Méthodes d'étude Flashcards
(39 cards)
def tissus et les nommer
ensemble coopératif de cellules + MEC (SF + fibres)
il y a 5 tissus fondamentaux:
1) épithéliums de revêtement et glandulaires
2) tissus conjonctifs et squelettiques
3) cellules sanguines et hématopoïétiques
4) tissus musculaires
5) tissus nerveux
organes
organe = ensemble de tissus
regroupement des organes en appareils et en systèmes:
-appareil cardio-vasculaire
-système immunitaire
-appareil respiratoire
-appareil digestif
-système nerveux
-système endocrinien
-appareil urinaire
-appareil tégumentaire
-organes des sens
taille cellule
5 à 20μm
pouvoir séparateur
distance la plus petite entre 2 points vus séparément
-oeil: 0,2mm
-MO: 0,2μm
-ME : 0,2nm
quelle technique pour description morphologique des structures biologiques?
-MO : source lumineuse = faisceau de photons
-ME : source lumineause = faisceau d’électrons
étapes de la préparation des échantillons pour examen en MO
1) fixation
2) inclusion
3) coupe = microtomie
4) coloration
5) montage
fixation en MO
! donner les fixateurs
-pour préserver les structures biologiques
-le + rapidement après EXERESE
-petits blocs d’organes immergés dans un grand volume de liquide fixateur
–> fixateurs: acide acétique - méthanol/paraformaldéhyde/liquide de Bouin (formol + acide acétique) (! fluorescence)
inclusion en MO
-pour durcir l’échantillon pr qu’on le coupe
-après DESHYDRATATION dans des BAINS D’ALCOOL DE DEGRE CROISSANT ou de TOLUENE
-dans de la RESINE FOUDUE A 56° (parfois résines plastiques ou congélation dans N2L)
coupe
=microtomie
-coupes fines : 2 à 3 μm
-avec un MICROTOME (avance mécanique et couteau en acier)
-déposées et collées sur des lames de verre
-coupes en congélation avec un CRYOSTAT
coloration en MO
-pour augmenter les contrastes et faire apparître les différents composants
-après DEPARAFFINAGE (par la CHALEUR et des BAINS DE TOLUENE)
-et REHYDRATATION (BAIN D’ALCOOL DE DEGRE CROISSANT et EAU DISTILLEE)
montage
-après coloration puis DESHYDRATATION (BAIN D’ALCOOL DE DEGRE CROISSANT puis de TOLUENE)
-coupes montées entre lame et lamelles
-avec milieu de montage (RESINE SYNTHETIQUE) (indice de réfraction voisin de celui du verre)
colorants en phase aqueuse les + utilisés
-colorants acides ou basiques
-Hématéine-Eosine (HE)
-Hématéine-Eosine-Safren (HES)
-Trichrome de Masson
-May Grünwald Giemsa
colorants acide et basique
fixation des colorants quite à la reconnaissance de structures particulières
-colorant basique acidophile: fixation au niveau des noyaux où se trouve l’ADN
-colorant acide basophile: fixation au nv du cytoplasme où se trouve des strcutures plutôt basiques
hématéine-éosine-safran
hématéine: colorant basique qui colore noyaux en violet
éosine: colorant acide qui colore cytoplasme en rose
safran: colore fibre de collagène en jaune
trichrome de masson
-HEMATOXYLINE: noyaux en brun
-FUCHSINE ACIDE: cytoplasme en rouge
-VERT LUMIERE : fibres de collagène en vert
quelle coloration pour les cellules sanguines?
May Grünwald Giemsa
fibres de collagène en jaune
safran
noyaux en brun
hématoxyline (trichrome de masson)
cytoplasme en rouge
fuchsine acide (trichrome de Masson)
fibres de collagène en vert
vert lumière (trichrome de Masson)
noyaux en violet
hématéine (colorant basique)
cytoplasme en rose
éosine (colorant acide)
composés du MO standard
__partie mécanique avec
-potence
-tube optique
-platine
__source de lumière photonique
__partie optique avec
-oculaire
-objectif
-condenseur
les 2 types de MO et leur diff
-à contraste de phase:
met en évidence les différents indices de réfraction
en révélant des différences de phases de la lumière
cellules vivantes même non colorées
-à flurorescence:
source lumineuse avec une sélection de la longueur d’onde d’excitation
et filtres pour sélection de la longueur d’onde d’émission
