Microscopes Flashcards

(168 cards)

1
Q

Vrai ou Faux: Les principes physiques des microscopes photoniques et électriques sont les mêmes.

A

Vrai

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Q

Quelle est la raison de la différence entre le grossissement du microscope photonique et celui du microscope électrique?

A

La longueur d’onde du microscope électronique est plus faible, pcq les électrons ont une longueur d’onde plus faible que celle des photons

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3
Q

Quel est le rôle du condensateur?

A

Concentrer la lumière sur l’échantillon

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4
Q

Quels sont les limites du microscope photonique?

A

La limite de résolution.
Le contraste.

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5
Q

Par quelle formule la limite de résolution est-elle calculée?

A

L.R. = longueur d’onde / 2.n.Sin(teta)

n = indice de réfraction du milieu (entre l’échantillon et l’objectif).
teta = moitié de l’angle du cone de lumière entrant dans l’objectif.

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6
Q

Que veut dire ouverture numérique (NA)?

A

NA = n.Sin(teta)

Elle est normalement indiquée sur l’objectif.

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7
Q

Qu’arrive t il si l’on diminue la longueur d’onde dans une observation au microscope photonique?

A

la limite de résolution diminue, la qualité de l’observation augmente.

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8
Q

les rayons UV, quelle lentille peuvent ils traverser?

A

La lentille formée de Quartz

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9
Q

les rayons UV, quelle lentille ne peuvent ils pas traverser?

A

Le verre

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10
Q

Quelle sont les limites d’utilisation de rayons UV dans un microscope?

A
  • Le verre est opaque aux UV, il faut utiliser des lentilles de Quartz, ce qui est trop couteux.
  • Les UV sont à l’extérieur du visible. Il faut faire une transformation optique pour pouvoir observer.
  • Question de sécurité.
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11
Q

L’huile à immersion, augmente ou diminue la limite de résolution?

A

Diminue

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12
Q

Qu’arrive il à la limite de résolution (augmente ou diminue) si l’objectif est plus long?

A

objectif plus long = distance entre objectif et échantillon diminue = angle teta plus grand = sinus plus grand = limite de résolution diminue.

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13
Q

Qui a amélioré le microscope à fond clair?

A

Kohler

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14
Q

Quels sont les désavantages de la microscopie à fond clair?

A

1- Peu de contraste si l’on ne fait pas de colorations.
2- Difficile de voir les petits microorganismes.

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15
Q

Est-ce que le microscope à fond clair permet de voir l’intérieur d’une cellule?

A

Oui

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16
Q

Que peut on voir dans la préparation à l’état frais? (fond clair)

A

1-On voit la motilité
2- on voit la morphologie
3- on peut voir les axes de division cellulaire (protozoaires)
4- on voit les corps d’inclusion

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17
Q

Quels sont les désavantages de la préparation à l’état frais? (fond clair)

A

1- le contraste est très faible
2- les petits microorganismes ne peuvent pas être observés

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18
Q

Quels sont les 2 groupes de coloration qu’on peut faire pour la microscopie à fond clair?

A
  • coloration simple
  • coloration différentielle
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19
Q

Quels sont les 2 techniques de coloration différentielle qu’on peut faire pour la microscopie à fond clair?

A

Gram
AAR (alcoolo-acido-resistent)

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20
Q

Quelle est la charge de la coloration simple

A

positive (la plupart des microorganismes ont des surfaces chargées négativement).

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21
Q

À quoi sert la coloration de Gram

A

Permet de distinguer différents groupes de bactéries, structure membranaire, distinguer les structures à l’intérieur, etc.

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22
Q

À quoi sert la coloration AAR

A

à détecter les mycobactéries, disgnostiquer des maladies (comme tuberculose).

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23
Q

Qui a inventé la coloration AAR

A

Ziehl et Neelsen

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24
Q

Quel agent est retenu par les mycobactéries dans la coloration AAR?

