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2. técnicas de investigación celular: microscopía Flashcards

(21 cards)

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1
Q

MICROSCOPÍA ÓPTICA
características

A
  1. > A.máx
  2. > Poder de resolución
  3. Muestra atravesada por un haz del luz
  4. Lentes de vidrio
  5. Cortes muy finos con microtomo
  6. Imagen generada directamente en las lentes
  7. Imagen en color
  8. En micrómetros
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2
Q

MICROSCOPÍA ÓPTICA
ventajas

A

permite ver células vivas y enteras

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3
Q

MICROSCOPÍA ÓPTICA
desventajas

A

no permite ver la ultraestructura celular

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4
Q

MICROSCOPÍA ÓPTICA Y ELECTRÓNICA
procedimiento

A
  1. fijación
  2. inclusión, deshidratación, endurecimiento
  3. corte
  4. tinción
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5
Q

MICROSCOPÍA ÓPTICA
tipos

A
  1. campo brillante
  2. campo oscuro
  3. contraste
  4. fluorescente
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6
Q

MICROSCOPÍA ÓPTICA
campo brillante

A
  1. sin tinción
  2. luz natural
  3. estructuras con pigmentación propia
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7
Q

MICROSCOPÍA ÓPTICA
campo oscuro

A
  1. sin tinción
  2. luz concentrada
  3. elementos biológicos transparentes
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8
Q

MICROSCOPÍA ÓPTICA
contraste

A
  1. sin tinción
  2. 2 focos de luz
  3. muestras vivas
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9
Q

MICROSCOPÍA ÓPTICA
fluorescencia

A
  1. tinción fluorescente artificial o natural
  2. luz de longitud de onda definida y filtrada
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10
Q

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
características

A
  1. <A.máx
  2. <Poder de resolución
  3. Muestra atravesada por un haz de electrones
  4. Lentes de campo magnético
  5. Cortes ultrafinos con ultramicrotomo
  6. Imagen post-procesada en la pantalla
  7. Imagen en blanco y negro
  8. En nanómetros o amstrong
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11
Q

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
ventajas

A

permite ver la ultraestructura celular

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12
Q

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
desventajas

A

no permite ver células vivas y enteras

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13
Q

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
tipos

A
  1. de transmisión (TEM)
  2. de barrido (SEM)
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14
Q

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
TEM

A
  1. un haz de electrones atraviesa la muestra
  2. la imagen se forma a través de los electrones rebotados
  3. visualización directamente en la pantalla
  4. imagen en 2D de la estructura inetrna
  5. campo de visión limitado porque es un corte
  6. requiere un espesor máximo
  7. procedimiento invasivo
  8. no es fácil de usar, se necesita formación
  9. es caro (por el corte)
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15
Q

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
SEM

A
  1. un haz de electrones barre la superficie de la muestra
  2. la imagen se forma a través de los electrones barridos
  3. electrones capturados y contados por un detector, visualización posterior en pantalla
  4. imagen superficial en 3D de la lámina exterior de la muestra
  5. campo de visión de toda la muestra
  6. sin espesor máximo
  7. procedimiento no invasivo
  8. fácil de usar, no requiere mucha formación
  9. barato
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16
Q

TÉCNICAS ESPECÍFICAS
microscopía óptica

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A
  1. corte y observación directa
  2. tinciones fluorescentes e inmunofluorescentes
17
Q

TÉCNICAS ESPECÍFICAS
microscopía electrónica

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A
  1. fractura por congelación
  2. criogenia
18
Q

TÉCNICAS ESPECÍFICAS MICROSCOPÍA ÓPTICA
corte y observación directa

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A

con muestras con pigmentación propia
Ej. análisis de sangre, de agua, de heces

19
Q

TÉCNICAS ESPECÍFICAS MICROSCOPÍA ÓPTICA
tinciones fluorescentes e inmunofluorescentes

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A

FLUORESCENCIA
se emite una luz con fotones de alta energía que son absorbidos por los átomos de la muestra, que se excitan. Al volver a su estado normal, emiten fotones de menos energía, en forma de luz.

INMUNOFLUORESCENCIA

DIRECTA: se genera un anticuerpo artificialmente de una sustancia concreta que sirve como localizador

INDIRECTA: se crea un anticuerpo artificialmente de un anticuerpo que sirve como localizador

20
Q

TÉCNICAS ESPECÍFICAS MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
fractura por congelación

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A

obtención de imágenes de las superficies internas de las células según su resistencia. Se elabora un molde estructural del interior celular en 3D

21
Q

TÉCNICAS ESPECÍFICAS MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
criogenia

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A

investigación de la estructura de las proteínas mediante una capa de solución de proteínas puras congelada, observada con microscopio electrónico. Se ve la proteína en distintas posiciones, y mediante una IA se encuentran patrones y se estructura la proteína en 3D

bio (12 decks)

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