שיטות מחקר בביולוגיה מולקולרית Flashcards
אם אני רוצה לראות הפרדה ברמת נוקלאוטידים בודדים,
באיזה ג’ל נשתמש להפרדה?
פוליאקרילאמיד
או אגרוז בריכוז גבוה מאוד
כדי לבחון אם מושבת חיידקים מסויימת מכילה את ה
Insert
א. נשבט אל תוך הגן לעמידות לאנטיביוטיקה- המושבות שיגדלו יכילו את האינסרט
ב. חיתוך האינסרט והוקטור בשני אנזימים שונים
ד. שיבט אל תוך מוצא השפכול של הפלסמיד ובדיקת שפכול האינסרט
ה. שיבוט אל תוך הגן לאק.זי ובחירת מושבות כחולות
ו. ביצוע
PCR
על מושבות עם הפריימרים של האינסרט והרצה בג’ל של התוצרים
ו
אם יש להם את האינסרט הפריימר יתאים ואז המקטע יוגבר
חוקר עשה ווסטרן בלוט ונורתרן בלוט לתרבית תאים לבנים. הוא גילה פער עצום בין כמות ה
mRNA
לכמות החלבון בפועל
ממה לא יכול לנבוע ההבדל:
א. שחבור חליפי
ב.תופעה נפוצה ביוקריוטים כי בקרה לא רק על רמת המרנ”א אלא גם על רמת החלבון
ג. הפער יכול לנבוא מנוכחות רנ”א אינטרפירנס
ד. הפער יכול לנבוע מרצפים שאינם מקודדים המו]יעים במרנ”א ומשנים את המבנה המרחבי של החלבון
ד
לא ניתן לבצע תהליך של יצירת ספריית
cDNA על…
rRNA
mRNA- חסר פולי A
tRNA
mRNA היסטונים של
rna פרוקריוטי
או במילים אחרות: כדי לייצר ספריית סי דנא חייבים פולי אדנין מכיוון שמשתמשים בפריימר של פולי טימין .
לכל הרנ”א הנל אין בכלל פולי אדנין ולכן אי אפשר לעשות לו רוורס טרנסקריפציה.
מהם ארבעת הדברים שאפשר לעשות עם
PCR?
א. הגברת מקטע דנ”א
ב. להגביר מקטע קצר מתוך רצף ארוך
ג.להוסיף אתרי ריסטרציה באמצעות סינטזה שלהם לקצוות המקטע
ד. להוסיף מוטציות או להוסיף מקטע
כדי לבצע ריאקצית
PCR
חייבים:
6 דברים
גדיל תבנית
פריימרים
dNTPs
בופר מתאים
פולימראזות
יוני מגנזיום