Aula 2 Flashcards
(18 cards)
A PAS é seletiva para o glicogénio ?
Não, uma vez que esta cora outras estruturas.
Que colorações se podem utilizar para detetar o glicogénio num tecido?
Para determinar a presença de glicogénio num tecido deve-se realizar a coloração PAS e PAS-diastase. Esta ultima como contem a enzima diastase não vai corar o glicogénio, sendo então tudo o que aparecer destacado a magenta no PAS e não no PAS-D glicogénio
Em tecidos fortemente ácidos é melhor utilizar o PAS?
Não. Deve-se utilizar o AB, pois o PAS vai ser negativo.
Que estruturas cora o PAS?
Cora hidratos de carbono que contém o grupo glicol e carga neutra (glicogénio, mucinas neutras e mucinas ácidas fracamente sulfatadas, membrana Basal e alguns fungos)
Qual é o principio de ação do PAS?
O ácido periódico é utilizado em primeiro lugar vai oxidar as mucinas e glicogénio gerando aldeídos. Estes vão depois reagir com o reagente Schiff resultando assim numa coloração magenta, sendo esta intensificada pelo uso de água corrente quente. É depois utilizada a hematoxilina aluminica como contrastante.
Porquê que o PAS tem capacidade de corar fungos?
Os fungos têm na sua parede celular proteoglicanos que devido ás suas propriedades químicas é corado de magenta.
Porquê que o PAS não se pode usar muitas vezes para evidenciar fungos?
Como o PAS evidencia outros hidratos de carbono, os fungos só conseguem ser identificados se estiverem em grandes quantidades, senão podem ser confundidos com essas outras estruturas, como mucinas e glicogénio.
Após a coloração PAS verifica-se pouca intensidade e falsa pigmentação das estruturas. Como resolver?
Para a pouca intensidade há duas alternativas. Pode se aumenta o tempo da coloração (ácido periódico ou do reagente Schiff) ou realizar uma lavagem com água corrente morna. Para a falsa pigmentação das estruturas pode se realizar uma lavagem sulfurosa rápida com um ácido fraco sulfuroso.
Usa-se sempre água corrente morna para intensificas a coloração PAS?
Não, isso vai depender do laboratório e Kit utilizado.
Como é realizada a PAS-Diastase?
Antes de se realizar a coloração, coloca-se o tecido a reagir com a diastase/amilase, sendo depois a PAS normal. A diastase vai digerir o glicogénio.
Que diagnóstico diferencial a PAS permite?
Permite a diferenciação de adenocarcinoma secretor (PAS+) e o carcinoma pavimentoso indiferenciado (PAS-)
Como é que o AB cor as estruturas?
O AB é uma substância básica que se vai ligar aos grupos ácidos dos hidratos de carbono. Dependendo do seu pH este cora mucinas ácidas (pH2,5) ou mucinas fortemente ácida (pH 1)
Como consegue determinar a existência de mucinas ácidas de um tecido
Deve se utilizar o AB pH 2,5
Como é que se consegue insolubilizar a coloração de AB?
Para esta função utiliza-e o tetraborato de sódio, deixando assim a coloração insoluvel quer para ácidos como para alcoois
Refere uma desvantagem para a coloração de AB e como se pode remediar
Nesta coloração os acidos nucleocos também têm afinidade pelo corante, podendo estes também acabar corados. Para remediar adicionam-se grupos solubilizantes á coloração afim de diminuir a afinidade da coloração pelos grupos fosfato-carboxil. Devido a isto a coloração de AB não deve ficar muito tempo a reagir com o tecido.
O tecido precisa de algum tipo de preparo para receber a coloração AB
Sim, é necessário passar o tecido pelo ácido acético 3% antes
Para quê que é usado o AB/PAS
Para diferenciar mucinas ácidas de mucinas neutras
Porquê que o PAS não pode ser colocado antes que o AB na coloração AB/PAS?
Não pode ser colocado antes pois como o PAS tem a capacidade de corar também mucidas fracamente ácidas, estas vão acabar por ser coradas de magenta e não vão conseguir ser diferenciadas das neutras.
