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Imunologia - Examen final > Imunoensayos > Flashcards

Imunoensayos Flashcards

(52 cards)

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1
Q

O que são imunoensaios ou teste sorológicos?

A

Técnicas laboratoriais para identificar anticorpos (IgG - cronico/IgM - aguda) ou antígenos.

Técnicas laboratoriais para identificar anticorpos (IgG - crônico/IgM - aguda) ou antígenos.

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2
Q

Quando busco um antígeno devo usar o que como base da análise? (e vice versa)

A

Quando busco antigeno: Uso anticorpo como base da analise
Quando busco o anticorpo: Uso o antigeno como base da analise

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3
Q

Qual é a janela de soroconversão?

A

15 a 30 dias = tempo que o corpo demora para encontrar o microorganismo e produzir anticorpos.

Tempo que o corpo demora para encontrar o microorganismo e produzir anticorpos.

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4
Q

Antes de 15 dias devo buscar o _____________.
Depois de 15 dias devo buscar o _____________.

A

Antígeno
Anticorpo

Quando busco o anticorpo, uso o antígeno como base da análise.

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5
Q

Epítopo

A

É o sítio onde o antígeno se liga ao anticorpo.

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6
Q

Antisoro

A

É um soro com diferentes anticorpos.

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7
Q

Avidez

A

Conjunto de múltiplas forças de ligação entre antígeno - anticorpo.

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8
Q

Defina sorologia

A

Análise de anticorpos (IgM e IgG) no soro ou outros fluidos.

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9
Q

O que são reações cruzadas?

A

Sítio combinatório do anticorpo capaz de reagir a diferentes antígenos ao mesmo tempo.

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10
Q

Exemplo de reações cruzadas:

A

VDRL teste treponemico não específico: Sífilis x virose:
Alto = Sífilis
Baixo = outra virose.

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11
Q

Sensibilidade em testes sorológicos

A

% de pacientes doentes com teste positivo detectados em uma população sabidamente infectada.

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12
Q

Especificidade em testes sorológicos

A

% de indivíduos não doentes com teste negativo em uma população sabidamente não infectada.

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13
Q

Janela imunológica

A

Tempo em que o indivíduo exposto ao antígeno leva até a produção de anticorpos - aprox. 30 dias.

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14
Q

Quais são os tipos de testes sorológicos-imunoensaios? (5)

A
  1. Reação de precipitação
  2. Teste de aglutinação
  3. Ensaios líticos
  4. Teste de imunofluorescência
  5. Teste de imunoenzimas/imunotestes
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15
Q

REAÇÃO DE PRECIPITAÇÃO OU IMUNOPRECIPITAÇÃO

A

Reação antígeno-anticorpo (que são solúveis) que se difundem em um meio semi-sólido (ágar ou agarose).
Quando há interação entre-os (vão em direcção um ao outro) forma-se os precipitados que é malha/trama de anticorpo-antigeno (linha visível, por que produz imunocomplexos insolúveis)

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16
Q

Efeito prozona X Efeito pós-zona

A

EFEITO PROZONA: É o excesso de anticorpo no material e pouco antigenos, não forma imunocomplexos visíveis. (RESULTADOS FALSOS NEGATIVOS).

PÓS-ZONA: Excesso de antígeno.

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17
Q

Imunodifusão radial dupla (Ouchterlony)?

A
  • Exame qualitativo.
  • Antígeno-anticorpo no gel de ágar, formando um arco/linha de precipitação visível ao olho nu.
  • Tempo: 18-24hs
  • Baixa sensibilidade.
  • Se busca a especificidade do antígeno ao anticorpo & AUTO-ANTICORPOS.
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18
Q

Imunodifusão radial simples (MANCINI)

A
  • Exame quantitativo.
  • Anticorpo especifico esta incorporado ao ágar, adiciona o antígeno (busca a reação com o antígeno).
  • Tempo: 48-72hrs.
  • Halo é proporcional a quantidade de antígeno.
  • Se busca imunoglobulinas séricos & proteínas de complemento.
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19
Q

Imunoeletroforese

A

Separa-se as proteínas séricas do sangue de acordo com o peso molecular.

