède un mutant ftsZ à 42 C?

A

Il y aurait réplication, mais pas de formation du septum en raison du filament thermosensible

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19
Q

À quoi sert la protéine ftsZ?

A

Forme des anneaux concentriques qui induisent l’invagination de la membrane cytoplasmique

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20
Q

Quel est le rôle des protéines Min (MinC, MinD et MinE)?

A

Limite la construction de l’anneau Z au milieu de la cellule (si elles sont présentes, l’anneau ne peut se construire).

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21
Q

Que se passe-t-il si MinC et MinD sont incorrects (mutants)?

A

ftsZ pourrait se faire de façon excentrique et la division serait au mauvais endroit (formation de minicell sans chromosomes)

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22
Q

Vrai ou faux. La croissance bactérienne suit une progression linéaire.

A

Faux, c’est une progression exponentielle (géométrique)

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23
Q

À l’aide de quelle formule peut-on calculer le nombre de cellules d’une génération à une certaine étape de la fission binaire?

A

2^n, n étant le nombre de générations

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24
Q

À l’aide de quelle formule peut-on calculer la population finale dans la fission binaire?

A
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25
Q

À l’aide de quelle formule peut-on calculer le nombre de générations dans la fission binaire?

A
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26
Q

Qu’est-ce que le temps de génération?

A

Temps nécessaire au dédoublement de la population

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27
Q

Si le milieu est riche, le temps de génération sera … ?

A

Plus faible

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28
Q

Quelle formule nous permet de calculer le temps de génération?

A

(T2-T1)/n

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29
Q

Quel est le record de temps de génération le plus court?

A

Vibrio natriegens (9,6 min)

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30
Q

Quel est le record de temps de génération le plus long?

A

Treponema pallidum (33h)

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31
Q

Quelles sont les 4 phases de la courbe de croissance?

A
  • Phase de latence
  • Phase exponentielle de croissance
  • Phase stationnaire
  • Phase de décroissance
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32
Q

Comment peut-on qualifier l’activité physiologique dans la phase de latence?

A

Élevée

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33
Q

Est-ce qu’il y a augmentation de la population dans la phase de latence?

A

Au début non (adaptation au milieu), mais à la fin les cellules commencent à se diviser

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34
Q

À quoi ressemble graphiquement la phase exponentielle de croissance?

A

Une droite (car l’augmentation est constante)

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35
Q

Comment est le temps de génération dans la phase exponentielle de croissance?

A

Constant et minimal

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36
Q

Dans quelle phase de croissance le métabolisme est-il à son maximum

A

Dans la phase exponentielle de croissance

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37
Q

Pourquoi la phase exponentielle de croissance est-elle de courte durée?

A

Car il y a épuisement rapide des nutriments

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38
Q

Vrai ou faux. Les cellules dans la phase exponentielle de croissance présentent certaines différences physiques et chimiques.

A

Faux, elles sont toutes identiques

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39
Q

Vrai ou faux. La phase de latence est de durée variable.

A

Vrai

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40
Q

Dans quelle phase de croissance retrouve-t-on la densité maximale de la population?

A

Phase stationnaire de croissance

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41
Q

Pourquoi dit-on que la population est constante dans la phase stationnaire?

A

Car il y a un équilibre entre la division et la mort cellulaire

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42
Q

Vrai ou faux. Les cellules dans la phase stationnaire de croissance présentent certaines différences physiques et chimiques.

A

Vrai, il s’agit d’une population hétérogène

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43
Q

Dans quelle phase de croissance y a-t-il formation d’endospores et pourquoi?

A

Dans la phase stationnaires, car les conditions deviennent moins propices.

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44
Q

Quelle est la densité maximale de population dans un milieu?

A

5-15 x 10*9 cellules/ml

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45
Q

La concentration de quel élément augmente dans la phase stationnaire?

A

Des substances toxiques (déchets métaboliques)

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46
Q

Quelle est la durée de la phase stationnaire de croissance?

A

Durée variable

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47
Q

Vrai ou faux. Il reste un peu de division cellulaire dans la phase de mortalité/déclin.

A

Faux, il y a absence de division cellulaire

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48
Q

Comment peut-on qualifier graphiquement la phase de mortalité?

A

Une pente descendente

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49
Q

Dans quelle phase de croissance retrouve-t-on la concentration maximale de déchets métaboliques?

A

Dans la phase de mortalité/déclin

50
Q

Pourquoi ne pourrait-il pas y avoir formation d’endospores dans la phase de mortalité?

