Eletroforese

Question 1

O que é eletroforese de proteínas?

Answer 1

É uma técnica laboratorial que separa proteínas (de sangue, urina, líquor etc.) com base em suas propriedades físico-químicas (principalmente carga elétrica e tamanho) ao serem submetidas a um campo elétrico contínuo.

Fornece um traçado (eletroferograma) com frações proteicas distintas.

Question 2

Como o pH influencia a migração das proteínas na eletroforese?

Answer 2

O pH do meio altera a carga das proteínas. Cada proteína tem um ponto isoelétrico (pI). Se o pH do tampão estiver acima do pI, a proteína fica carregada negativamente e migra em direção ao polo positivo (ânodo); se estiver abaixo do pI, migra em direção ao polo negativo (cátodo).

Question 3

Quais são os meios de suporte comuns na eletroforese de proteínas?

Answer 3

Gel de agarose
Gel de poliacrilamida
Acetato de celulose

Cada um difere em porosidade e capacidade de resolução, influenciando o padrão de separação das proteínas.

Question 4

Como as proteínas são visualizadas após a eletroforese?

Answer 4

Após a migração, as proteínas são coradas (por exemplo, com Azul de Coomassie ou Negro de Amido). Em seguida, são lidas por um densitômetro, gerando o eletroferograma que mostra as frações bem definidas.

Question 5

Quais são as cinco frações principais identificadas na eletroforese de proteínas séricas?

Answer 5

Albumina
Alfa-1-globulinas (α1)
Alfa-2-globulinas (α2)
Beta-globulinas (β)
Gama-globulinas (γ)

Question 6

Quais são as principais funções da albumina no organismo?

Answer 6

Manutenção da pressão oncótica (evita edema).
Transporte de diversas substâncias (hormônios, ácidos graxos, fármacos etc.).
É a proteína sérica mais abundante (cerca de 60% das proteínas plasmáticas).

Question 7

O que pode causar hipoalbuminemia?

Answer 7

Doenças hepáticas (cirrose, hepatite crônica) que reduzem a síntese.
Desnutrição proteica ou síndromes de má absorção.
Perdas proteicas renais (síndrome nefrótica) ou intestinais (enteropatias).
Processos catabólicos aumentados (infecções graves, neoplasias).

Question 8

Em que situações pode ocorrer hiperalbuminemia?

Answer 8

É rara e geralmente associada à desidratação, quando há relativa concentração das proteínas.

Question 9

Qual a proteína dominante na fração alfa-1-globulina e qual sua função principal?

Answer 9

A alfa-1-antitripsina (AAT) é a principal componente (até 90% do pico de α1). Atua como inibidora de proteases (especialmente elastase de neutrófilos), protegendo tecidos.

Question 10

Quais consequências clínicas podem ocorrer em caso de deficiência de alfa-1-antitripsina?

Answer 10

Enfisema pulmonar precoce (principalmente em fumantes ou exposição a irritantes).
Doença hepática, devido ao acúmulo de AAT anormal no fígado.
Redução notável no pico de alfa-1 na eletroforese.

Question 11

Além da alfa-1-antitripsina, quais outras proteínas podem estar presentes na fração alfa-1?

Answer 11

Protrombina (fator de coagulação).
Transcortina (CBG, que liga cortisol).
Alfa-fetoproteína (AFP), em concentrações muito baixas em adultos saudáveis.

Question 12

Quais as principais proteínas encontradas na fração alfa-2-globulina?

Answer 12

Haptoglobina (liga-se à hemoglobina livre).
Alfa-2-macroglobulina (inibidora de proteases).
Ceruloplasmina (transporta cobre e possui atividade antioxidante).

Question 13

Por que a fração alfa-2 tende a aumentar na síndrome nefrótica?

Answer 13

A alfa-2-macroglobulina, por ser grande, não é facilmente filtrada pelos glomérulos danificados. O organismo a produz em maior quantidade para compensar a perda de proteínas menores (como a albumina).

Question 14

Em que doença a ceruloplasmina pode estar diminuída?

Answer 14

Na Doença de Wilson (acúmulo de cobre nos tecidos), há redução da ceruloplasmina sérica.

Question 15

Quais são as proteínas mais comuns na fração beta-globulina?

Answer 15

Transferrina (transporte de ferro).
Beta-lipoproteínas (LDL).
Componente C3 do complemento (defesa imune inata).

Question 16

Como a transferrina se comporta em anemias ferroprivas?

Answer 16

Geralmente aumenta (hipertransferrinemia) para tentar captar mais ferro disponível.

Question 17

Quais condições podem levar ao aumento das beta-lipoproteínas (LDL)?

Answer 17

Hiperlipidemias.
Hipotireoidismo.
Diabetes mellitus mal controlado.