A

le Carbol-Fuchsine

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25
Quels sont les autres microscopes optiques?
- à fond noir - à contraste de phase - à contraste d'interférence différentielle - à fluorescence
26
Quelle est la différence dans l'image des microscopes à fond clair vs à fond noir
- fond clair: structure sombre, fond clair - fond noir: structure claire, fond noir
27
Dans quels compartiments le microscope à fond noir diffère?
Le condensateur contient un Cône de Abbe et des miroirs
28
Comment agit la lumière en microscopie à fond noir?
la lumière est dirigée sur l'échantillon grace au cone de abbe et des miroirs, donc la lumière arrive de manière oblique sur l'échantillon.
29
Ex: Dans une image, on ne voit que du noir, rien n'apparait. Quelle est la raison?
il n'y a pas d'échantillon. en microscopie à fond noir, on voit seulement la lumière déviée par l'échantilon. Donc pas de lumière déviée = pas d'échantillon
30
Vrai ou Faux les organismes sont morts dans la microscopie à fond noir.
Faux on ne fait ni fixation ni coloration
31
Vrai ou faux le microscope à contraste de phase a la même du extérieur d'un microscope à fond clair
Vrai
32
Dans quels compartiments le microscope à contraste de phase diffère?
Condensateur et Objectif le condensateur contient un anneau de phase l'objectif contient une lame de phase
33
Comment agit la lumière en microscopie à contraste de phase?
il y a une mise en phase de la lumière. l'échantillon réfracter la lumière, et c'est la différence de phase qui montre une image.
34
Quels est le role de la lame de phase?
augmente ou diminue la différence de phase entre les structures, donc augmente le constraste
35
qui a développé le microscope à contraste de phase
Zernike
36
Quelle type d'image on voit dans contraste de phase?
image sombre sur fond clair
37
Comment peut on voir des images colorés en contraste de phase si on ne colore pas la structure?
on utilise des filtres colorants
38
Vrai ou faux les cellules dans contraste de phase sont vivantes
Vrai
39
Qu'est ce qui distingue une image par contraste de phase des autres microscopes?
la structure est entourée d'un couche lumineuse, appelée halo de phase.
40
qui a développé le microscope à contraste d'inteférence différentielle?
Nomarski
41
que subit la lumière dans la microscopie à contraste d'inteférence différentielle?
La lumière est polarisée à angle variable
42
Qu'arrive t il à la lumière polarisée lorsqu'elle touche l'échantillon dans l'interférence différentielle?
Les structures causent une modification de polarisation, ce qui génère l'image
43
Qu'est ce qui distingue une image par interférence différentielle des autres microscopes?
- Image vive (couleurs vives) - Impression de 3D - Ombre dans les creux/derrière la cellule, comme si l'échantillon est éclairé d'un seul coté.
44
Comment modifier la lumière sans agir sur la phase de la lumière?
on polarise la lumière (donc on fait une microscopie interférence différentielle)
45
Quelle est la différence dans les compartiment d'un microscope interférence différentielle vs contraste de phase?
Condensateur: l'interférence requiert un système de lentilles qui polarisent la lumière, controlé par informatique.
46
interférence différentielle vs fond clair?
- cellules vivantes (i.d.) vs cellules mortes (f.c.) - permet de montrer des structures fines (i.d.) vs non (f.c.) - montre les structures internes bcp plus clairement (i.d.)
47
Quelle est la limite de l'interférence différentielle?
Les préparation transparentes. La lumière polarisée doit être capable de passer.
48
Quels microscopes photoniques se ressemblent de l'extérieur?
fond clair, fond noir et contraste de phase.
49
Peut on utiliser l'UV dans les microscopes photoniques?
Oui, microscope à épifluorescence et à fluorescence
50
quelle est la différence entre le microscope à épifluorescence et le microscope à fluorescence?
Épifluorescence: la source de rayons UV n'est pas en bas, elle ne peut pas affecter l'oeil, donc plus de sécurité.
51
Quelles particules sont utilisés dans la microscopie fluorescence
les fluorochromes
52
