MANIPULACIÓN DE GENES. ANÁLISIS DE ÁC. NUCLEÍCOS: PCR, BLOT Y ELISA

Question 1

De que depende la extracción de un ácido nucléico?

Answer 1

El tipo de ac que se va a extraer, el organismo de origen, la fuente y la técnica

Question 2

ALGUNAS FUENTES DE ÁCIDO NUCLEICO

Answer 2

sangre
suero
plasma
biopsia
orina
heces
liq cefalorraquídeo, amniótico o sinovial
semen
raspado bucal

Question 3

Pasos para la extracción

Answer 3

• Lisis de la célula
• Separación
• Purificación
• Precipitación
• Lavado
• Disolución

Question 4

Método más común

Answer 4

Fenol-cloroformo

Question 5

Espectrofotometría

Answer 5

Moleculas suspendidas que permiten el paso de luz, la cantdad de luz que pasa es inversamente proporcional a la cantidad de moléculas

Question 6

Fluorometria

Answer 6

Unión específica de colorantes fluorescentes al ácido
nucleico

Question 7

Que significa PCR

Answer 7

Reacción en cadena de la polimerasa

Question 8

Que se requiere para una PCR

Answer 8

• Secuencia de DNA
• Enzima DNA polimerasa
• Desoxiribonucleotidos (dNTP)
• Primers

Question 9

Proceso de una PCR

Answer 9

DESNATURALIZACIÓN
HIBRIDACIÓN
EXTENSIÓN

Question 10

Que se hace al final de una PCR?

Answer 10

Un gel de electroforesis

Question 11

Tipos de PCR

Answer 11

Estandar o punto final, multiple, RFLP, RT (transcriptasa reversa) y TR o qPCR (real time)

Question 12

Aplicación de la PCR múltiple

Answer 12

Detectar varios segmentos de ADN en una sola prueba - cualitativa

Question 13

Aplicación de la PCR RFLP

Answer 13

Polimorfismos

Question 14

Aplicación de la PCR tiempo real

Answer 14

Es la más especifica, no necesita electroforesis y muestra cargas cuantitativas de ADN

Question 15

Que PCR se utiliza si quieres hacer una prueba de paternidad o asegurarte de que dos organismos sean compatibles

Answer 15

PCR RFLP

Question 16

Que PCR se usa para el COVID 19

Answer 16

Multiple, RT (transcriptasa reversa) y TR o qPCR (real time)

Question 17

Componentes de la PCR en tiempo real (qPCR)

Answer 17

• Templado (DNA)
• Enzima (Taq DNA polimerasa)
• Desoxirribonucleotidos
  trifosfatados
• Primers (oligonucleotidos)
• Magnesio
• Buffer
• Agua

Question 18

Colorantes para PCR en tiempo real (qPCR)

Answer 18

• Especificos
  Sondas fluorescentes de
  oligonucleótidos con un reportero
  fluorescente
• No especificos
  Moléculas intercalantes que tienen
  afinidad por el dsDNA
  SYBER Green

Question 19

tipos de cuantificación qPCR

Answer 19

Absoluta - numero exacto
Relativa - cambios en la
expresión de genes en distintos
estados fisiológicos

Question 20

TIPOS DE SISTEMA INMUNE

Answer 20

INNATO (Rápida e innespecífica) Y ADAPTATIVO (Lenta y especifica)

Question 21

SISTEMA INMUNE ADAPTATIVO

Answer 21

Lento y especifico
Linfocitos B - Diferenciación - Anticuerpos

Question 22

Que es un ELISA

Answer 22

Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas. permite detectar la presencia de anticuerpos o antígenos específicos en una muestra de sangre, suero o líquido biológico.

Question 23

Tipos de ELISAs

Answer 23

Directo, indirecto y tipo sandwich

Question 24

ELISA DIRECTO

Answer 24

Suero -> anticuerpo -> Tinte

Question 25

ELISA INDIRECTO

Answer 25

Suero del px -> 1º Anticuerpo -> 2º Anticuerpo con tinte para marcar anticuerpo

Question 26

ELISA SANDWICH

Answer 26

1º Anticuerpo -> Suero px -> 2º Anticuerpo

Question 27

Que es la citometría de Flujo

Answer 27

Método rápido objetivo y cuantitativo de análisis de células, núcleos, cromosomas, mitocondrias u otras partículas en suspensión.

Question 28

Clúster de Diferenciación

Answer 28

* Proteínas que se encuentran en la superficie celular. * Cada molécula CD pueden ser especificas para una célula o para un linaje celular. * Más de 400 marcadores celulares

Question 29

Para que se puede utilizar la citometria de flujo

Answer 29

* Diagnóstico de leucemias, linfomas * Seguimiento de enfermedades : VIH * Estudio de cáncer * Cuantificación de concentraciones de moléculas solubles * Eficacia de tratamientos antitumorales e inmunosupresores

Question 30

Para que se utiliza el southern blot?

Answer 30

Para detectar una secuencia específica de DNA

Question 31

Para que se utiliza el northernn blot?

Answer 31

Para detectar una secuencia específica de RNA

Question 32

Para que se utiliza el western blot?

Answer 32

Para detectar una proteína específica

Question 33

Pasos para el southern blot

Answer 33

1. Aísla DNA 2. Enzimas de restricción 3. Electroforesis 4. Se desnaturaliza DNA 5. Papel filtro de nitrocelulosa 6. Hibridación

Question 34

Aplicación de la Transcriptasa reversa

Answer 34

Detecta virus y su carga viral