Question 18

O que sugere a redução do componente C3 do complemento?

Answer 18

Consumo exagerado em processos inflamatórios ou imunológicos (ex.: glomerulonefrites, lúpus eritematoso sistêmico).

Question 19

Quais são as principais proteínas na fração gama?

Answer 19

Imunoglobulinas (IgG, IgA, IgM, IgD, IgE).

São anticorpos produzidos pelos plasmócitos, essenciais na defesa humoral.

Question 20

O que é hipergamaglobulinemia monoclonal e policlonal?

Answer 20

Monoclonal: Produção exagerada de um único clone de imunoglobulinas (ex.: mieloma múltiplo, macroglobulinemia).
Policlonal: Aumento difuso de múltiplas imunoglobulinas (ex.: infecções crônicas, doenças autoimunes).

Question 21

Quais as consequências da hipogamaglobulinemia?

Answer 21

Baixa de anticorpos no soro, levando a maior susceptibilidade a infecções.
Pode ser congênita (imunodeficiências primárias) ou secundária (uso crônico de corticoides, HIV, etc.).

Question 22

Como a eletroforese de proteínas auxilia no diagnóstico de gamopatias monoclonais, como o mieloma múltiplo?

Answer 22

Identifica um pico monoclonal (“M-spike”) na região gama, indicando a produção excessiva de um clone de imunoglobulinas.

É o primeiro passo para suspeitar de mieloma múltiplo, levando a investigações adicionais (imunofixação, biópsia de medula óssea, etc.).

Question 23

Quais alterações na eletroforese podem indicar processos inflamatórios?

Answer 23

Aumento das frações de alfa-1 e alfa-2 (proteínas de fase aguda, como a haptoglobina, alfa-1-antitripsina, ceruloplasmina).
Elevação policlonal de imunoglobulinas na fração gama.

Question 24

Por que a redução de albumina pode refletir problemas nutricionais ou hepáticos?

Answer 24

A albumina é sintetizada exclusivamente pelo fígado e depende de um aporte proteico adequado.
Baixos níveis podem significar falha de síntese (cirrose) ou dieta insuficiente em proteínas.

Question 25

Quais mudanças eletroforéticas podem ser vistas em doenças renais, como a síndrome nefrótica?

Answer 25

Redução acentuada do pico de albumina (perda urinária). Aumento de alfa-2-globulinas (especialmente alfa-2-macroglobulina). Possível diminuição de outras frações, dependendo do grau de perda proteica.

Question 26

Como a eletroforese pode auxiliar na avaliação de estados imunológicos?

Answer 26

Verificando alterações nos níveis de imunoglobulinas na fração gama. Hipergamaglobulinemia difusa sugere inflamação crônica ou doença autoimune; hipogamaglobulinemia sugere imunodeficiência.

Question 27

Quais são os principais tipos de amostras utilizados na eletroforese de proteínas?

Answer 27

Soro (mais comum). Urina (para pesquisa de cadeias leves – Bence Jones). Líquor (para investigação de patologias neurológicas e inflamatórias do SNC). Líquidos corporais (ascítico, pleural etc.), em casos específicos.

Question 28

Qual a importância da pesquisa de cadeias leves (Bence Jones) na urina?

Answer 28

Cadeias leves kappa ou lambda na urina (proteinúria de Bence Jones) são associadas ao mieloma múltiplo e outras gamopatias monoclonais. São detectadas por eletroforese e confirmadas por imunofixação urinária.

Question 29

Quando a eletroforese de proteínas no líquor (LCR) é indicada?

Answer 29

Para investigar processos neurológicos inflamatórios, infecciosos ou desmielinizantes (por exemplo, esclerose múltipla, onde se observam bandas oligoclonais no LCR).

Question 30

Quais são as vantagens da eletroforese de proteínas?

Answer 30

Método relativamente simples, rápido e de baixo custo. Oferece um panorama geral do perfil proteico, auxiliando na diferenciação de diversas condições clínicas. Pode ser repetido para monitorar evolução ou resposta terapêutica.

Question 31

Quais são as limitações da eletroforese de proteínas?

Answer 31

Necessita de interpretação especializada, correlacionada ao quadro clínico. Resultados podem ser afetados pela qualidade da amostra e condições de coleta/armazenamento. Algumas proteínas migram juntas, exigindo métodos complementares (imunofixação) em casos específicos (gamopatias monoclonais).

Question 32

Por que a eletroforese de proteínas é considerada uma ferramenta essencial na prática clínica?

Answer 32

Permite identificar alterações qualitativas e quantitativas das proteínas séricas e de outros fluidos. Fundamental no diagnóstico e acompanhamento de gamopatias monoclonais, inflamações, distúrbios imunológicos e condições hepáticas e renais.