que font les fluorochromes?
ils absorbent l'énergie lumineuse en UV et émettent dans le visible.
53
quelle portion du spectre est considérée UV?
280 nm à 400 nm
54
Quel compartiment est utilisé pour protéger l'oeil de tout rayon UV?
des filtres séléctifs bloquant les rayons UV.
55
comment s'appelle la lentille utilisée dans le microscope fluorescence?
miroir dichroique: réfléchit les UV, mais laisse passé les lumières du visible
56
Quelle lame laisse passer les UV
Quartz
57
Quels sont les applications du microscope à fluorescence?
- Fluorochromes vitaux - Immunofluorescence - FISH
58
À quoi servent les fluorochromes vitaux.
Permettent de distinguer et quantifier les cellules vivantes vs mortes
59
En utilisant les fluorochromes vitaux, quelle cellule (vivante ou morte) émet une fluorescence, et laquelle qui n'émet pas? et pourquoi?
- Cellule vivante: pas de fluorescence, car membrane séléctive, ne laisse pas passer les fluorochromes. - Cellule morte: fluorescence, car membrane imperméable, laisse passer les fluorochromes.
60
- Quelle technique fait intervenir des morceaux d'ADN? - Quelle technique fait intervenir des anticorps?
- FISH - Immunofluorescence?
61
Quel est le principe de l'immunofluorescence?
anticorps couplés à des fluorochromes, qui détectent une protéine membranaire ou cytoplasmique (antigène)
62
Que peut détecter l'immunofluorescence?
des protéines ou des organismes (ayant une protéine membranaire spécifique à elle)
63
Vrai ou faux Lorsqu'on veut détecter un virus par immunofluorescence et on le cible avec un anticorps, les structures fluorescentes sont des virus.
Faux. Le virus est trop petit pour être vu en microscopie photonique. Les structures fluorescentes sont des cellules infectés par le virus, et non pas le virus-même.
64
Vrai ou faux on peut parfois voir une fluorescence qui n'est que des anticorps dans le milieu et qui n'ont pas reconnu un antigène précis.
Faux les anticorps qui ne reconnaissent pas des antigènes vont être éliminés.
65
Que veut dire hybridation
appariement d'une molécule d'ADN avec une autre molécule d'ADN ayant une séquence complémentaire.
66
À quoi sert la technique FISH
détecter et quantifier une espèce spécifique.
67
quelles sont les limites de FISH
- peut prendre des années, car la séquence d'ADN utilisée doit être spécifique à l'espèce cible, or bcp d'autres espèces peuvent avoir la même séquence.
68
Comment peut on avoir des faux positifs dans la technique FISH?
si 2 espèce ont la même séquence d'ADN, et qu'on utilise cette séquence pour détecter l'espèce, on peut avoir détecté l'autre espèce et penser que c'est espèce désirée.
69
Pourquoi peut on faire un vrai diagnostique avec l'immunofluorescence alors qu'on ne peut pas avec FISH
FISH permet de détecter des séquence d'ADN, alors que l'immunofluorescence permet de détecter un vrai pathogène présent, pas seulement de l'ADN qui peut ne pas être exprimé.
70
Quelle est la limite de l'immunofluorescence?
la sensibilité des anticorps. chaque anticorps a ses propres propriétés.
71
Qui a inventé le microscope électronique? et quelle année?
Ruska - 1931
72
En quoi le microscope électronique est mieux que optique?
- Pouvoir d'agrandissement bcp plus fort - Limite de résolution bcp plus faible
73
Quelle est le pouvoir d'agrandissement d'un microscope électronique standard? vs microscope photonique
400 000x vs 1000x
74
Quelle est la limite de résolution d'un microscope électronique standard? vs microscope photonique
0.05 nm vs 0.1 um
75
quelle est la longueur d'onde d'un électron vs photon?
5 x 10(-12) m (ordre des picomètres) vs 5 x 10(-7) m (micro-nano)
76
les composantes du microscope optique vs photonique, similaires?
non, totalement différents
77
de quoi sont formés les systèmes de lentilles des microscopes électroniques (condensateur, objectif, oculaire).
de électro-aimants (lentilles magnétiques)
78
Comment peut on voir les électrons si on ne peut pas les visualiser dans le spectre du visible?
le microscope contient des détecteurs numériques d'électrons.
79
Quelles sont les limites du microscope électronique?