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20
Q

TESTES DE AGLUTINAÇÃO

A

Reação antígeno-anticorpo especifico (avalio a presença do anticorpo quando adiciono o antígeno) forma-se um “agregado” ou “grumos” ou “floculações” que é visível ao olho nu.

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21
Q

Vantagens e desvantagens dos testes de aglutinação.

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A
  • Vantagens: + sensível / muito disponível / rápido.
  • Desvantagen: - especifico por reações cruzadas
22
Q

Aglutinação direta

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A

BUSCA-SE O ANTÍGENO!

Nesta reação utilizam-se partículas antigênicas insolúveis em sua forma íntegra ou fragmentada: hemácias, bactérias, fungos e protozoários podem ser aglutinados diretamente por anticorpo.

23
Q

Exemplo de hemoaglutinação direta.

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A

Tipificação sanguínea (ABO ou Rh, antígeno D)

24
Q

Aglutinação indireta

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A

BUSCA-SE ANTICORPOS (IgM/IgG)

Isto pode ser feito através de contato direto com antígenos solúveis.

25
Exemplos de testes de aglutinação indireta (titulação dos anticorpos)
Exames para sifilis, doença de chagas, toxoplasmose, auto-anticorpos de doenças reumáticas...
26
O que é o teste de aglutinação do látex?
Esferas de poliestireno utilizadas como suporte para adsorção de proteínas e antígenos polissacarídeos.
27
Exemplos de teste de aglutinação do latex (5)
1. Fator reumatoideo (FAN) 2. Beta-hcg sanguíneo. 3. Anti-estreptolisila O (ASLO) 4. Proteína C reativa (PCR) 5. Antígenos polissacarídeos bacterianos
28
Teste de inhibição da aglutinação do látex.
As reações de inibição da aglutinação são baseadas na competição entre antígenos particulados e solúveis por um número limitado de sítios combinatórios em moléculas de anticorpos. A inibição da aglutinação é um indicador de reação positiva. Exemplo: BHCG na urina.
29
Teste de aglutinação de cristais de colesterol
O teste do VDRL (Veneral Disease Research Laboratory) emprega cristais de colesterol que são sensibilizados com lecitina e cardiolipina para a pesquisa de anticorpos cardiolipídicos da sífilis ou na presença de auto-anticorpos da síndrome anti-fosfolípide primária ou secundária, neste caso em geral associada ao lupus eritematoso sistêmico
30
Coaglutinação
Busca reação antígeno-anticorpo para Staphylococcus aureus.
31
ENSAIOS LÍTICOS
Testes qualitativo que detecta a presença de anticorpo específico no soro do paciente utilizando antígeno, complemento e eritrócitos.
32
Passos da reação de fixação de complemento
1. A presença de anticorpo específico no soro do paciente é detectada através da utilização de antígeno, complemento e eritrócitos. 2. Se o anticorpo está presente, este irá se ligar ao antígeno específico e o imunocomplexo formado ativa a cascata do complemento pela via clássica e haverá consumo de complemento. 3. Na etapa seguinte, adiciona-se o sistema indicador da reação que consiste de hemácias de carneiro sensibilizadas com hemolisina (anticorpo anti-hemácias de carneiro obtido em coelhos). 4. A medida da atividade hemolítica do complemento no sistema indicador permite determinar a presença ou não de antígeno ou anticorpo na mistura inicial e sua quantidade.
33
Na imunofluorescência o que é um conjugado?
Anticorpo ou Antígeno + Ligante
34
Na imunofluorescência, quais são os tipos de ligantes?
1. Radioisotopo (Radioimunoensaio: Iodo - 125 ) 2. Fluorocromo (Imunofluorescência) 3. Enzima (Imunoenzimaticos)
35
A ligação que une o Ag ou Ac ao ligante é uma ligação ______________.
Covalente.
36
TESTE DE IMUNOFLUORECÊNCIA:
Ligação de anticorpo ou antígeno a um ligante que emite fluorescência quando excitado.
37
Qual é a diferença entre imunofluorescência direta e indireta?
