cours 2 mcb2992 Flashcards

1
Q

quels sont les éléments du gène qui permettent expression génique

A
  • promoteur: interagit avec ARN pol
  • site initiation transcription
  • RBS/SD: site attachement ribosome
  • codon initiateur
  • codon arrêt
  • site terminaison transcription
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2
Q

différence entre thymine et uracil

A

thymine c’est uracil avec méthyl en position 5

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3
Q

quelles sont les structures secondaire de ARN

A
  • épingle à cheveux
  • pseudo noeud

G-U accepté, mais pas appariement

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4
Q

différence entre ARN pol coeur vs holoenzyme

A

ARN pol coeur: toutes sous-unités alpha, beta, omega

holoenzyme: ARN pol coeur avec facteurs sigma

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5
Q

dans quel sens se fait la transcription et sur quel brin d’ADN

A

sur brin matrice
synthèse 5’->3’

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6
Q

par quel nucléotide la transcription débute la plupart du temps

A

purine

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7
Q

étapes de transcription

A
  1. formation holoenzyme
  2. lien ARNpol promoteur: complexe fermé
  3. isomérisation: complexe ouvert
  4. initiation et cycle transcription abortive
  5. évasion ARN pol
  6. relâchement facteur sigma: élongation
  7. terminaison
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8
Q

avec quoi les différents facteurs sigma interagissent

A

4: -35
2: -10
3: proche beta
2: interagit beta’

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9
Q

quelle sont les variations possibles dans la structure des promoteurs et comment facteur sigma s’adapte

A

pas de région -35 mais région -10 étendue: sigma3 interagit avec étendue

ajout élément UP: interagit avec sous-unité alpha de ARN pol

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10
Q

en quoi consiste l’étape d’isomérisation dans la transcription

A

sigma2 sépare brins ADN à -10 et interagit avec brin codant
formation complexe ouvert

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11
Q

à quoi sert la rifampicine dans la transcription

A

après ajout de 2-3 nt: rifampicine interagit avec beta et bloque synthèse

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12
Q

qu’est-ce que la transcription abortive

A

ARN atteint 10 nt: canal de sortie est bloqué par sigma 3.2: fait arrêter synthèse

relâchement des nt et recommence jusqu’à pousser s3.2

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13
Q

que fait un bon promoteur

A

forte interaction avec ARNpol et séparation rapide ADN et transition rapide à phase élongation

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14
Q

qu’est-ce que ça veut dire la transcription est processive obligatoire

A

réaction doit avoir lieu du début à la fin: peut s’arrêter, mais pas quitter et continuer
sinon doit recommencer

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15
Q

quand ecq la ARNpol prend un pause pendant élongation

A

suite de U dans ARN forme épingle à cheveux

pcq A/U moins stable que A/T

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16
Q

à quoi servent les pauses pendant élongation

A

bien timer transcription et traduction pour ne pas avoir transcription prématurée

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17
Q

2 types de terminaison

A

indépendante ou rho-dépendante

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18
Q

en quoi consiste la terminaison indépendante

A

suite de U dans ARN juste à côté de ARNpol -> formation épingle à cheveux
rend instable ARNpol et relâchement ARNpol

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19
Q

en quoi consiste la terminaison rho-dépendante

A

protéine rho se lie quand avec séquence riche en C
activité hélicase ADN/ARN: brise hybride: relâchement ARNpol

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20
Q

comment est fait un ARNt

A

5 régions:
- boucle D, boucle pseudo-U: assure compatibilité a.a. et nucléotide
- anticodon
- bras accepteur: termine par CCA pour lier a.a.