- Les électrons voyagent dans le vide. - Les électrons sont non pénétrant (ne traversent pas l'échantillon). - Le matériel vivant n'est pas électron dense (n'absorbe pas les e-, donc pas de contraste)
80
Quels sont les implications du fait que les e- voyagent dans le vide?
- L'intérieur du microscope électronique est du vide (pression très négative exercée). - Les échantillons ne peuvent pas vivre dans le vide. Donc structures mortes.
81
Quels sont les implications du fait que les e- sont non pénétrant?
Ils faut faire des coupes ultra-fines pour permettre aux électrons de pénétrer.
82
1- Quels sont les implications des coupes ultra-fines qui permettent aux électrons de pénétrer dans l'échantillon? 2- Comment minimiser les implications?
1- On a certainement des altérations à l'échantillon. c'est difficile de maintenir la même structure en la coupant. 2- Il faut imprégner les cellules avant de les couper: remplir la structure (les pores et creux) avec une substance liquide qui conserve la forme originale de l'échantillon.
83
Vrai ou Faux le microscope optique montre des échantillons vivants
Faux
84
Quels sont les implications du fait que les le matériel vivant n'est pas électron dense?
Pas de contraste. Le matériel vivant n'absorbe pas les électrons, donc pas de différence entre échantillon et environnement, donc pas de contraste.
85
Comment régler le manque de contraste dans le microscope électronique?
Faire des techniques de "coloration" ou de préparation de l'échantillon
86
Vrai ou Faux On ne peut pas colorer l'échantillon du microscope électronique pour voir des couleurs sur l'écran
Vrai L'échantillon du microscope électronique n'est pas coloré, et les techniques de préparation ne donnent pas des "couleurs" à l'échantillon. Les couleurs qu'on voit sur l'écran sont ajoutés par informatique.
87
Quelles sont les technique de "coloration" ou préparation du microscope électronique?
- Technique de l'ombrage - Coloration négative - Cryodécapage - Immunolocalisation spécialisée
88
Quelle est la technique qui implique de congeler l'échantillon?
Le cryodécapage
89
Quelle technique donne une ombre?
L'ombrage
90
Qu'est ce qu'on utilise dans l'ombrage pour "colorer" l'échantillon
On vaporise des métaux qui vont couvrir l'échantillon.
91
Pourquoi la technique d'ombrage projette une ombre?
Car on vaporise ls métaux selon un angle précis. Donc des parties derrière l'échantillon ne seront pas couvertes, donc pas détectées. c'est la partie ombre (blanche ou claire).
92
Quelle est l'étape après la vaporisation de métaux dans la technique d'ombrage?
On se sert de billes témoins de taille connues, qui viennent combler les ombres et les comparer.
93
À quoi servent les billes témoin dans la technique d'ombrage?
Ces billes viennent combler les ombres et les comparer, et déterminer alors l'élévation (la hauteur) de l'échantillon, donc le diamètre de la structure.
94
Quel agent est utilisé dans la coloration négative?
l'acide phosphoriquetungstique
95
Comment agit l'acide phosphoriquetungstique dans la coloration négative?
Il se dépose et s'accumule dans les creux de la structure, et détermine alors une différence de "couleur" entre creux et protubérant (bumps).
96
Comment paraissent les creux et les protubérances sur l'écran en coloration négative (clair, sombre)?
Les creux pleins dacide phosphoriquetungstique sont sombres. Les protubérances (bumps) sont clairs.
97
Vrai ou faux la "coloration" négative permet d'avoir un effet relief (kind of 3D)
Vrai
98
Est-ce que la coloration négative montre un ombre?
oui, à cause des creux à l'entour de la structure, l'acide phosphotungstique s'accumule et on aura un ombre qui entoure la structure
99
Comparer l'ombre de la technique d'ombrage vs coloration négative
l'ombrage crée une ombre grace à l'angle avec lequel on vaporise les métaux, c'est donc une ombre partielle (une partie). Alors que la coloration négative forme une ombre tout à l'entour de la structure (creux tout à l'entour remplis d'acide phosphotungstique).
100
Quelle structure est la plus observée en utilisant la coloration négative?
Les virus.
101
Pourquoi congeler l'échantillon dans le cryodécapage?
