Disgnostico Bacteriologico, Micologico Y Parasitologico Flashcards
Métodos directos vs indirectos:
Directos: cultivo tradicional / tinciones, detección de antígeno directo y detección molecular.
Indirectos: serología, evidencia de anticuerpo.
Fresco
Método más sencillo.
Se coloca la muestra entre portaobjetos y cubreobjetos y luego se realiza la observación al microscopio óptico (MO).
Permite ver si hay microorganismos y su movilidad, sin embargo, es difícil ver la morfología de las bacterias.
Tinciones
Las bacterias no se observan en fresco fácilmente al microorganismo óptico por lo que es necesario teñir las muestras.
La tinción aumenta el contraste entre la bacteria y el medio que la rodea y permite observar: aumenta el índice de refracción de la bacteria.
Los colorantes usados generalmente son compuestos orgánicos cargados positivamente (colorantes catiónicos), que se combinan con compuestos cargados negativamente como el ácido nucleico y polisacáridos.
Ej: Gram, Giemsa, Ziehl Neelsen, Kinyoun.
Tinción Gram
Es la más conocida y utilizada en forma generalizada, y constituye el fundamento de la clasificación fenotípica bacteriana.
Permite dividir las bacterias en dos grandes grupos: bacterias gram-positivas y gram-negativas.
Tinción Giemsa
Se utiliza para detectar hongos como levaduras intracelulares de histoplasma capsulatum, Pneumocystis y otros elementos fúngicos como hifas.
Además permite observar parásitos sanguíneos, como Tripanosoma cruzii.
Tinción Ziehl Neelsen
Se utiliza para teñir microorganismos ácido-alcohol resistentes, como micobacterias.
Los microorganismos se tiñen con carbol fucsina básica (fucsina fenicada) y resisten la decoloración con soluciones ácido-alcohol, debido al alto contenido de ácidos micólicos.
La captación de la fucsina fenicada requiere de calentamiento de la muestra.
Por último, se agrega azul de metileno como contracolorante. Los microorganismos se observan rojos sobre un fondo celeste.
La sensibilidad de la baciloscopia (Ziehl Neelsen) es baja (60-80%).
Tinción Kinyoun
Coloración de Kinyoun se basa en el mismo principio que la coloración de Ziehl Neelsen pero no requiere calentamiento.
Se conoce como coloración en frío.
Cultivo
Método más tradicional diagnóstico para bacterias y hongos.
El medio de cultivo es una solución equilibrada de todos los nutrientes, factores de crecimiento y componentes requeridos para que los microorganismos se desarrollen.
Tiene limitaciones inherentes a la metodología entre las que cabe destacar fundamentalmente la demora de tiempo en la obtención de resultados.
Requiere incubaciones de 18-24 hs en el caso de gérmenes de crecimiento rápido y entre 48-72 hs en el caso de microorganismos fastidiosos.
Sin embargo, es útil para el estudio de sensibilidad completo o posterior estudio para nuevas vacunas.
Existe una gran variedad de medios de cultivos que se utilizan de acuerdo a la muestra y el microorganismo que se debe recuperar.
