Bioquímica Clinica Flashcards
(24 cards)
Para que serve Bioquímica Clinica?
1.Triagem
2.Confirmar Diagnósticos
3. Monitorizar doenças
4. Decidir Tratamentos
5. Monitorizar resposta a tratamento
6. Conhecer Mecanismo da doença
Isto através da analise de fluidos corporais
Processo da Bioquímica Clinica
- Questões Clinicas
- Dados Clínicos (Biomarcadores)
- Colheita de Amostras
- Transporte de Amostras
- Receção das Amostras
Que testes podem ser solicitados para avaliar os biomarcadores e o que consistem?
- Testes de Emergência- Em ambiente não clinico, resultados em menos de 24h, existe pouca variedade. Com o objetivo de tomar decisões rápidas.
- Point-Of-Care- Testes rápidos sem necessidade de profissionais. Podem ser paper-based (Covid, gravidez), chip-based(monitorização de glucoses) ou dispositivos moveis de assistencia
- Analises regulares- Resultados 24h- dias
- Organ Papel- Analises regulares mas focados num ou alguns orgãos; Resultados 24h- dias
5.Moleculares- Ao material genetico; Resultados 48h- semanas
Quais são os bioespecimes?
- Sangue
- Urina
- Fluido Cefalo- Raquidiano
- Liquido pleural, pericárdio, sinovial, saliva
- Fezes
Tipos de teste e Biomarcadores no sangue
- Hemograma- Eritrócitos, hemoglobina, hematrócitos, distribuição de eritrócitos; leucócitos, neutrófilos, basófilos; plaquetas; coagulação (fibrinogénio)…
- Anemia- nidrémia, capacidade de liagção ao ferro, ferritina…
- Bioquimica- Glicémia, lactato, ácido úrico, creatinina, parametros inflamatórios, eletrólitos, proteinas e lipidos séricas, enzimas, marcadores cardiacos, hormonas tiroide, hormonas sexuais, hormonas suprarenais, biomarcadores tumorais…
- Hemocultura- testes de sensibildade a antibioticos…
Tipos de teste e Biomarcadores na urina
- Propriedades físicas (cor)
- Propriedades quimicas( pH, osmolidade)
- Testes Bioquimicos( eletrolitos, hormonas)
- Urocultura (meter bichinhos e ver se crescem)
Como funciona a recolha de amostras)
O sangue é retirado por flebotomia, coleta através de uma veia.
As cores dos tubos indicam os testes realizados.
Os testes devem ser feitos por uma certa ordem.
A agitação, temperatura, exposição à luz deve ser controlada.
Labelling é importante e deve conter: Nome do paciente, tipo de amostra, data, quem recolheu amostra
O que é importante no transporte da amostra?
A agitação, temperatura, exposição à luz deve ser controlada. Tambem podem existir cuidados especificos.
O que faz uma amostra ser rejeitada?
- Os requisitos não serem cumpridos
- Mau labelling
- Bioespecimes em más condições
- Temperaturas não adequadas
- Amostras Antigas
- Pouca quantidade
Quais são os métodos de analise?
- Espectrofotometria
- Espetroscopia UV- Vis
- Espetroscopia de IV
- Colorimetria
- Espectroscopia de Massa
- Espectroscopia de NMR
- Citometria de Fluxo
- Células Ativadas por flurorescencia
- Cromatografia em Papel
- Cromatografia em Camada Fina
- Cromatografia de Exclusão de Tamanho
- Cromatografia Trocas Iónicas
- Cromatografia Perfomance de Lipidos
- Eletroforese
Espectrofotometria
-Interação da radiação com a amostra: atenuação, absorção, dispersão…
-Baseada na Lei de Beer- Lambert: A concentração da substancia é proporcional á luz absorvida para um certo comprimento de onda.
