Coloração de Gram, semeadura

Question 1

Protocolo para coloração de Gram

Answer 1

1. fazer e fixar esfregaço bacteriano
2. coloração primária: cristal violeta. Todas se coram em roxo.
3. mordente: Lugol. Forma o complexo iodo-pararosanilina, que fixa o corante primário.
4. descoloração: álcool 95%. Bactérias gram + retém o corante, as Gram - perdem o complexo iodo-pararosanilina e perdem o corante.
5. contraste: safranina. Vai corar as que foram descoradas.
6. lavar com água corrente, secar e observar.

Question 2

Papel do álcool na coloração de Gram

Answer 2

• Gram negativas: dissolve a porção lipídica da membrana externa, removendo o complexo cristal violeta iodo, descorando.
• Gram positivas: desidrata as paredes celulares, contraindo os poros e tornando-as impermeáveis ao solvente, retendo o corante primário.

Question 3

Exceções de Gram: bacilos gram-positivos

Answer 3

Corynebacterium
Clostridium
Actinomyces

Question 4

Exceções de Gram: cocos gram-negativos

Answer 4

Acinetobacter

Neisseria

Question 5

Corynebacterium diphteriae

Answer 5

• Bacilos gram + (exceção)
• Arranjados em paliçada ou letras chinesas
• não formam esporos

Question 6

Clostridium

Answer 6

• Bacilos gram + (exceção)
• Formadores de endosporos
• Produzem toxinas biológicas
• C. tetani: esporos em baqueta de tambor (tétano)
• C. botulinum: endosporos subterminais (botulismo)

Question 7

Actinomyces

Answer 7

• Bacilos gram + (exceção)
• Não formam esporos
• Parte da microbiota normal da boca e trato urogenital
• Granulos de enxofre na secreção da infecção
• A. israelii é comum em pacientes com DIU

Question 8

Neisseria

Answer 8

• Diplococos gram positivos (exceção)
• N. meningitidis: meningite
• N. gonorrhoeae: DST

Question 9

Agar manitol salgado

Answer 9

• Seletivo para identificação presuntiva de Staphylococcus aureus.
• Indicador: vermelho de fenol.

O sal inibe outras bactérias. Ocorre degradação do manitol, formando ácido. O meio passa de vermelho para amarelo.

Question 10

Agar bile esculina

Answer 10

• Identificação do grupo D

O grupo D hidrolisa esculina em presença de bile, produzindo glicose e esculetina. A esculetina em presença de ferro produz escurecimento do meio.

• Para confirmar Enterococcus fazer o teste NaCl 6,5%

Question 11

EMB

Answer 11

• Seletivo: inibe as Gram +
• Diferencial: fermentadores de lactose
• Carboidratos: lactose e sacarose
• Inibidor e indicador: eosina e azul de metileno
• Típicos fermentadores: colônias escuras, podendo ter brilho metálico esverdeado. Ex. Escherichia coli.
• Fermentadores tardios: colônias acinzentadas a creme, com centro escuro. Ex. Klebsiella sp.
• Não fermentadores: incolor. Ex. Salmonella spp, Shigella spp, Proteus spp.

Question 12

Agar MacConkey

Answer 12

• Seletivo: inibe gram +

- Diferencial: fermentadores de lactose (colônias de rosa a vermelho) e não fermentadores (incolores).

Question 13

Staphylococcus aureus

Answer 13

• cocos gram + em cachos
• catalase +
• coagulase +
• manitol +
• sítios de infecção: orofaringe, urina, sangue, furúnculo.

Question 14

Streptococcus pyogenes (grupo A)

Answer 14

• cocos gram + em cadeias
• sítios: orofaringe, pele
• sequelas: febre reumática e glomerulonefrite
• agar sangue: ß-hemólise

Question 15

Enterococcus (grupo D)

Answer 15

• cocos gram + em cadeias
• sítios: urina, sangue
• agar sangue: alfa, beta ou gama hemólise

Question 16

Enterobactérias

Answer 16

Escherichia coli
Klebsiella spp
Proteus spp
Salmonella spp
Shigella spp

(bastonetes gram negativos)

Question 17

Pseudomonas aeruginosa

Answer 17

• Bacilos gram negativos não fermentadores
• Oxidase +
• Pigmento: pioverdina e piocianina (fluorescência)
• Cresce a 42ºC
• Odor de uva (adocicado) no MacConkey
• Identificação: agar cetrimida