Biotechnologies - outils enzymatiques Flashcards
1
Q
endonucléase (def et ex)
A
- hydrolyse liaison phosphodiester entre 2 nt à l’intérieur de la molécule d’ADN
- enzyme de restriction
2
Q
exonucléase (def)
A
dégrade ADN à partir de l’une des extrémités
3
Q
enzyme de restriction (but)
A
- hydrolyse liaison phosphodiester entre 2 nt à l’intérieur de la molécule d’ADN
- restreint l’infectiosité des phages vis-à-vis de la souche bactérienne
- ne coupe pas une sqc méthylée
4
Q
méthyltransférase (but)
A
- reconnaît la même sqc que l’enzyme de restriction
- transfert un méthyl sur au moins une des bases du site de reconnaissance
- protège la bactérie de l’enzyme de restriction qu’elle code
5
Q
enzyme de restriction de type II
A
Site de restriction :
- sqc de 4 à 8 pb
- axe de symétrie inversée : palindrome
Produit des extrémités 5’-P et 3’-OH
6
Q
extrémité sortante (def et synonymes)
A
- quand les coupures sont décalées l’une par rapport à l’autre sur les 2 brins
- extrémité cohésive
- sticky end
7
Q
extrémité franche (def et synonyme)
A
- quand la coupure se fait exactement au milieu du palindrome
- bouts francs
- blunt end
8
Q
enz isoschizomères
A
- enz de restriction qui reconnaissant la même sqc et la coupent de façon identique
9
Q
enz néoschizomères
A
- enz de restriction qui reconnaissant la même sqc mais la coupent de façon différente
10
Q
enz compatibles
A
enz de restriction qui
- reconnaissent des sites de restriction différents
- génèrent des fragments aux extrémités cohésives et complémentaires
- qui pourront être ligaturées
11
Q
nucléase S1 (def)
A
- dégrade spécifiquement des acides nucléiques simples brins
- pas les ADN bicaténaires, ni les hybrides ARN-ADN
12
Q
nucléase S1 (ex d’application)
A
peut être utilisée pour convertir les extrémités cohésives et extrémités franches
13
Q
phosphatases alcalines
A
- éliminent le P en 5’
- évite la ligation des fragments d’ADN entre eux
- fonctionnent à pH alcalin
- origine : muqueuse intestinale veau, souches d’E.cli ou souches de crevettes
14
Q
ligase (def)
A
catalyse la formation d’une liaison phosphodiester entre 2 brins d’ADN (entre 3’OH et 5’P)
15
Q
ADN ligase
A
- extraite de E.coli
- catalyse la formation de Pdiester
- entre 2 extrémités cohésives
- nécessite NAD
- intéressant pour clonage cellulaire
