lab Flashcards
(18 cards)
Tras extraer ADN genómico y correr una electroforesis en gel de agarosa, observas una banda principal de alto peso molecular y una “escalera” de bandas más pequeñas en la parte de debajo de la banda principal. ¿Qué indica este patrón?
Degradación parcial del ADN
¿Por qué las repeticiones cortas en tándem (STRs) son especialmente útiles en identificación forense?
Porque presentan alta variabilidad entre individuos y se heredan de forma mendeliana
¿Cuál de las siguientes afirmaciones describe mejor un polimorfismo genético?
Es una variación heredable en la secuencia de ADN presente en al menos el 1% de una población
¿Cómo se visualizan los fragmentos de DNA después de una electroforesis?
Usando bromuro de etidio, GelRed, Fast Blast que se intercalan en el DNA.
¿Cuáles son las condiciones de electroforesis que realizaste en tus prácticas de laboratorio?
100V durante 30 min
¿Cuál es la utilidad principal de incluir un marcador de peso molecular en un gel de agarosa?
Estimar el tamaño de los fragmentos de DNA desconocidos
¿Qué relación existe entre el tamaño del fragmento de DNA y la distancia que recorre en el gel?
A menor tamaño, mayor distancia recorrida
¿Cómo afecta la concentración de agarosa en el gel a la resolución de fragmentos de DNA?
Una mayor concentración mejora la resolución de fragmentos pequeños
¿Cuál es la función del gel de agarosa en una electroforesis de DNA?
Actuar como una malla molecular que separa los fragmentos según su tamaño
¿Por qué las moléculas de DNA migran hacia el polo positivo durante una electroforesis?
Porque el fosfato en la columna vertebral del DNA le confiere una carga negativa
En un ensayo ELISA indirecto, obtienes una señal de absorbancia muy baja (observas poco cambio de color azul en los pozos) en todas las muestras, incluyendo los controles positivos. ¿Cuál podría ser la causa más probable?
Fallo en la adición del sustrato de la enzima
Durante una PCR de punto final, incluyes un control negativo sin ADN molde. Tras la electroforesis, observas una banda en el control negativo. ¿Qué indica este resultado?
Hubo contaminación cruzada o presencia de ADN contaminante
¿Cuál es la función del ion magnesio (Mg²⁺) en la mezcla de reacción de una PCR de punto final?
Actuar como cofactor esencial para la actividad catalítica de la ADN polimerasa
Durante una PCR de punto final, ¿qué proceso ocurre durante la etapa de anillamiento (annealing)?
Los cebadores se hibridan con sus secuencias complementarias en el DNA molde
¿Por qué es necesario agregar alcohol frío (etanol o isopropanol) en la fase final de una extracción de ADN casera?
Para precipitar el ADN, ya que no es soluble en alcohol frío
¿Qué función cumple el detergente (como el SDS) en una extracción artesanal de ADN?
Romper las membranas celulares y nucleares para liberar el ADN
¿Qué característica define a una secuencia palindrómica en el contexto del ADN y por qué es relevante para las enzimas de restricción?
Es una secuencia que se lee igual en direcciones opuestas en hebras complementarias, y permite el reconocimiento específico por enzimas de restricción
En el protocolo de extracción de ADN a partir de sangre total, se utiliza una solución de cloruro de amonio. ¿Cuál es su función principal en el proceso?
Lisar selectivamente los glóbulos rojos para eliminar su contenido y facilitar la obtención de ADN de leucocitos