Pour ensuite faire une coupe transversale par pression latérale
102
Comment doit être le processus de congélation dans le cryodécapage?
il doit être rapide et brève, pour ne pas endommager les structures.
103
Après avoir coupé l'échantillon dans le cryodécapage, que feut on?
On fait un ombrage, donc vaporise des métaux sur la coupe transversale.
104
Dans une image d'une structure colorée par cryodécapage, quelle est la "couleur" des creux et protubérances?
creux = clair (ombre claire) bump = sombre On peut utiliser le négatif de cette image, donc inverser les "couleurs" par informatique pour faciliter la lecture.
105
Vrai ou faux la technique d'ombrage permet de voir l'intérieur de la cellule.
faux
106
Vrai ou faux la coloration négative permet de voir l'intérieur de la cellule.
faux
107
Quelle technique de "coloration" ou préparation d'échantillon du microscope électronique permet de voir l'intérieur de la cellule?
le cryodécapage
108
Vrai ou faux la technique d'ombrage permet d'avoir une impression relief (pseudo-3D).
faux
109
Vrai ou faux la coloration négative permet d'avoir une impression relief (pseudo-3D).
Vrai
110
Vrai ou faux le cryodécapage permet d'avoir une impression relief (pseudo-3D).
Faux
111
Quelle technique de coloration (a)? pourquoi Quelle technique de coloration (b)? pourquoi
1- coloration négative ombre qui entoure l'échantillon. protubérances clairs et creux sombres. pas de vue intérieure. 2- ombrage partie du contour est ombré. une partie est claire, comme si éclairage oblique. pas de vue intérieure.
112
Quelle technique de "coloration" ou préparation utilise des anticorps?
l'immunolocalisation cellulaire.
113
à quoi sont couplés les anticorps dans l'immunolocalisation cellulaire?
à des billes de Fer ou d'Or.
114
À quoi sert l'immunolocalisation cellulaire?
à localiser des protéines, structures, molécules dans la cellule (donc même chose que immunofluorescence mais pour microscope électronique).
115
que voit on sur l'image lorsqu'une protéine est détectée
On voit des billes noires (qui sont couplés à l'anticorps qui a détecté la protéine).
116
Quels sont les 2 types de microscopes électroniques?
- microscope à transmission. - microscope de balayage.
117
Dans quel type de microscope électronique les électrons traversent l'échantillon?
microscope à transmission
118
où est situé le détecteur d'électrons dans la microscopie à transmission?
sous l'échantillon, pour détecter les électrons qui traversent la structure.
119
Vrai ou faux dans la microscopie à transmission, on obtient une image par transparence.
Vrai e- traversent l'échantillon
120
Quel microscope a la limite de résolution la plus faible?
le microscope à transmission.
121
Quel est le microscope le plus récent: transmission ou balayage?
microscope à balayage
122
Vrai ou faux le microscope électronique à balayage montre l'intérieur de la cellule
Faux
123
Vrai ou faux dans le microscopie à balayage, les électrons ne traversent pas l'échantillon
vrai
124
Où est placé le détecteur d'électrons du microscope à balayage?
le détecteur est latéral. pas sous l'échantillon
125
Quel est le traject des électrons dans la microscopie à balayage?
ils sont réfléchis par l'échantillon puis captés par le détecteur d'électrons qui est du coté, pas en dessous.
126
Vrai ou faux dans le microscopie à balayage, on obtient une image par transparence.
faux
127
Vrai ou faux dans le microscopie à balayage, on ne peut pas voir l'intérieur de la cellule.
vrai
128
Vrai ou faux dans le microscopie à balayage, on obtient une image à effet 3D.
vrai
129
à quoi ressemble la limite de résolution du microscope à balayage si l'on compare au microscope à transmission? pourquoi?
la limite de résolution du microscope à balayage est plus grande que celle de transmission. car la longueur d'onde des e- réfléchis est plus grande que celle des e- qui traversent.
130
que veut dire TEM
microscope électronique à transmission
131
que veut dire SEM
miscroscope électronique à balayage (scanning)
132
Quels sont les microscopes électroniques dans lesquels on travaille à très basse température?
