Mini-test Flashcards
Les réactions antigènes-anticorps
Bases chimiques de la réaction
Expliquer se qui rend la réaction réversible
C’est l’agitation thermique, qui fait en sorte que les molécules présent dans le milieu entrent en collision et l’énergie reçu lors de ces chocs tend à déstabiliser le complexe et à en permettre la dissociation. Ce qui permet aux antigènes et aux anticorps de pouvoir réagir de nouveau entre eux et former de nouveaux complexes.
Les réactions antigènes-anticorps
Nommer et expliquer les 5 facteurs physico-chimiques qui influençant la réaction
- Le pH: provoque un changement de conformation des protéines (la dénaturation d’une protéine peut faire qu’un Ac ne trouve plus son épithope.
- La force ionique du milieu: la diminution de la concentration en NaCl favorise la liaison ag-ac (une solution de faible force ionique favorise la liaison Ag-Ac, car il y a moins de charges + autour des globules rouges, ce qui fait qu’ils peuvent se rapprocher plus l’un de l’autre. Les macromolécules en solution de faible force ionique donc macromolécules dissipent les charges + et solution de faible force ionique diminuent la qualité de charges +, donc GR peuvent se rapprocher à une distance de moins de 25nm les IgG deviennent agglutinants.
- La température: la diminution de la température: certains Ag IgM réagissent mieux à 4oC, donc pas dangereux en transfusion. L’augmentation de la température: les IgG réagissent mieux à 37oC, donc dangereux en transfusion.
- L’affinité: est la force des interactions totales non covalentes entre un seul épithope de l’antigène avec un seul anticorps. Les anticorps de faible affinité se lient à l’antigène de façon lâche et tendent à se dissocier facilement, tandis que les anticorps de forte affinité se lient plus étroitement à l’antigène et restent liés plus longtemps.
- L’avidité: l’intéraction de la molécule d’anticorps avec la molécule d’antigène au niveau d’un site augmentera la probabilité de la réaction entre ces deux molécules au niveau d’un second site. ( IgM pentamétrique a souvent une plus faible affinité que l’igG, mais la haute avidité de l’IgM le rend capable de fixer efficacement l’Ag.
Les réactions antigènes-anticorps
Quel est le principe de l’immunoprécipitation?
C’est le principe de l’ag et l’ac qui sont soluble dans le milieu et suite à leur liaison, ils deviennent insolubles et forment un précipité visible.
Les immunoessaie avec marqueur
Quelles caractéristiques dois avoir une enzyme?
1- Elle doit avoir un haut degrés de pureté.
2- Ne pas faire partie des liquides soumis à l’analyse
3- Conserver ses propriétés une fois fixé à l’Ag ou à l’Ac
4- La méthode de révélation doit être rapide, facile d’exécution et très sensible.
Les immunoessaie avec marqueur
Quel est sa principale particularité?
Ils s’appuient sur la réaction de rencontre initiale entre l’antigène et l’anticorps
Les immunoessaie avec marqueur
Quel est le principe des méthodes en phase homogène?
Lorsque l’anticorps modifie l’activité du marqueur de l’antigène de façon importante, ça révèle du même coup l’importance du complexe Ag-Ac. Dans ces cas, il n’est pas obligatoire de séparer la fraction liée de la fraction libre avant de procéder à la réaction de révélation du marqueur.
Les immunoessaie avec marqueur
Quels sont les avantages des méthodes en phase homogène?
1-Elles peuvent être exécutées selon un mode cinétique
2- Elles sont faciles à exécuter
3- Très accessible à l’automation
4- Les résultats peuvent être obtenus dans un délais de quelques minutes.
Les immunoessaie avec marqueur
Quels sont les inconvénients des méthodes en phase homogène?
1- les substances contenues dans le liquide peuvent gêner la mise en évidence du marqueur et de ce fait fausser les résultats.
2- avec ces méthodes, il est obligatoire de travailler avec des petits volumes de l’ordre des ul. Cela affecte la sensibilité de l’analyse.
3- ces méthodes sont mieux adaptées à des molécules dont la concentration est supérieure à 10mmol/L.
Les immunoessaie avec marqueur
Quel est le principe des méthodes en phase hétérogène?
Principe qui repose sur les fractions libres et liées qui s’intercale entre la réaction antigène-anticorps et la révélation du marqueur. La séparation est obligatoire chaque fois que le marqueur de la fraction liée et celui de la fraction libre se comportent de façon comparable.
Les immunoessaie avec marqueur
Quels sont les étapes des méthodes en phase hétérogènes?
1- incubation
2- séparation des fractions libres et liées
3- réaction de révélation du marqueur
les résultats sont obtenus selon un mode à point final (résultat à la fin de l’analyse)
Les immunoessaie avec marqueur
Quels sont les inconvénients de l’étape de séparation?
1- ajoute au temps d’analyse
2- s’oppose à l’automation
3- source supplémentaire d’imprécision
Les immunoessaie avec marqueur
Quels sont les avantages de l’étape de séparation?
1- utiliser un plus grand volume d’échantillon
2- débarrasser les substances gênantes par la mise en évidence du marqueur
3- exactitude et sensibilité augmentées
4- résultats obtenus en quelques heures
5- limite de détection est de l’ordre du nmole/L
6- domaine d’application plus vaste que la phase homogène.
Les immunoessaie avec marqueur
Donner un exemple de la techniques non-compétitives directes
Mise en évidence de la GPIIb sur les plaquettes (glycoprotéines IIb qui participe à l’agrégation des plaquettes lors de la formation d’un caillot).
Les immunoessaie avec marqueur
Dans la technique non-compétitives directes, à quoi sert les lavages?
Il servent à éliminer le réactif non fixé (Ac conjugué fluorescent) pour éviter les faux positif.
Les immunoessaie avec marqueur
Donner un exemple d’une technique non-compétitive indirectes
Recherche de l’Ac contre le VIH méthode indirecte (on recherche un Ac) avec marqueur enzymatique.
