MÉTODOS DE ESTUDO EM PATOLOGIA Flashcards
(17 cards)
histopatologia
Exames anatomopatológicos com necessidade de
uma técnica para remover o fragmento;
Biópsia é o ato cirúrgico
amostra
incisional-remoçao parcial da lesao/ fragmento
excisional-remoção da lesao
outros tipos de amostra
curetagens endoscópicas, por agulha, trepanação guiadas
fixador formaldeído a 4%
biópsia líquida
Material: sangue, urina e outros fluidos
corporais.
Procura-se: fragmentos de DNA
tumoral (DNA tumoral circulante);
É uma alternativa nos casos em que
não há mais tecido tumoral disponível
para a realização dos testes;
histoqímica
Métodos utilizados para localizar diferentes
substâncias nos cortes de tecidos provenientes
de uma amostra;
Reações químicas específicas ou interação
macromolecular de alta afinidade;
macroscópio
Resultam de tratamento cirúrgico de
diversas doenças neoplásicas ou não.
Definir características macroscópicas;
Podem ser simples (ex: retirada da vesícula
biliar) ou compostas/radicais (peça
ressecada que além do órgão, linfonodos,
tecidos adjacentes e outros componentes).
Necropsia
Exame post mortem
Tipos:
Médico-científico;
Médico-legal (causa mortis): quando
é obrigatório realizar para definição
da causa da morte. Utilizado
principalmente em casos de morte
violenta.
imunohistoquimica
técnicas em que se utiliza anticorpos como
reagentes específicos capazes de identificar e
estabelecer ligação de constituintes teciduais, que irão
funcionar como antígenos;
Reação imunológica anticorpo-antígeno para a
detecção e caracterização de moléculas no seu lugar de
origem;
Permite situar e identificar a presença de variadas
substâncias nas células e tecidos por intermédio da cor.
imunofluorescencia
Utiliza moléculas para marcação e visualização do
antígeno;
Uso limitado:
Necessidade de um microscópio específico
(M. de Fluorescência);
Moléculas fluorescentes (fluorocromos) que
perdem a sua atividade mais rápida,
dificultando o arquivamento de lâminas;
Fluoresceína - verde;
Rodamina - laranja/vermelho;
Texas red - vermelho;
Geralmente usa-se corte por congelação.
imunoenzimatica
Utiliza enzimas para visualização do antígeno;
Pode ser visualizada em microscópio óptico
comum e as
lâminas podem ser armazenadas para nova
visualização.
Cromógeno mais usado é o DAB
(diaminobenzidina tetrahidrocloreto)
- Coloração castanho-bronze
cultura celular
manuntenção e multiplicação invitro de celulas vivas
necessita de um meio de cultura rico em substancia essenciais
aplicações
analise do metabolismo e do comportamento celular
teste de agentes moduladores na regulaçao
tecnicas em biologia molecular
Permitem diagnósticos cada vez mais precoces e
precisos;
Visam detectar moléculas (proteínas e ácidos
nucléicos) constitutivos ou anormais responsáveis por
uma doença;
Marcadores:
Diagnóstico;
Prognóstico;
Preditivos
obtencao de amostras
Requisitos para análise molecular:
Manter as macromoléculas intactas;
Preservar a morfologia das células e tecidos
(congelamento);
Digerir tecidos ou células e separar os ácidos dos
demais constituintes celulares (extração com
solventes orgânicos - kits)
Ex: DNA
reação em cadeia da polimerase
Reação de amplificação in vitro de sequências
específicas de DNA;
Termociclador - ciclos sucessivos com controle
de temperatura em função do tempo.
aplicações da pcr
Detecção da presença de sequências de ácidos nucléicos virais,
bacterianos ou de parasitos em amostras biológicas com alta
sensibilidade;
Identificação de alterações genômicas e presença de RNAm
(diagnóstico do câncer ou doenças geneticamente transmissíveis);
Análise de polimorfismos genéticos.
rt- pcr
Quando se deseja amplificar o RNA, precisa
primeiro converter em cDNA (DNA
complementar) pela enzima transcritase reversa
(RT).
A partir do cDNA, a amplificação se faz como
descrito na técnica de PCR.