Question 33

Em que situações a eletroforese de proteínas séricas tem maior destaque?

Answer 33

Detecção de mieloma múltiplo e outras gamopatias monoclonais. Avaliação de inflamações agudas e crônicas. Investigação de estados imunológicos e doenças hepáticas/renais.

Question 34

Quais são as propriedades físico-químicas das proteínas que afetam seu comportamento na EPS?

Answer 34

Carga elétrica (depende do pH do tampão e do pI da proteína). Tamanho/peso molecular. Conformação estrutural (pode afetar a mobilidade no gel ou capilar).

Question 35

Como ocorre a separação das proteínas no gel (agarose ou acetato de celulose)?

Answer 35

Aplica-se a amostra (soro/plasma) no gel. Sob corrente elétrica, proteínas migram de acordo com suas cargas (para polo + ou -) e tamanho. Após a migração, cora-se o gel e faz-se a leitura (densitometria) das bandas.

Question 36

Qual o percentual aproximado da fração de albumina em relação às proteínas totais?

Answer 36

Cerca de 60% (podendo variar de 55% a 66% dependendo dos valores de referência de cada laboratório).

Question 37

Cite dois exemplos de proteínas presentes na fração alfa-1.

Answer 37

Alfa-1-antitripsina (AAT) Transcortina (CBG)

Question 38

Cite dois exemplos de proteínas presentes na fração alfa-2.

Answer 38

Haptoglobina Ceruloplasmina

Question 39

Quais proteínas compõem a fração beta-1 e beta-2, de acordo com alguns métodos que separam essas subfrações?

Answer 39

Beta-1: Principalmente transferrina e beta-lipoproteínas (LDL). Beta-2: Pode incluir C3 do complemento e outras glicoproteínas.

Question 40

Quais são as cinco classes principais de imunoglobulinas presentes na fração gama?

Answer 40

IgG, IgA, IgM, IgD, IgE

Question 41

Quais são as cinco classes principais de imunoglobulinas presentes na fração gama?

Answer 41

IgG, IgA, IgM, IgD, IgE.

Question 42

O que caracteriza um padrão de “pico policlonal” na fração gama?

Answer 42

Alargamento difuso da banda gamma, indicando produção de anticorpos por múltiplos clones (infecções crônicas, doenças autoimunes etc.).

Question 43

O que caracteriza um padrão de “pico monoclonal” (componente M) na fração gama?

Answer 43

Pico estreito e bem definido em determinado ponto da região gamma (ou beta-gama), refletindo produção de um único clone de células (mieloma múltiplo, macroglobulinemia etc.).

Question 44

O que é hipogamaglobulinemia na eletroforese de proteínas?

Answer 44

Diminuição acentuada ou ausência do pico de imunoglobulinas na região gama, sugerindo imunodeficiências primárias ou secundárias.

Question 45

Qual é o perfil eletroforético típico da cirrose hepática?

Answer 45

Redução da fração de albumina (pela síntese hepática prejudicada). Aumento da fração gama (hipergamaglobulinemia policlonal) e possível “ponte” β-γ. Pode haver alterações discretas em α1 e α2.

Question 46

Como se apresenta a eletroforese em uma enteropatia perdedora de proteínas?

Answer 46

Redução acentuada de albumina (↑ perdas intestinais). Possíveis desequilíbrios nas demais frações, mas a hipoalbuminemia é o achado mais marcante.

Question 47

Por que a síndrome nefrótica mostra aumento de alfa-2-globulinas?

Answer 47

A alfa-2-macroglobulina tem alto peso molecular e não é facilmente perdida na urina. Há produção aumentada para compensar a perda de albumina, resultando em pico elevado de α2.

Question 48

Quais são as características de um caso de deficiência de alfa-1-antitripsina na eletroforese?

Answer 48

Pico de α1 muito reduzido ou ausente. Associação clínica com enfisema pulmonar precoce e/ou cirrose em pacientes jovens.

Question 49

Quais os valores de referência aproximados para proteínas totais e relação A/G em adultos?

Answer 49

Proteínas totais: ~6,4 a 8,9 g/dL. Relação albumina/globulinas (A/G): Entre 0,8 e 2,2.

Question 50

Quais são os valores de referência aproximados para cada fração proteica no soro?

Answer 50

Albumina: 3,5–5,8 g/dL (55–66%) Alfa-1: 0,19–0,44 g/dL (2,9–4,9%) Alfa-2: 0,45–1,05 g/dL (7,1–11,8%) Beta: Beta-1 (0,30–0,64 g/dL), Beta-2 (0,20–0,58 g/dL) Gama: 0,71–1,67 g/dL (11,1–18,8%)

Question 51

Qual a importância de realizar a eletroforese de proteínas na urina?