A

Car la formation d’endospores demande de l’énergie, et il n’y en a plus dans cette phase

51
Q

Durée de la phase de mortalité/déclin

A

Variable ( N.Gonorrheoae 72h, E.coli plus de 60j)

52
Q

Quel nom donne-t-on à une culture continue en vase non clos?

A

Chémostat

53
Q

Dans quelle phase se trouve continuellement la population dans un chémostat?

A

Dans la phase exponentielle de croissance

54
Q

Qu’est-ce que le taux de dilution?

A

Volume ajouté/volume total/h

55
Q

Comment contrôle-t-on le taux de croissance de la population dans un chémostat?

A

En changeant le taux de dilution

56
Q

Dans quelle situation les conditions sont-elles optimales dans un chémostat?

A

Si le taux de dilution = taux de croissance

57
Q

Dans quelle situation les conditions sont-elles limitantes dans un chémostat?

A

Si le taux de dilution < taux de croissance

58
Q

Qu’arrive-t-il si le taux de dilution > taux de croissance?

A

Wash out (lavage)

59
Q

Quelles sont les 3 catégorie de mesure de la croissance bactérienne (compte le nombre de bactérie)?

A
  • Énumération cellulaire
  • Quantification de la masse cellulaire de la population
  • Quantification d’une activité cellulaire ou d’un constituant cellulaire
60
Q

Vrai ou faux. L’énumération cellulaire est un comptage indirect de cellules.

A

Faux, c’est un comptage direct

61
Q

Quelle est la principale limite de l’énumération cellulaire dans la chambre de Petroff-Hausser?

A

Viabilité des cellules (on compte les corps bactériens, mais nous n’avons aucune idée sur leur viabilité)

62
Q

Comment s’effectue le calcul sur une chambre de Petroff Hausser?

A

nombre bactéries comptées X 50 X 10^3 (pour une lecture en cm^3 donc par ml)

63
Q

Quel autre nom donne-t-on à l’énumération électronique?

A

La cytométrie en flux

64
Q

À quoi servent les fluorochromes vitaux et dans quelle méthode d’énumération sont-ils utilisés?

A

À faire le tri des cellules vivantes et mortes (énumération électronique)

65
Q

Qu’est-ce qui sert de témoin interne dans l’énumération électronique?

A

Billes de tailles et concentrations connues

66
Q

Quelle est la principale limite de l’énumération électronique?

A

La taille des organismes est à la limite de détection

67
Q

Quelle méthode d’énumération cellulaire permet de détecter des spores dans l’air?

A

Énumération électronique

68
Q

Quel est le principe de l’énumération cellulaire?

A

cytométrie en flux : faire passer rapidement à travers de faisceau de lumière

69
Q

Comment procède-t-on pour faire de l’énumération des unités viables?

A

Dilutions séquentielles suivies d’étalement (en surface ou en profondeur)

70
Q

Combien de colonies par pétri doit-on avoir en énumération des unités viables pour que ce soit statistiquement valable?

A

Entre 30 et 300 colonies

71
Q

Quelles unités sont utilisées dans l’énumération des unités viables?

A

UFC (unités formatrices de colonies)

72
Q

Si nous avons une population très diluée, comment pourrait-on utiliser la technique d’énumération des unités viables?

A

En utilisant un filtre que nous déposons sur un milieu de culture

73
Q

Pourquoi les UFC ne correspondent pas à la population totale?

A

Car < 1% des espèces sont cultivables

74
Q

Quel appareil est utilisé dans les méthodes d’énumération turbidimétriques?

A

Un spectrophotomètre

75
Q

Peut-on avoir une idée de la viabilité des cellules dans les méthodes turbidimétriques?

A

Non , on ne mesure que le trouble

76
Q

Quelle courbe est utilisée dans les méthodes turbidimétriques?

A

Une courbe de densité optique (DO), en fonction de l’UFC/ml

77
Q

Combien de populations peut-on mesurer dans les méthodes turbidimétriques?

A

10^7 à 10^8 UFC/ml

78
Q

À quoi correspondent les méthodes moléculaires d’énumération cellulaire?

A

Extraction de l’ADN total et amplification enzymatique d’une séquence spécifique d’ADN (PCR)

79
Q

Quels sont les avantages de la quantification par PCR?

A
  • Rapide
  • Quantification d’organismes non cultivables
  • Quantification simultanée de plusieurs organismes
  • Quantification d’un organisme précis dans une culture mixte
80
Q

En quoi consiste la détermination du poids sec?

