Imuno lab

Question 1

Quais os 2 principais tipos de análise em imunofluorescência?

Answer 1

Quantitativa e qualitativa

Question 2

Refere alguns métodos de deteção em imunofluorescência?

Answer 2

Microscopia de fluorescência, Fluorometria, Citometria de fluxo e Microscopia confocal/STED.

Question 3

Imunofluorescência direta

Answer 3

Utiliza um anticorpo primário que já está diretamente marcado com um fluoróforo. Esse anticorpo liga-se diretamente ao
antígeno na amostra, permitindo a visualização sob o microscópio de fluorescência.

Question 4

Imunofluorescência indireta

Answer 4

Usa um anticorpo primário para se ligar ao antígeno. Em seguida, um anticorpo secundário, marcado com um fluoróforo, se liga ao anticorpo primário.

Question 5

FAN (Fator Antinuclear)

Answer 5

Exame laboratorial utilizado para diagnosticar várias doenças autoimunes, especialmente para detetar a presença de anticorpos que atacam componentes do núcleo celular, anticorpos antinucleares (ANA)
O FAN é realizado através da técnica de imunofluorescência indireta.

Question 6

Fluoróforo

Answer 6

É a molécula química que absorve luz (λEX) e emite fluorescência (λEM)

Question 7

Fluorocromo

Answer 7

Um fluoróforo ligado a outra molécula (como um anticorpo) para aplicações biológicas

Question 8

Imunofluorescência Qualitativa

Answer 8

Tem como objetivo identificar presença/ausência do antigénio.

Question 9

Imunofluorescência Quantitativa

Answer 9

Tem como objetivo medir a quantidade de antigénio.

Question 10

Ficoll-metrioizato de sódio (t-1)

Answer 10

Tem uma c conhecida, serve para separar as células mononuceares do resto.

Question 11

Solução de kurt (t-1)

Answer 11

corante usado para corar os leucócitos. Tem ácido acético que lisa as plaquetas e dois corantes.

Question 12

PBS

Answer 12

Solução isotónica, previne a rotura das células, ao contrário da água.

Question 13

Linfócitos t

Answer 13

Têm moléculas cd4 e cd8 na superfície.

Question 14

Cd4

Answer 14

Helper, produzem citosinas

Question 15

Cd8

Answer 15

Killer, atacam células com vírus

Question 16

Linfócitos b

Answer 16

Têm bcr, recetor especifico das células b que é uma cadeia pesada mu - igm

Question 17

Câmara de Neubauer

Answer 17

exemplo de hemocitómetro, contador de células.

Question 18

Anticorpos ant-igG humana marcados com fluoresceína (t-2)

Answer 18

Anticorpo secundário, conjugado com o fluróroro.

Question 19

Soro dos doentes (t-2)

Answer 19

Anticorpo primário

Question 20

Floresteína

Answer 20

Fluoróforo usado no t-2

Question 21

Citometria de fluxo

Answer 21

É uma técnica usada para analisar e medir as características físicas e/ou químicas de células ou partículas suspensas num fluido.

Question 22

CD3

Answer 22

FITC (Fluorescein isothiocyanate)

Question 23

CD4

Answer 23

PE (phycoerythrin)

Question 24

CD19

Answer 24

APC (Allophycocyanin)

Question 25

FCS (forward light scatter) (t-3)

Answer 25

Determina o tamanho da célula

Question 26

SSC (side scatter) (t-3)

Answer 26

Determina a granulusidade da célula

Question 27

papel das citoquinas

Answer 27

São proteínas reguladoras, que desempenham modulando respostas imunes

Question 28

Molde de DNA (DNA template)

Answer 28

Contém a sequência de DNA que se pretende amplificar

Question 29

DNA polimerase

Answer 29

* Taq polimerase (isolada da bactéria Thermus aquaticus, vive em fontes termais) responsável pela síntese das novas cadeias de DNA * Algumas polimerases possuem atividade exonuclease (3'→5') permitindo correção de erros (proofreading)

Question 30

Primers

Answer 30

* Pequenas sequências de DNA (15-30 nucleótidos) que determinam onde a síntese da nova cadeia de DNA se inicia * São específicos para a sequência a amplificar * Dois tipos: primer sense e primer anti-sense

Question 31

dNTPs (desoxinucleótidos)

Answer 31

Blocos fundamentais para a construção da nova cadeia de DNA (incluem dATP, dCTP, dGTP e dTTP)

Question 32

Magnésio (Mg²⁺)

Answer 32

Cofator essencial para a DNA polimerase, necessário para a atividade da enzima.

Question 33

Solução Tampão

Answer 33

Mantém as condições ideais para o funcionamento da DNA polimerase

Question 34

Água (H₂O)

Answer 34

Meio onde ocorre a reação

Question 35

Termociclador

Answer 35

Equipamento que realiza os ciclos de temperatura necessários para a PCR