cytométrie de flux

Question 1

cytométrie de flux déf.

Answer 1

• Méthode d’analyse automatique de cellules
  individuelles entraînées par un flux liquide.
• Permet l’étude précise de cellules isolées

Question 2

le principe (cytométrie de flux)

Answer 2

-Les molécules ou cellules passent une à une,
à grande vitesse dans le faisceau d’un laser.
-C’est la lumière réémise (par diffusion ou
fluorescence) qui permet de classer la
population suivant plusieurs critères (taille,
granulosité) et de les trier

Question 3

les 3 parties du cytométre en flux

Answer 3

• un réseau fluidique constitué d’une veine liquide s’écoulant à vitesse constante qui entraîne et focalise un deuxième flux liquide contenant l’échantillon
• un banc optique avec une ou plusieurs sources lumineuses et ses détecteurs du type
  photodiode et des photomultiplicateurs et filtres optiques qui permettent de quantifier les
  diverses fluorescences émises par chaque objet
• un microprocesseur qui convertit les signaux électriques en signaux numériques,
  coordonne les données, prépare les représentations graphiques et les analyses statistiques.

Question 4

dispositif de tri

Answer 4

-En polarisant brièvement le jet, on obtient des gouttelettes chargées (+ ou -) qui seront
déviées, avec leurs contenus, dans un champ électromagnétique.
-Les analyses se feront à
plusieurs milliers d’objets par seconde.

Question 5

de quoi la diffraction de la lumière est dépendante?

Answer 5

de la taille de la cellule ou la structure (forme,

granulosité, composition membranaire…)

Question 6

autre critère pour identifier les cellules et les trier

Answer 6

-La composition (qualitative et quantitative) en ADN
-La diffraction de la lumière sera
différente en fonction de la
structure et la quantité de l’ADN