A

Une filtration et séchage complet à 100-150 C

81
Q

Pourquoi la courbe de référence/étalon du poids sec en fonction des UFC n’est pas la même que la courbe de croissance

A

Dans la phase de mort/déclin, le poids sec ne descend pas même si il y a moins d’organisme vivants

82
Q

Pourquoi est-il si important de sécher complètement avant de compter les cellules avec la technique du poids sec?

A

Car 1 ul d’eau pèse 1 mg, ce qui est la même masse que 10*9 cellules

83
Q

Pour quels types d’organismes la détermination du poids secs est une méthode de choix?

A

Pour les bactéries agrégées ou formant des hyphes:

  • Mycobacterium
  • Streptomyces
  • Mycètes

et les populations à densité élévée

84
Q

Quel composé représentatif peut être utilisé pour la détermination chimique?

A
  • Azote total (a.a. nucléotides…)
  • Peptidoglycane
  • ADN
  • ATP
  • Produits finaux de la fermentation
85
Q

Quelles sont les méthodes denombrenent/mesure de croissance les plus fréquentes?

A
  • Unités viables
  • Turbidimétriques
  • En croissance: moléculaires
86
Q

Quels sont les différents mécanismes de divisions cellulaires chez les bactéries?

A
  • Fission binaire transverse
  • Bourgeonnement
  • Fragmentation d’hyphes
  • Formation d’exospores
87
Q

Quel est le mécanisme de division cellulaire le plus fréquent?

A

Fission binaire transverse. (ex : E.coli)

88
Q

Quel est le fonctionnement de la fission binaire transverse?

A
  1. Augmentation de la taille longitudinalement de la cellule mère jusqu’à l’atteinte du double
  2. Formation du septum
  3. Division en 2 cellules filles
89
Q

Quel est le fonctionnement de la formation d’exospores?

A

Fonctionnement semblable à la fragmentation d’hyphes mais l’hyphe mère continue d’exister. Spores produits à l’extérieur de la cellule (à l’extrémité des hyphes).

90
Q

Qu’est-ce qui permet de toujours avoir le matériel génétique dans les cellules filles?

A

Les molécules qui bloquent la duplication engendrent l’inhibition de la formation du septum. Le septum est formé que lorsque l’ADN est dupliqué et situé aux extrémités.

91
Q

Quelles sont les étapes de la formation du septum?

A
  1. Invagination de la membrane cytoplasmique
  2. Croissance du peptidoglycane (paroi cellulaire)
  3. Cloisonnement des cytoplasmes (fusion des membranes)
  4. Séparation des 2 cellules filles (synthèse de nouvelle paroi au septum)
92
Q

Qu’est-ce que la variable k?

A

Le taux de croissance, constante de vitesse de croissance moyenne.

93
Q

Quelles sont les avantages de la croissance bactérienne in vitro?

A
  • Croissance limité par les différents nutriments qu’on utilisent (les nutriments ne sont pas renouvelés)
  • Évolution prévisible de la population
94
Q

Quand débute la phase de latence et quand termine-t-elle?

A

Elle débute lorsque l’on dépose l’échantillon et termine lorsque les cellules commences à se diviser (début de la courbe).

95
Q

À quoi correspond la phase de latence?

A

À l’adaptation des cellules au milieu. Le début de la division des cellules montre que les cellules se sont adaptées au milieu.

96
Q

Vrai ou faux. Il y a augmentation de la population tout au long de la phase de latence.

A

Faux. Il n’y a pas d’augmentation de la population au début de la phase de latence car les cellules ne sont pas adaptées au milieu.

97
Q

De quoi dépend la durée de la phase de latence?

A
  • De l’âge des cellules ensemencées
  • De l’état physiologique
  • Du milieu
98
Q

À quoi correspond la phase stationnaire?

A

Au ralentissement de la croissance (droite horizontale sur le graphique). La population est constante (les cellules qui meurent sont remplacées par de nouvelles cellules, donc encore de la division).

99
Q

Quelles sont les conditions de croissance dans un chémostat, une culture en vase non clos?

A
  • Ajout constant de milieu frais
  • Élimination du milieu épuisé
  • Contrôle du pH, de la température, de l’agitation, des gaz, ect.
100
Q

Les chemostats permettent d’obtenir des conditions semblables in vitro aux ….?

A

Conditions in vivo.

101
Q

Quelles sont les façons de faire l’énumération cellulaire?