Direta identifica antígeno Indireta identifica anticorpo.
38
Principais usos da imunofluorescência direta (4)
Busca antígenos para: 1. Influenza 2. Parainfluenza 3. Vírus sincicial respiratório 4. Adenovírus
39
Principais usos da imunofluorescência indireta (8)
Autoanticorpos para: 1. Vasculites sistêmicas (ANCA) 2. Treponema pallidum (FTA-Abs) 3. Tripanosoma cruzi 4. Chlamydia 5. EBV 6. Doença de Chagas 7. Leishamiois 8. Rubéola
40
Citometria de Fluxo
É a aplicação das técnicas de imunofluorescênica na identificação de determinadas células em suspensão, ou seja, na identificação de antígenos em células vivas.
41
TESTES IMUNOENZIMÁTICOS
Testes que usam a mudança de cor da interação da enzima com seu substrato para medir a reação entre antígeno e anticorpo.
42
Quando pedir um ELISA?
1. Diagnóstico de infecções: presença de anticorpos específicos (HIV, Hep. B e C). 2. Rastreamento de doenças: sífilis para gestantes. 3. Acompanhamento de tratamento: carga viral do HIV. 4. Detecção de alergias: presença de anticorpos IgE no sangue para alergias específicas (amendoim, pólen, mofo...)
43
ELISA Indireto
Busca-se o ANTICORPO. Anticorpo secundário (é o anti-anticorpo!!!) marcado específicamente para o anticorpo primário. + Especifico. ## Footnote O ELISA Indireto utiliza um anticorpo secundário marcado para detectar o anticorpo primário.
44
Qual é o procedimento básico do ELISA Indireto?
1.Antígeno *sólido* no fundo do poço + Lavagem de bloqueio 2.Adiciona-se o soro *líquido* do paciente (com anticorpos primários) 3.Adiciona o conjugado (anti-anticorpo ligado á enzima) 4.Adiciona o substrato cromogenico para a leitura no espectofotrometro ## Footnote O teste busca o anticorpo no soro do paciente.
45
ELISA Direto
BUSCA ANTIGENO. Identifica se o indivíduo foi exposto a uma doença. Não tem antianticorpo (anticorpo secundário). A enzima está no anticorpo primário. ## Footnote O antígeno é fixado a um suporte sólido e o anticorpo primário, ligado a uma enzima, é utilizado.
46
O que é o ELISA Sanduíche?
Observa-se o antígeno entre o anticorpo de detecção (anticorpo primário) & o anticorpo de captura (anti- anticorpo ou anticorpo secundário). Busca-se o ANTIGENO que reaciona com o anticorpo 1° e o anticorpo 2°. É possível fazer a detecção simultânea de imunoglobulinas de diferentes classes. ## Footnote É o mais sensível para detectar doenças na fase aguda.
47
Qual é a melhor abordagem ELISA para detectar a fase aguda da doença?
ELISA Sanduíche (infecção recente de IgM) ## Footnote É ideal para infecções recentes, como a detecção de IgM.
48
O que caracteriza o ELISA por Competição?
A presença de antígenos é revelada pela competição com um antígeno marcado. Esse método é utilizado principalmente quando o antígeno testado possui poucos epítopos de ligação ou é muito pequeno. ## Footnote Este método é utilizado quando o antígeno testado possui poucos epítopos de ligação ou é muito pequeno.
49
Quais são as vantagens da Imunocromatografia?
Não necessita de ambiente laboratorial e fornece resultados rápidos ## Footnote Busca-se antígenos e anticorpos (IgG ou IgM).
50
O que se busca da imunocromatografia?
Busca-se ANTIGENOS & ANTICORPOS (IgG ou IgM).
51
Western-Blot
Método para identificar proteínas e glicoproteínas reconhecidas por anticorpos. Eletroforese em gel (separa proteínas conforme o seu peso molecular) + Imunotranferência para o leitor (papel de nitrocelulose). ## Footnote Utiliza eletroforese em gel e imunotransferência para confirmação de infecções como HIV.
52
Qual é o método utilizado para confirmar infecções por HIV?
Western-Blot ## Footnote Este método é considerado um teste confirmatório após resultados positivos de outros testes.

Imunologia - Examen final (2 decks)

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