adn recombinant tableau crise Flashcards

1
Q
  1. Phosphatase alcaline

activité ?

A
  • Enlève le grp phosphate en 5’ d’une molécule d’ADN

- Phosphatase alc. bactérien est + stable, mais moins active que la phosphatase alcaline d’intestin de veau

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Q
  1. Phosphatase alcaline

Utilisation?

A

Élimination des phosphates 5’ sur les acides nucléiques pr éviter l’action de la T4 ADN ligase

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3
Q
  1. DNase 1

activité (pas ut)

A

Dégrade ADNdb en hydrolysant les liens phosphodiesters internes

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4
Q
  1. Fragment klenow

activité

A

Produit protéolytique de l’ADNpol1 d’E.coli qui conserve 2 act. catalytiques de l’ADN pol1 :

  • polymérase 5’-3’
  • exonucléase 3’-5’

mais a perdu son act. exonucléase 5’-3’

Un fragment de klenow ayant un slm une act. pol. 5’->3’ est disponible

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5
Q
  1. Fragment klenow

utilisation

A
  • Transformation d’extrémités cohésives en bouts francs

- synthèse de sondes radioactives

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6
Q
  1. Nuclease de mung-bean

activité

A

Endonucléase dégradant l’ADN et ARN sb

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7
Q
  1. Nuclease de mung-bean

utilisation

A
  • élimination des extensions 5’ et 3’ de l’ADN pr générer des bouts francs
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8
Q
  1. Polymérase poly A

activité

A

Ajoute un AMP à partir d’UN ATP à l’extrémité 3’ de l’ARNm

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9
Q

5 Polymérase poly A

utilisation

A
  • Marquage de l’ARN avec l’ATP

- Ajout queue poly A à l’ARN pr clonage ou purification

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10
Q
  1. R.transcriptase

activité

A

ADNpolymérase rétrovirale ARN dépendante

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11
Q
  1. R.transcriptase

utilisation

A
  • Construction de banques (ADNc)

- PCR sur ARNm (RT-PCR)

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12
Q
  1. RNase A

activité

A

Hydrolyse des liaisons Phosphodiester si ARN est simple brin

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13
Q
  1. RNase A

utilisation

A

Élimination des ARN ds préparation d’ADN ou de prots

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14
Q
  1. RNase H

activité (pas ut)

A

Dégrade le brin d’ARN d’une molécule hybride ADN-ARN

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15
Q
  1. Terminal transférase

activité (pas ut)

A

Catalyse l’ajout de nucléotide à partir de l’ext. 3’ d’un brin d’ADN

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16
Q
  1. Nucléase S1

activité

A

Dégrade l’ADN sb

17
Q
  1. Nucléase S1

utilisation

A

Générer des bouts francs aux ext. des fragments d’ADN db

18
Q
  1. T4 polynucléotide kinsase

utilisation (pas act)

A
  • phospho de fragments d’ADN nécessitant une ext. 5’ phosphate (clonage produit PCR)
  • Radiomarquage des oligont au P32
19
Q
  1. T4 DNA pol
    et
    T7 DNA pol
    activité (pas ut)
A

ADN pol et act. 3’ exonucl.

20
Q
  1. Tag DNA pol

activité

A

ADN pol thermostable de Thermus aquaticus

21
Q
  1. Tag DNA pol

utilisation

A

PCR

22
Q
  1. b-Agarase 1

activité

A
  • Digère agarose

- utilisé pr récupérer les molécules d’ADN séparées sur un gel d’agarose

23
Q

14 .B-agarase 1

utilisation

A

Purification de fragments d’ADN