22. A mikroorganizmusok laboratóriumi tenyésztése: színtenyészet előállítása, tápközegek típusai, diagnosztikai tesztek. Törzsek fenntartása, konzerválása.

Question 1

A Mikroorganizmusok Laboratóriumi Tenyésztése: Színtenyészet Előállítása

Answer 1

1. A mikroorganizmusok természetben vegyesen fordulnak elő –> laboratóriumi kitenyésztésnél kevert tenyészetek –> színtenyészeteket kell előállítani egy-egy mikrobafaj vagy törzs előállításához
2. Először Koch laborjában valósították meg, kidolgozták a szilárd fázison történő szaporítást (a folyékony tápoldat agarral szilárdítható meg)
3. Alkalmazott technikák: szélesztés vagy lemezöntés

–> szélesztés szilárd fázisú, mikroorganizmusokban dús mintánál más, mint a telepszámlálásnál

Question 2

Tápközegek halmazállapota és összetétele

Answer 2

Halmazállapot:

1. Folyékony: tápoldat
2. Szilárd: tápközeg

Összetétel:

1. Szintetikus - (kizárólag kémiailag jól meghatározott, ismert szintetikus anyagokból áll)
2. Komplex - (tartalmaz olyan természetes anyagokat is, amelyek kémiai összetétele pontosan nem definiált, pl. pepton, kazein hidrolizátum, élesztő kivonat, vér)

Question 3

Tápközegtípusok

Answer 3

1. Minimál tápközeg
2. Szelektív tápközeg
3. Differenciáló tápközeg
4. Dúsító tápközeg

Question 4

Minimál tápközeg

Answer 4

Szintetikus, egy adott mikroba(faj) igényeihez képest szükséges valamennyi komponenst megfelelő mennyiségben tartalmazza, de mást nem

Question 5

Szelektív tápközeg

Answer 5

Bizonyos mikrobák szaporodnak rajta, mások nem, pl. Gram-pozitív baktériumok igen, -negatívok nem

Question 6

Differenciáló tápközeg

Answer 6

Rajta egyaránt telepet képező rokon mikrobák között biokémiailag (pl. színreakció) különbséget tesz

Question 7

Dúsító tápközeg

Answer 7

Kevert tenyészetben bizonyos mikroba a többiek rovására feldúsul benne

Question 8

Anaerob technikák

Answer 8

Anaerob baktériumok tenyésztése alatt fontos az oxigéntől való elzártság

Alkalmazott technikák:

1. Lezárt üvegben „égő” gyertya
2. „Szúrt” kultúra
3. Agar- vagy olajréteg alatti szaporítás
4. Anaerob edény
5. Anaerob kamra

Question 9

Törzsek fenntartása, konzerválása

Answer 9

Mikrobatörzsek fenntarthatók folyamatos átoltással (törzsgyűjtemények, pl. ATCC: American Type Culture Collection hagyományos módszere)

1. Problémák: munkaigényes, szennyeződésveszély, mutáció/szelekció
2. Megoldás: konzerválás mélyhűtéssel v. liofilezéssel (más néven fagyasztva szárítás: gyors lehűtés –80°C-ra, majd a képződő apró jégkristályok elszublimáltatása vákuumban → kriptobiotikus állapotba kerülnek a sejtek

Question 10

Diagnosztikai tesztek

Answer 10

Izolált mikroba faji (esetleg törzsi) szinten történő azonosítása (identifikálása)

–> ehhez szelektív és differenciáló tápközegeket használunk, amelyekben a mikroba szaporodása, színreakciói, stb. tesztként szolgálnak
Adatbázis segíti a tesztek kiértékelését, a kérdéses taxonómiai szinten (pl. faj, nemzetség) meghatározza a mikrobát

Question 11

Enterotube rendszer

Answer 11

enterobaktériumok azonosítására kifejlesztett diagnosztikai tesztrendszer

Question 12

Fő pontok

Answer 12

1. Színtenyészet előállítása
2. Tápközeg halmazállapota, összetétele, típusa
3. Anaerob technikák
4. Törzsek fenntartása
5. Diagnosztikai tesztek
6. Enterotube rendszer