Coloração de Gram, semeadura Flashcards Preview

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Flashcards in Coloração de Gram, semeadura Deck (17):
1

Protocolo para coloração de Gram

1. fazer e fixar esfregaço bacteriano

2. coloração primária: cristal violeta. Todas se coram em roxo.

3. mordente: Lugol. Forma o complexo iodo-pararosanilina, que fixa o corante primário.

4. descoloração: álcool 95%. Bactérias gram + retém o corante, as Gram - perdem o complexo iodo-pararosanilina e perdem o corante.

5. contraste: safranina. Vai corar as que foram descoradas.

6. lavar com água corrente, secar e observar.

2

Papel do álcool na coloração de Gram

- Gram negativas: dissolve a porção lipídica da membrana externa, removendo o complexo cristal violeta iodo, descorando.

- Gram positivas: desidrata as paredes celulares, contraindo os poros e tornando-as impermeáveis ao solvente, retendo o corante primário.

3

Exceções de Gram: bacilos gram-positivos

Corynebacterium
Clostridium
Actinomyces

4

Exceções de Gram: cocos gram-negativos

Acinetobacter
Neisseria

5

Corynebacterium diphteriae

- Bacilos gram + (exceção)
- Arranjados em paliçada ou letras chinesas
- não formam esporos

6

Clostridium

- Bacilos gram + (exceção)
- Formadores de endosporos
- Produzem toxinas biológicas

* C. tetani: esporos em baqueta de tambor (tétano)
* C. botulinum: endosporos subterminais (botulismo)

7

Actinomyces

- Bacilos gram + (exceção)
- Não formam esporos
- Parte da microbiota normal da boca e trato urogenital
- Granulos de enxofre na secreção da infecção

* A. israelii é comum em pacientes com DIU

8

Neisseria

- Diplococos gram positivos (exceção)

* N. meningitidis: meningite
* N. gonorrhoeae: DST

9

Agar manitol salgado

- Seletivo para identificação presuntiva de Staphylococcus aureus.
- Indicador: vermelho de fenol.

O sal inibe outras bactérias. Ocorre degradação do manitol, formando ácido. O meio passa de vermelho para amarelo.

10

Agar bile esculina

- Identificação do grupo D

O grupo D hidrolisa esculina em presença de bile, produzindo glicose e esculetina. A esculetina em presença de ferro produz escurecimento do meio.

* Para confirmar Enterococcus fazer o teste NaCl 6,5%

11

EMB

- Seletivo: inibe as Gram +
- Diferencial: fermentadores de lactose
- Carboidratos: lactose e sacarose
- Inibidor e indicador: eosina e azul de metileno

* Típicos fermentadores: colônias escuras, podendo ter brilho metálico esverdeado. Ex. Escherichia coli.

* Fermentadores tardios: colônias acinzentadas a creme, com centro escuro. Ex. Klebsiella sp.

* Não fermentadores: incolor. Ex. Salmonella spp, Shigella spp, Proteus spp.

12

Agar MacConkey

- Seletivo: inibe gram +
- Diferencial: fermentadores de lactose (colônias de rosa a vermelho) e não fermentadores (incolores).

13

Staphylococcus aureus

- cocos gram + em cachos
- catalase +
- coagulase +
- manitol +
- sítios de infecção: orofaringe, urina, sangue, furúnculo.

14

Streptococcus pyogenes (grupo A)

- cocos gram + em cadeias
- sítios: orofaringe, pele
- sequelas: febre reumática e glomerulonefrite
- agar sangue: ß-hemólise

15

Enterococcus (grupo D)

- cocos gram + em cadeias
- sítios: urina, sangue
- agar sangue: alfa, beta ou gama hemólise

16

Enterobactérias

Escherichia coli
Klebsiella spp
Proteus spp
Salmonella spp
Shigella spp

(bastonetes gram negativos)

17

Pseudomonas aeruginosa

- Bacilos gram negativos não fermentadores
- Oxidase +
- Pigmento: pioverdina e piocianina (fluorescência)
- Cresce a 42ºC
- Odor de uva (adocicado) no MacConkey
- Identificação: agar cetrimida