Capsule 7 Flashcards
(14 cards)
3 caractéristiques principales AC
- complexe glycoprotéique
- spécifique
- plusieurs fonctions
Ac polyclonal
- plusieurs Ac différents reconnaissant plusieurs épitopes différents
Ac monoclonal
- solution de plusieurs Ac uniques; d’une spécificité unique
Pourquoi des AcMo?
- stabilité et répétabilité
- source intarissable
AcMo d’origine murines
des parties de ces Ac peuvent être remplacés par des parties humaines pour augmenter leur bioactivité et éliminer leur élimination trop rapide
Il existe un _____ pour la nomenclature des AcMo
système normalisé
Principe création AcMo
- rendre immortelle une cellule productrice d’Ac (lymphocyte B) en la fusionnant avec un partenaire de fusion soit un myélome (Lymphocyte B cancéreux)
Caractéristiques recherchées chez notre AcMo
- Cellule immortelle (myélome)
- Produit des Ac (B)
- Possède enzyme HPRT (B)
Étapes création AcMo
1- animal immunisé avec Ag d’intérêt (augmentation nb de lymphoB)
2- lymphocytes prélevés
3- Fusion avec myélome (avec PEG)
4- Mise en culture
5- Sélection à l’aide de l’aminoptérine (voie de sauvegarde)
6- Identification des Ac d’intérêt (Ag/épitope)
7- Vérification de la clonalité
Fusion et sélection
- avec PEG
- En présence d’aminoptérine, on bloque la synthèse de novo des acides nucléiques, doit donc utiliser voie de sauvegarde (seulement cell avec HPRT peuvent utiliser cette voie)
3 cellules obtenues suite à la fusion
1- LymphoB + Myélome
2- B + B
3- Myélome + myélome
Caractérisation
- Suite à fusion, cellules dans plaque de culture de 96 puits
- vérifie production Ac contre molécule cible
- Ac secondaire, Ac primaire, Ag
Vérification de la clonalité
- chaque puits pos sera passé en dilution limite; dilue les cells à l’extrême afin de n’obtenir qu’une cell par puits
- laisse croître et vérifie que cell reconnaisse Ag cible
- caractérise ensuite l’AcMo
V ou F? Les séquences géniques des Ac monoclonaux peuvent être modifiés en labo pour améliorer leur fonction
Vrai
