Centrifugering

Question 1

Vad är centrifug?

Answer 1

En maskin som genom mycket snabb roterande rörelse och inverkan av centrifugalkraften kan separera beståndsdelar, exempelvis celler, i en vätska.

Question 3

Vad gör differential centrifugering?

Answer 3

Skiktar partiklar beroende på partiklarnas storlek.

Question 4

Vad är viktigt att tänka på gällande vätskan vid Differential centrifugering?

Answer 4

• Densiteten av vätskan i lösningen ska vara lika
• Densiteten av vätskan är mycket mindre än densiteten av partiklarna
• Viskositeten av vätskan är låg

Question 5

Vad händer med partiklarna vid differential centrifugering?

Answer 5

De delas in i olika skikt, de minsta överst och de största längst ner.

Question 6

Differential centrifugering kallas även för…..

Answer 6

….fraktionerad centrifugering

Question 7

Beskriv hur centrifugering fungerar.

Answer 7

Under snabb rotation (centrifugering) kastas fasta partiklar som är suspenderade i en vätska (med högre densitet än vätskans densitet), under inverkan av centrifugalkraften, bort från centrum och separeras då från vätskan. Partiklarna hamnar i olika skikt/”lager” beroende på deras densitet (densitet gradient centrifugering) eller storlek (differential centrifugering), partiklarna hamnar i dessa skikt genom stegvis ökning av centrifugaccelerationen.

Question 8

Vilken rotor lämpas bäst för differential centrifugering? Och varför?
Swing-out eller fixed-angle.

Answer 8

Swing-out, eftersom den ger bättre separation. Detta pga i en swing-out är g-max betydligt mycket större än g-min till skillnad från i fixed-angle rotor där g-max bara är något större än g-min.

Question 9

Vad gör densitet gradient centrifugering?

Answer 9

Skiktar partiklarna beroende på partiklarnas densitet.

Question 10

Vad händer med partiklarna vid densitet gradient centrifugering?

Answer 10

Partiklarna ”stannar” i den vätskan som har samma densitet som partikeln.

Question 11

Nämn de tre olika sätten man kan använda sig utav Densitet gradient centrifugering.

Answer 11

• Densitet barriär
• Discontinuous gradient
• Continuous gradient

Question 12

Vad är Discontinuous gradient?

Answer 12

Discontinuous gradient är olika densiteter utav en vätska som hamnar i olika skikt. Längst ner hamnar högsta densiteten av vätskan och överst är lägsta densiteten av vätskan. Om discontinuous gradient får stå länge blir den till continuous gradient.

Question 13

Vad är continuous gradient?

Answer 13

Continuous gradient är också olika densiteter av samma vätska men de olika skikten är väldigt svaga/har inga distinkta skikt.

Question 14

Vad är densitet barriär?

Answer 14

Densitet barriär är en lösning med högre densitet och en lösning som är lägre densitet.

Question 15

Vad händer om partikelns densitet är större än vätskans densitet?

Answer 15

Den kommer sedimentera genom lösningen tills den hamnar där lösningen har samma densitet som partiklen.

Question 16

Vad händer om partikelns densitet är lika stor som vätskans densitet?

Answer 16

Partikeln kommer stanna där, alltså sluta sedimentera eller flyta.

Question 17

Svedbergs konstant S, hur mycket är 1S= ?

Answer 17

1S= 10^-13

Question 18

Svedbergs konstant S beräknas genom….

Answer 18

S=Vt/a

Vt; sedimentationshastigheten (i meter/sekund (m/s))

a; RCF (i meter per sekundkvadrat dvs accelerationen (m/s^2))

Question 19

Hur beräknas centrifugaccelerationen, G?

Answer 19

G= ω^2 • r

ω; vinkelhastigheten (i radianer/sekunder (rad/s))

r; radien (i meter (m))

Question 20

Vad är RCF?

Answer 20

Relativ centrifugal accelerationen, G-tal. Vilket är förhållandet mellan centrifugal accelerationen vid en specificerad radie och hastigheten till standard accelerationen av tyngdkraften (alltså tyngdaccelerationen=9,81 m/s^2).

Question 21

Hur beräknas RCF; G-talet?

Answer 21

4 π^2•f^2•r/9,81

f; frekvensen (i varv/sekund)
r; radien (i meter (m))

Vilket ger oss konstanten:
RCF= 1,118•10^-5•f^2•r
Så RCF för en rotor fås av att sätta in värdet på hur snabbt det snurrar upphöjt till 2(f^2) och radien på rotorn(r) i konstanten.

Question 22

Hur beräknas RCF, G-talet om varvtalet anges i varv/minut och radien i centimeter?

Answer 22

4 π^2•(f/60)^2•(r/100)/9,81

(f/60) eftersom 60 sekunder är 1 minut
Grundenhet är ju i varv/sekund

(r/100) eftersom 100 centimeter är 1 meter
Grundenheten är ju meter

Question 23

Vad är RPM?

Answer 23

Revolutions per minute alltså hur många varv rotorn i en centrifug snurrar per minut. Förenklat: hur snabbt det snurrar.

Question 24

VIKTIGT ATT KOMMA IHÅG:

RPM är INTE samma sak som G-tal!!!!

Answer 24

G-tal är INTE samma sak som RPM!!!!

G-talet är konstant
RPM ändras beroende på radie och frekvens

Question 25

Stokes lag-sedimentationshastigheten

Vad beror sedimentationshastigheten på? Förklara med hjälp av Stokes lag.

Answer 25

Sedimentationshastigheten beror på gravitationskraften (g) och kraften (f) som läggs på. Som påverkas av vätskans lyftkraft (l) och friktionskraft (ff). Enligt Stokes lag måste kraften neråt öka för att få ut krafterna som pekar uppåt för kunna få ner partikeln.

Kraften som behövs beror på vilka partiklar det är, storleken, vilken vätska de ligger i (viskositet) och densiteten.

Question 26

Densitet gradient centrifugering kallas även för…..

Answer 26

Isopynisk centrifugering