A
  • Chambre de Petroff-Hausser
  • Énumération électronique
  • Énumération des unités viables
  • Méthodes turbidimétriques
  • Méthodes moléculaires
102
Q

Que permet la chambre de Petroff-Hausser?

A

De compter des cellules dans un volume prédéterminé.

103
Q

Quels sont les avantages et les désavantages de la chambre de Petroff-Hausser?

A

Désavantages: on ne mesure que les corps bactériens, il est impossible de déterminé la viabilité des cellules et énumération d’une population entre 10 à la 7 et 10 à la 8.

Avantages: nécessite un minimum d’équipement et méthode rapide.

104
Q

Que permet l’énumération électronique?

A

Permet la détection de spores dans l’air et la caractérisation des populations hétérogènes.

105
Q

Vrai ou faux.

  • L’énumération électronique utilise la cytométrie en flux.
  • Le débit n’est pas contrôlé avec la méthode de l’énumération électronique.
  • L’énumération électronique utilise les fluorochromes vitaux pour énumérer les cellules vivantes et les cellules mortes et pour trier les cellules.
A
  • Vrai.
  • Faux.
  • Vrai.
106
Q

Quels sont les avantages et les désavantages de l’énumération électronique?

A

Désavantages: cher et les organismes de petites tailles ne sont pas évaluable (nécessite un témoin interne, bille).

Avantage: rapide

107
Q

Qu’est-ce l’énumération des unités viables?

A

Utilisation de dilutions séquentielles et l’étalement en surface ou en profondeur. Énumération en unités viables (UFC).

108
Q

Quelle est la limite de l’énumération des unités viables?

A

On ne peut qu’évaluer les organismes qui peuvent croître dans le milieu.

109
Q

Quels sont les avantages et les désavantages de l’énumération des unités viables?

A

Désavantages: Prend de l’espace et du temps, n’énumère que les organismes viables.

Avantage: économique

110
Q

Que permettent les méthodes turbidimétriques en énumération cellulaire? Quel est le principe?

A

Permet de quantifier le trouble. Utilisation de la spectrophotométrie pour mesurer la lumière absorbée (la densité optique augmente proportionnellement à la croissance).

111
Q

Quels sont les avantages et les désavantages des méthodes turbidimétriques?

A

Désavantages: doit y avoir au moins 10 à la 7 cellules pour apercevoir un trouble, on ne peut savoir si les cellules sont vivantes ou non

Avantages: rapide, l’appareil a d’autres utilisations en laboratoire, courbe de référence possible (conditions standardisées)

112
Q

Vrai ou faux. Les méthodes turbidimétriques sont peu utilisées en laboratoire.

A

Faux. Elles sont utilisées de routine en laboratoire.

113
Q

Quel est le fonctionnement des méthodes moléculaires en énumération cellulaire?

A

Extraire l’ADN total et de faire une amplification enzymatique (PCR).

114
Q

Que donne la PCR quantitatif en méthode moléculaire?

A

Une quantification en fonction de témoins positifs internes (nombre de copies / volume).

115
Q

Quels sont les avantages des méthodes moléculaires?

A
  • Rapide
  • Permet la quantification d’organismes non cultivables (pas nécessaire de cultiver)
  • Permet la quantification simultanée de plusieurs organismes
116
Q

Quels sont les désavantages des méthodes moléculaires?

A
  • Appareil coûteux
  • Spécificité de ce qui est amplifié
  • Spécificité des séquences
  • L’ADN ne provient pas nécessairement de cellules vivantes
117
Q

Comment peut-on quantifier la masse cellulaire?

A

En déterminant le poids sec (filtration + séchage complet) et comparanson avec une courbe étalon

118
Q

En quoi consiste la quantification d’une activité ou d’un constituant cellulaire?

A

Détermination chimique; doser les composés représentatifs de l’organisme et les facteurs de conversion.

119
Q

Vrai ou faux. La quantification d’une activité ou d’un constituant cellulaire a une application spécialisée.

A

Vrai.

120
Q

Vrai ou faux. Il existe une méthode de mesure de croissance universelle.

A

Faux. La méthode est choisie selon l’organisme et ce qu’on cherche à savoir.

121
Q

Quelles sont les méthodes de mesure de croissance les plus fréquentes?

A
  • Énumération des unités viables
  • Les méthodes turbidimétriques
  • Les méthodes moléculaires lorsque la population est en croissance

MCB-1908 (11 decks)

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