Métodos De Estudo Da Histologia Flashcards
Definir o que é histologia e qual o seu objetivo.
É a ciência que estuda os tecidos do corpo (formados por células e matriz extracelular - MEC) objetivando entender como estas estruturas se organizam para construir os órgãos e os sistemas.
Porque a histologia é dependente do uso de microscópio?
Devido ao tamanho reduzido das células e dos componentes da MEC, impossibilitando a observação a olho nu.
O que é um microscópio?
É um equipamento que permite a ampliação das amostras analisadas possibilitando observar detalhes impossíveis de serem vistos a olho desarmado.
Defina poder de resolução. Diferencie de poder de aumento.
Menor distância entre duas partículas ou entre duas linhas a qual permite que elas sejam vistas como dois objetos separados. O poder de aumento é a capacidade de aproximação da imagem analisada
Como um plano de corte deve ser interpretado a partir de suas dimensões?
Quando um plano de corte é observado ao microscópio, sempre se deve imaginar que algo pode
estar faltando à frente ou atrás daquele corte, uma vez que muitas estruturas são mais espessas
que o corte. Os componentes de um tecido ou órgão são geralmente seccionados ao acaso,
fazendo necessária a visualização espacial que aquele corte ocupa na organização do
tecido/órgão.
Como a imagem se forma na microscopia de luz/óptica? Porque a necessidade do corte delgado do micrótomo? Como é calculado o poder de aumento de um microscópio de luz?
Imagem é formada a partir de iluminação que atravessa o espécime de baixo para cima, daí a importância de que a amostra seja o mais fina possível. O poder de aumento é o produto entre o aumento da lente objetiva utilizada e da lente ocular.
Quais e quantas são as partes mecânicas de um microscópio de luz?
7 partes
1. Base
2. Micro/Macrométrico
3. Charriot
4. Platina ou Bandeja
5. Revólver
6. Braço
7. Tubo
Quais e quantas são as partes ópticas do microscópio de luz?
Lente ocular
Lente objetiva
Lente condensadora
O que é processamento histológico?
É o conjunto de procedimentos técnicos divididos em etapas sequenciais no preparo da amostra de um tecido
a
ser analisada em um microscópio.
Cite e explique as etapas de preparação e seus respectivos materiais utilizados em uma amostra a ser examinada por microscopia de luz.
Etapa 1: Fixação - Responsável por preservar a morfologia e a composição dos tecidos, evitar autólise e endurecer as amostras por meio do paraformaldeido e do glutaraldeído.
Etapa 2: Desidratação - Remove a água dos tecidos por meio do álcool ou acetona.
Etapa 3: Clarificação - responsável por remover o álcool utilizado anteriormente dos tecidos, feita por meio do xilol.
Etapa 4: Infiltração - penetração da parafina líquida
Etapa 5: Inclusão - parafina proporciona consistência rígida para a amostra : obtenção do BLOCO
Etapa 6: Microtomia - utilização de lâminas de aço para o corte delgado das peças infiltradas.
Etapa 7: Hidratação - adicionar água aos tecidos
Etapa 8 : Coloração - faz uso de diferentes corantes para evidenciar os componentes dos tecidos
Etapa 9: Desidratação - remoção da água dos tecidos por meio de álcool ou acetona.
Etapa 10: Montagem - torna a lâmina permanente por meio de entelan, permount ou bálsamo do Canadá
Porque se faz necessária a etapa de clarificação durante a preparação de amostras? Como funciona essa etapa?
Após o processo de desidratação, é necessário substituir o álcool contido no tecido, para isso, é utilizado um solvente geralmente orgânico, como o xilol e o toluol (anfifílicos), que são miscíveis tanto em etanol como no meio de inclusão (parafina).
Quando os fragmentos de tecido são embebidos no solvente eles se tornam translúcidos e depois, quando mergulhados na parafina derretida, o solvente evapora e dá lugar para a parafina.
Diferencie a coloração histológica da histoquímica.
Na coloração histológica, faz- se uso dos corantes para se evidenciar a morfologia da amostra, já na coloração histoquímica o corante evidencia as estruturas por meio da caracterização química dos componentes da amostra.
Dê um exemplo de coloração histoquímica.
Utilização do PAS (ácido periódico-schiff) para identificar o glicogênio presente no fígado. A combinação do PAS e estruturas ricas em açúcar gera uma reação quimica cujo produto possui coloração magenta/roxo.
Qual a principal técnica de coloração histologica? Explique seu funcionamento.
Coloração HE que utiliza a combinação hematoxilina e eosina. A hematoxilina (corante básico) identifica estruturas de caráter ácido (basófilas) como o núcleo, acidos nucleicos e o RER. Já a eosina (corante ácido) identifica estruturas de caráter básico (acidófilas/eosinófilas) como o citoplasma e as fibras de colágeno.
O que são artefatos técnicos? Exemplifique.
São alterações das imagens quando as amostras são observadas ao microscópio. Exemplos são as dobras, os fios, a autólise, a separação, o rasgo e a presença de bolhas.