-Permite detetar a concentração do analito, de impurezas, estrutura dos compostos orgânicos, cinética, grupos funcionais, comprimento molecular da substancia
Espetroscopia UV- Vis
-Comprimento de Onda: 190-900 nm
-Permite detetar a concentração do analito e impurezas baseado num espectro e medi-las para certos comprimento de onda, , cinética, alterações de conformação e mudanças de cor
-Importante escolher comprimento de onda certo e calibrar de forma a concentração estar dentro do limite máximo
Espetroscopia de IV
-Comprimento de Onda: 1400-2800 nm
- Amostras liquidas ou solidas
- Deteção de ligaçoes atomicas
Colorimetria
- Deteta Mudanças de Cor
- Não é quantitativo, só combinado com outras tecnicas
- Permite detetar a concentração do analito e impurezas para um certo comprimento de onda e saber sobre alteraçoes conformacionais
Espectroscopia de Massa
- Medição razão Massa/Carga de um analito
- A amostra é bombardeada com eletroes e ioniza-se
- As particulas vão ficar sujeitas a um campo eletrico e magnetico e são defletidas de acordo com razão Massa/Carga
- Os iões são detetados e exibidos num espectro de intensidades
- As moleculas vao ser identificadas por: peso, compostos, estrutura e propriedades quimicas
Espectroscopia de NMR
- Interaçao entre radiaçao EM com os nucleos das moleculas, sujeitas a campo magnetico
- Informaçoes sobre estrutura, dinamica, e interaçao
Citometria de Fluxo
-A amostra atravessa um laser, a radiação dispersa é detetada e permite identificar cada célula ou componente
- Exige staining
- Relevante para contagem de celulas, detaçao de biomarcadores…
Células Ativadas por flurorescencia
- Tipo de Citometria de Fluxo
- Separaçao celular com base em caracteristicas fisicas atraves de anticorpos especificos com corantes fluroescentes
- Exige staining
Cromatografias
- Separaçao dos componentes numa mistura
- Em Papel
- Baseado nos diferentes tempos de migraçao pela folha
- Separa proteinas, hidratos, lipidos, compostos organicos, ioes…
- Barato - Camada Fina
- Igual ao papel mas com vidro ou platico com uma camada fina de um absorvente como silica
- Permite chegar ao fator de retençao (R=componente/solvente), +R(viaja muito, é apolar), -R(viaja pouco, é polar)
- Informaçao qualitativa - Exclusão de Tamanho
- Moleculas pequenas migram + lentamente que moleculas grandes - Troca Iónica
- Separa iões com base na afinidade iónica
- Há um fase ionizada que interage com os iões de carga oposta, que ficam lá retidos
- Util para separar moleculas com carga
- Importante ter em conta o ponto isoeletrico - Perfomance de Lipidos~
- Separa lipidos
-Bombardeamento numa coluna com pequenos poros, as diferenças de solubilidade faz com que se movam a diferentes velocidades nesta, os componentes sao detetados em espectroscopia de absorçao
- Na fase normal a coluna é polar, e a móvel é apolar; na reversa é ao contrario e é a mais comum
- Importa definir o tipo de coluna, fase movel, e fluxo e garantir que nao entram bolhas de ar
- O tempo de retençao é caracteristico de cada analito e permite chegar à concentração baseado na area do grafico
Eletroforese
- Migraçao de cargas sujeitas a um campo eletrico num soluto
- Se negativas vão para o anodo (positivo), se positivas vão para o cátodo (negativo)
- Usado para separar DNA e RNA e proteinas
- As moleculas mais pequenas migram + rapidamente
Que testes bioquimicos existem?
- Moleculares - Amplificam o material genético viral e o sinal
- Serologicos- Detetam anticorpos que se ligam a antigénios virais
Testes Serológicos
-Detetam anticorpos ou antigénios no paciente
- Permitem:
Detetar anticorpos produzidos pelo sistema imunitario em reposta a infeções, compreender resposta imunitária após vacinação, detetar anticorpos produzidos provenientes de doenças auto imunes
- Seleçao do antigenio/anticorpo
- Imobilizaçao deste em placas
- Inoculaçao da amostra
- Lavagem (tirar tudo o que nao interessa)
- Deteçao dos complexos antigenio-anticorpo
- Mediçao do sinal
Testes Moleculares
- Detetam sequencias de acidos nucleicos associados a agentes patogenicos ou marcadores geneticos
- Permitem:
Detetar a presença de virus e bacterias atraves da presença dos seus acidos nucleicos (+sensibilidade), identificar mutações geneticas, informaçoes sobre composiçao genetica incluindo resistencia a medicaçao - Sensibilidade e + especificidade que os serologicos
Controlo de qualidade
Precisão + Consistencia + Exatidão
- Interno: Regulação, amostras de controlo, testes paralelos
- Externo: Comparação entre laboratorios, testes de eficiencia
