Bioquímica De Proteínas Y Proteómica Flashcards
(26 cards)
De qué se encargan las proteínas
- Motilidad
- Regulación
- Enzimas
- Estructura
- Almacenamiento
- Transporte
Enzimas
Biocatalizadores que facilitan la ocurrencia de reacciones químicas dentro de la célula.
Proteínas de transporte
Llevan iones y moléculas a través de todo el organismo hasta donde son requeridas.
* Hemoglobina
* Hemocianina
* Ferritina
* Lipoproteínas
Proteínas nutrientes y de almacenamiento
Constituyen la reserva de aminoácidos para el desarrollo.
* Ovoalbúmina
* Gliadina
* Lactoalbúmina
Proteínas contráctiles y móviles
Actina y Miocina
Proteínas estructurales
- Glucoproteínas
- Histonas
- Colágeno
- Elastina
- Queratina
Proteínas de defensa
Anticuerpos, trombina, mu unas que protegen las mucosas, toxinas bacterianas.
Proteínas reguladoras
Regulan la expresión de genes
Hormonas
- Insulina y glucagon
- Hormona del crecimiento
- Calcitonina
Estructura de los aminoácidos
Grupo amino
Grupo carboxilo
Un hidrógeno
Grupo distintivo llamado R
Unidos a un mismo carbono.
Niveles de organización de las proteínas
Estructura primaria —> cadena de aminoácidos
Estructura secundaria —> cadena de lámina plegada
Estructura terciaria —> conformación globular. Se establece entre las distintas cadenas laterales de los aa que la componen.
Estructura cuaternaria —> unión mediante enlaces covalentes de cadenas peptídicas con estructura terciaria.
Formas de las proteínas de acuerdo al No de cadenas
Monoméricas: una sola cadena polipeptídica
Diméricas:
Homodiméricas
Heterodiméricas
Tetraméricas:
Homotetraméricas
Heterotetraméricas
Modificaciones postraduccionales
Hidrólisis: descomposición por acción de agua
Fosforilación: adición de un grupo fosfato
Glicolisación: adición de carbohidratos
Hidroxilación: introduce un grupo hidroxilo (OH)
Formación de puentes disulfuro
Unión de un grupo prostético: fracción no proteica
Formación de dineros, tri, tetra, etc.
Propiedades de las proteínas
Especificidad: se refiere a su función, no todas las proteínas son iguales en todos los organismos.
Solubilidad: Varía dependiendo del tamaño, de la forma, de la disposición de los radicales y del pH
Desnaturalización: perdida de la estructura terciaria, por romperse los puentes.
Grupo prostético
Grupos químicos presentes en las proteínas además de aminoácidos, el cual es importante para la función de las proteínas.
Lípidos, HC, Zinc, Calcio…
Características fisicoquímicas de las proteínas
Tamaño, densidad, carga, punto isoeléctrico, actividad catalítica, unión específica a ligandos
Preparación de la muestra
Cracaterísticas principales:
Solubilización y desnaturalización
SDS-PAGE
Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis
separa las proteínas de acuerdo a su movilidad electroforética.
La migración a través del gel depende de su tamaño
Electroforesis de 2 dimensiones
Resolución de proteínas proteínas provenientes de una muestra biológica.
Se divide en 1° dimensión y 2° dimensión
Se lleva a cabo mediante la tinción de un gel.
Uso de anticuerpos o inmunoglobulinas se unen a un antígeno, los anticuerpos se pueden marcar para permitir su detección.
INMUNOBLOT
Las proteínas se transfieren del gel (electroforesis) a una membrana nitrocelulosa.
Se detecta la unión antígeno-anticuerpo
ELISA
Un antígeno inmovilizado se detecta mediante un anticuerpo enlazado a una enzima capaz de generar un producto detectable como cambio de color o algún otro tipo
Usa enzimas conjugadas a anticuerpos (peroxidasa y fosfatasa alcalina)
- Directo
- Indirecto
- Sándwich
INMUNO_HISTIQUINA
Los anticuerpos marcados se introducen en las células para revelar la localización sub- celular de una proteína específica
Citometría de flujo
La intersección de cada célula con la luz láser provoca la emisión de una serie de señales luminosas:
• Tamaño relativo
• Granulaciones
• Reactividad con fluorócromos acoplados a anticuerpos monoclonales.
Proteómica
Estudio de los proteomes (proteínas codificadas por un genoma)
1 genoma —> diferentes proteomas
Objetivos
Sitemático: identificación de todas las proteínas en referencia a un estado fisiológico
Pragmático: comparar la expresión proteíca de dos situaciones fisiológicas y establecer mapas bidimensional