Answer 51

Identificar proteinúria de Bence Jones (cadeias leves kappa ou lambda), típica do mieloma múltiplo. Caracterizar a natureza da proteinúria (glomerular, tubular, mista). Avaliar a gravidade de doenças renais (síndrome nefrótica, nefropatia do mieloma etc.).

Question 52

Como deve ser coletada a amostra para eletroforese de proteínas urinárias?

Answer 52

Preferencialmente urina de 24 horas, mantendo refrigeração (2–8 °C) durante toda a coleta. Medir e informar o volume total coletado ao final. Em alguns casos, pode-se usar amostra isolada como triagem.

Question 53

Quais os valores de referência de proteínas na urina de 24 horas em adultos saudáveis?

Answer 53

< 150 mg/24h de proteínas totais. Albumina representando < 50% do total em condições normais.

Question 54

O que são proteínas de Bence Jones?

Answer 54

Cadeias leves livres (kappa ou lambda) produzidas em excesso por plasmócitos neoplásicos. Sua detecção urinária é fundamental para diagnóstico e monitoramento do mieloma múltiplo.

Question 55

Por que se realiza eletroforese no líquido ascítico?

Answer 55

Auxiliar na diferenciação entre transudato (ascite por hipertensão portal, como na cirrose) e exsudato (infecção, malignidades). Avaliar a fração proteica e o Gradiente de Albumina Soro-Ascite (GASA).

Question 56

Como a eletroforese auxilia na análise de derrames pleurais?

Answer 56

Diferencia transudatos (geralmente por insuficiência cardíaca, cirrose, hipoalbuminemia) de exsudatos (inflamações, infecções, neoplasias). Verifica o predomínio de proteínas globulínicas ou albumina, correlacionando com o soro.

Question 57

Qual é a aplicação da eletroforese no líquido cefalorraquidiano (LCR)?

Answer 57

Detectar bandas oligoclonais, indicativas de síntese intratecal de imunoglobulinas (ex.: esclerose múltipla). Avaliar barreira hematoencefálica (comparando albumina no LCR e no soro).

Question 58

Qual a aplicação da eletroforese de proteínas no diagnóstico e monitoramento do mieloma múltiplo?

Answer 58

Identificar e quantificar o pico monoclonal no soro (EPS) ou cadeias leves na urina. Acompanhar a evolução da doença, resposta ao tratamento e recidivas (diminuição ou aumento do componente M).

Question 59

De que forma a eletroforese ajuda a avaliar doenças renais?

Answer 59

Mostra redução de albumina e aumento de alfa-2 na síndrome nefrótica. Permite pesquisa de proteinúria seletiva (predomínio de albumina) ou não seletiva (perda de várias proteínas). Fundamental para detectar “proteinúria de Bence Jones” em mieloma.

Question 60

Quais são as principais alterações encontradas na eletroforese de um paciente com cirrose hepática?

Answer 60

Diminuição do pico de albumina (síntese reduzida). Aumento difuso da fração gama (hipergamaglobulinemia policlonal). Possível “ponte” β-γ (perda de nitidez entre beta e gama).

Question 61

Quais cuidados devem ser tomados na coleta do soro para eletroforese de proteínas?

Answer 61

Usar tubo sem anticoagulante (tubo seco) ou com gel separador. Centrifugar adequadamente para obter soro livre de hemólise. Preferência por jejum de 4 horas para evitar lipemia.

Question 62

Como a qualidade da amostra pode afetar o resultado da eletroforese?

Answer 62

Hemólise, lipemia e amostras mal conservadas podem distorcer a separação das proteínas. Falhas na coleta e armazenamento podem levar a degradação ou precipitação proteica, interferindo na leitura do traçado.

Question 63

Por que a interpretação da eletroforese deve ser integrada com o quadro clínico?

Answer 63

Um mesmo padrão pode ter múltiplas causas, exigindo correlação com histórico do paciente, exames de imagem, outros testes laboratoriais (função hepática, renal, imunológica). É um exame de triagem e monitoramento, não fornecendo diagnóstico conclusivo isoladamente.

Question 64

Quais métodos complementares podem ser usados quando se encontra um pico monoclonal na eletroforese?

Answer 64

Imunofixação eletroforética (para identificar classe e tipo de cadeia leve). Dosagem de cadeias leves livres no soro. Biópsia de medula óssea (quando suspeita de mieloma múltiplo).

Question 65

Resuma em uma frase a utilidade principal da Eletroforese de Proteínas.

Answer 65

É uma ferramenta essencial de triagem para detectar e quantificar alterações proteicas (albumina e globulinas) em diversas doenças inflamatórias, infecciosas, hepáticas, renais e hematológicas, guiando investigações mais específicas.