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21
Q

quelles sont les étapes de l’initiation de traduction

A
  • s-u 16S du ribosome reconnait site RBS
  • début à AUG
  • IF1/2/3 aide à former complexe initiateur
  • ajout s-u 50S
22
Q

comment se fait la terminaison de la traduction

A
  • codon stop
  • pas ajout ARNt mais déplacement au site P par RF1/2
  • RFE relâche ARNm et ribosome
23
Q

à quoi sert ARNtm

A

hybride entre ARN transfert et messager

quand ARNm dégradé: ARNtm ajoute alanine puis 10 a.a. avant d’arrêter

queue ajoutée: site de reconaissance pour protéase pour dégrader protéine

24
Q

qu’est-ce que le phénomène de polarité

A

traduction se fini prématurément ce qui fait finir la transcription prématurément

site rut (pour protéine rho) est cachée par ribosome pendant transcription/traduction
mutation non-sens: codon stop fait arrêter la traduction

site rut plus caché fait terminer transcription

25
qu'est-ce qu'un phénotype constitutif
gène toujours exprimé
26
en général où se situe plus les sites activateurs vs répresseurs sur un gène
activateur: plus régions UP (upstream) répresseur: plus proche promoteurs
27
qu'est-ce qu'une souche diploïde partielle
région du chromosome sur plasmide (ex: lac chromosomique et lac sur plasmid F')
28
quel sera le phénotype de deux mutations lac- récessive sur souche diploïde partielle
s'il y a complémentation entre les deux mutations: lac+
29
quand peut-il y avoir complémentation entre 2 mutations
quand mutations sont sur des gènes différents (pas possible sur même gène ou si affecte site régulatoire)
30
que cause une mutation lacI-
phénotype constitutif mutation trans-récessive
31
que cause une mutaiton lacIS
phénotype lac-, mutation trans-dominante, (LacI répond pas inducteur)
32
que cause une mutation lacId
phénotype constitutif et mutation trans-dominante pcq sous-unité de LacI est mutée qui empêche son action
33
que cause une mutation lacOc
phénotype constitutif, LacI n'interagit plus avec opérateur
34
entre le gène lacI vs lacO, lequel a le plus de chances d'avoir de mutations
lacI pcq gène plus long
35
quel est l'opérateur dans l"opéron gal
2: OE: région promotrice OI: région codante début opéron
36
quel est le répresseur et l'inducteur dans l'opéron gal
répresseur:GalR inducteur: galactose
37
que cause une mutation galRS
comme lacISL: super-répresseur qui ne reconnait plus inducteur
38
ecq opéron lac régulé positivement ou négativement
négativement
39
ecq opéron gal régulé positivement ou négativement
négativement
40
comment montrer que OE est un opérateur
expérience où opérateur OI sur plasmid: opéron pas induit mais si OE et OI sont sur plasmides: opéron est induit
41
ecq opéron gal induit sans OE ou OI
non besoin de deux
42
comment sont placés OE et OI sur ADN
opérateurs doivent être du même côté de double hélice pour ensuite former boucle dans ADN: doivent être séparé par multiple de 10 nt pcq 1 tour hélice= 10 nt
43
à quoi sert la protéine HU dans la régulation de opéron gal
protéine type histone - twist ADN pour inactiver promoteurs situé entre GalR
44
comment ecq GalR inhibe opérateur gal
2 GalR se lient à OE et OI puis forment un dimère
45
opéron trp régulé négativement ou positivement
négativement
46
comment se fait la régulation de opéron trp
tryptophane le produit est un co-répresseur * sans tryptophane: gène trpR forme aporépresseur: pas d'action * avec tryptophane: aporépresseur et tryptophane se lie et forme TrpR qui inhibe
47
dans quel type de régulation (+ ou -) est-il plus difficile d'avoir des mutants constitutifs
positive
48
opéron ara régulé négativement ou positivement
positivement
49
quelle est la protéine régulatrice et l'inducteur chez opéron ara
AraC: activateur et anti-activateur L-arabinose: inducteur
50
que cause la liaison entre L-arabinose et AraC
AraC passe d'un antiactivateur à un activateur
51
que se passe-t-il en absence L-arabinose chez opéron ara
dimère AraC lie O2 et I1: forme boucle de répression
52
que se passe-t-il en présence L-arabinose chez opéron ara
dimère AraC-arabinose interagit avec I1 et I2: permet activation