2. Tecnologia da biologia celular e molecular

Question 1

Quais são as principais etapas de preparação de lâminas?

Answer 1

1) Coleta do material (Biópsias)
2)Fixação (manter estruturas clr e impedir destruição) - uso de: formol e aldeído
glutárico- estabilizam proteínas
3) Desidratação (Retirada de água do material- uso de álcool para isso)
4)Diafanização (preparar o material para etapa de inclusão. Usa geralmente xilol para
retirar líquidos e tornar material translúcido)
5) Inclusão (Banho de parafina, para formar blocos)
6) Microtomia (Corte de estruturas por aparelho: MICRÓTOMO)
7) Colocação do corte da lâmina (montagem de lâmina)
8) Coloração (corantes BÁSICOS- afinidade por o que é ÁCIDO-basofílico | Corantes ÁCIDOS- afinidade por o que é BÁSICO- acidófilo)

Question 2

• sistema de lentes: ampliação pelas lentes objetivas e pelas lentes ópticas
• poder de resolução: mede a capacidade de identificar pontos individualizados.
• Lente objetiva que regula resolução

Answer 2

MICROSCÓPIO DE LUZ/ ÓPTICO

_

Aparelho com poder de resolução de um sistema óptico com capacidade de separar detalhes, com limite de resolução 0,5 micrometros

Question 3

1) Lente q serve para ampliar a imagem dada pela objetiva ______
2) Lente q serve p ampliar a imagem do objeto a observar _____
3) Regula a intensidade da luz q atinge o objeto a observar ______
4) Tem a função de iluminar o material a ser observado ______

Answer 3

1) lente ocular
2) lente objetiva
3) condensador e diafragma
4) fonte de luz

Question 4

• feixe de luz polarizada dividido pelas
  estruturas
• o que desvia luz: ANISOTRÓPICAS
• o que NÃO desvia luz: ISOTRÓPICAS.

Answer 4

MICROSCÓPIO DE POLARIZAÇÃO

Question 5

• Analisa contraste entre estruturas celulares:
  aparecem em fase positivas-claras ou em fase
  negativas-escura.
• mais denso o material: menor velocidade que luz
  passa.
• menos denso corpo, > velocidade que luz passa.

Answer 5

MICROSCÓPIO DE CONTRASTE DE FASE

Question 6

- Proporciona nitidez em todas as estruturas
ao mesmo tempo.
- Ilumina por meio de um laser, que
percorre pela região toda.
- Uso de corante fluorescente
- Leitura em computadores.

Answer 6

MICROSCÓPIO CONFOCAL

_

As células ou tecidos são submetidos a um composto
fluorescente e a luz emitida é processada em um computador
 Utilizado para construir uma imagem tridimensional,
ou para cálculos de comprimento, área, volume e outras análises, de acordo com a finalidade do estudo

Question 7

• Usa comprimentos de luz muito pequenos- vê estruturas muito
  microscópicas.
• feixe é de elétrons, e não de luz.
• O que aparece escuro: elétron-denso (estruturas celulares não desviam)
• O que aparece claro: tons de cinza (estruturas celulares desviam)
• Corte de lâmina deve ser fino: inclusão em resina e navalha de vidro/diamante.

Answer 7

MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE TRANSMISSÃO

_

visualização de estruturas celulares não visíveis ao microscópio óptico por contar com poder resolutivo muito maior.
0,2-0,5nanometros
micelaroscópio eletrônico

Question 8

• emissão de feixe de elétrons para
  tecido
• elétron contorna estruturas- visão 3D
  das estruturas.

Answer 8

MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE VARREDURA

Question 9

Visualização a:

Olho nu: ovo de rã
MO: cl animal e vegetal, bactéria
ME: vírus, ptn, pequena molécula, átomo

Answer 9

V

Question 10

Como podemos ver as ptn?

Answer 10

Imunocitoquimica

1) direta: procura reação antígeno-anticorpo
2) indireta: procura antianticorpo

Question 11

Como conseguimos ver cls vivas?

Answer 11

Em cultura de cls
- Soluções nutritivas: nutridas com
aminoácidos, glicídios e sais
minerais,
- Observa-se o metabolismo e o
comportamento celular de seres
vivos.

Question 12

MO: amplia até 1.500 vezes (pele, mucosa, cilios da traqueia, interdigitações do epitelio - borda estriada-) - limite de resolução: 0,5µm

ME (limite de resolução: 0,2-0,5 nm): Transmissão: as imagens são de cortes ultrafinos ou mostram a região interna da célula com a estrutura de membrana, as organelas, como mitocôndrias e retículo endoplasmático etc. Varredura: a imagem é formada quando o feixe percorre a
superfície da amostra, arrancando de sua superfície elétrons que irão formar
uma imagem da superfície externa que estiver sendo “varrida”

Answer 12

V

Question 13

Na Citoquimica existem reagentes que reagem com a estrutura- alvo em forma de cor. Relacione:

Reação de Feulgen
Oil Red
Tricómio de Masson
PAS

Answer 13

DNA
Lipídeos
Colágeno
Glicogênio

Question 14

Se baseia na reação antígeno- anticorpo e permite estudar a localização intracelular de proteínas específicas

Answer 14

Imunocitoquímica

Question 15

Células isoladas a partir de tecidos intactos

Answer 15

Cultura celular

Question 16

É um método para detectar proteínas em células ou tecidos biológicos
Eletroforese em gel para separar as proteínas desnaturadas por massa

Answer 16

Western blot

Question 17

Técnica de amplificação de DNA sem utilizar organismos vivos, utilizado em clonagem de genes, teste de paternidade, detecção de
organismos causadores de infecções.
Extrai DNA ou RNA, add primers + DNA polimerase

Answer 17

PCR (reação em cadeia da polimerase)

Question 18

Principais etapas da preparação de lâminas

Answer 18

Coleta
Fixação
Corte (microtomia)
Coloração

Question 19

( ) Micrótomo é o nome dado para o aparelho que consegue preparar exemplares de tecidos em parafinas, a fim de colocá-los em lâminas.
( ) Corantes básicos coram estruturas básicas.
( ) Corantes ácidos coram estruturas básicas.
( ) Os principais tipos de microscópios são: de luz e eletrônico.
( ) Imunocitoquímica direta é a busca pelo antianticorpo em uma solução com antígenos e anticorpos.
( ) Imunocitoquímica indireta é a busca pela reação antígeno-anticorpo em uma solução com antígenos e anticorpos.
( ) Cultura de células é o nome dado para meios nutritivos que mantém células vivas, para serem estudadas mais minuciosamente.

Answer 19

V
F
V
V
F (isso é a imunocitoq. indireta)
F (isso é a imunocitoq. direta)
V