cryoélectromicroscopie et cryotomographie électrique
133
que veut dire cryoEM
cryoélectromicroscopie
134
que veut dire cryoET
cryotomographie électrique
135
Pourquoi dans la cryoélectromicroscopie on congèle l'échantillon de façon rapide?
Pour que l'eau n'altère pas les échantillons en congelant. On veut une vitrification de l'eau.
136
Pour quoi est utilisée la cryoélectromicroscopie?
Pour la modélisation des structures protéique. C'est trop détaillé et ça aide.
137
Cryomicroscopie vs microscopie à transmission?
la CryoEM est bcp plus détaillée, dans les structures des membrane par exemple.
138
que veut dire "tomo"
strates ou tranches
139
Vrai ou faux la cryotomographie électronique produit des images de strates en faisant des coupes transversales d'une structure cellulaire
Faux on ne fait pas de coupes dans la CryoET. Elle donne l'image des tranches sans coupes.
140
Vrai ou faux La cryoET donne des images finales 3D.
Vrai la reconstruction de toutes les images de couches par informatique fait une image finale 3D.
141
À quoi sert la CryoET le plus?
localiser des mauvais fonctionnements, des tumeurs etc.
142
De quel type est le microscope à balayage laser?
microscope photonique
143
Le microscope à balayage laser est une amélioration du microscope ...
à fluorescence
144
Vrai ou faux Le microscope à balayage laser utilise une lumière UV
Vrai
145
Vrai ou faux la fluorescence n'est captée seulement au plan qui est au foyer
Vrai
146
dans balayage laser, est-ce qu'il y a une fluorescence autre que dans le plan du foyer
oui, mais cette fluorescence n'est pas captée
147
Quelle composante empêche la fluorescence des plans hors foyer d'être exprimés dans l'image?
c'est un système d'ouverture, qui bloque les rayons venant hors du foyer.
148
Le balayage laser permet d'augmenter le contraste et la diminution de l'interférence. expliquer comment
en bloquant les fluorescences hors du foyer, l'interférence entre les plans est éliminée, et le contraste est bcp plus fort et définit, car le contraste est la capacité à distinguer une structure de son environnement.
149
Dans quels dimensions le balayage laser permet de donner des images?
en 2D, en 3D et en 4D (temps)
150
que veut dire image 4D dans balayage laser?
C'est le développement d'un échantillon 3D en fonction du temps.
151
En quoi diffère le balayage laser à l'épifluorescence?
le balayage laser a des systèmes de numérisation, de reconstitution d'image 3D et de quantification.
152
Quel est le meilleur microscope pour analyser le développement du Biofilm en fonction du temps?
Microscopie à balayage laser
153
Qu'est ce qu'un biofilm?
Un biofilm est une communauté multicellulaire plus ou moins complexe, souvent symbiotique, de micro-organismes
154
Vrai ou faux Le balayage laser permet de détecter les cellules vivantes vs mortes.
Vrai positionnement des noyaux, leur activité métabolique (donc si vivant ou mort).
155
Quels sont les 2 microscopes à balayage de sonde?
- à effet tunnel - à pression atomique
156
de quoi est principalement formé le microscope à effet tunnel?
sonde qui se termine souvent d'un seul atome.
157
la sonde d'un microscope à effet tunnel se promène en dessus d'un échantillon. 1- touche/ne touche pas? 2- distance égale/variable? 3- hauteur de la sonde change/ne change pas?
la sonde du microscope à effet tunnel se promène à une distance proche (mais touche pas) de l'échantillon. La hauteur de la sonde ne change pas, mais la distance avec l'échantillon change.
158
Un léger courant (voltage) est appliqué au microscope à effet tunnel. Quel est sont rôle?
la sonde du microscope à effet tunnel crée des interactions entre les électrons de la sonde et ceux d'une surface de l'échantillon. la variation de courant électrique est ce qui produit l'image.
159
Que peut être le grossissement du microscope à effet tunnel?
100 millions X
160
Vrai ou faux le microscope à effet tunnel est un microscope photonique
Faux (électrons, courant, etc)
161
Quelle est l'avantage du microscope à effet tunnel vs microscope électronique standard?
dans le microscope à effet tunnel on observe en milieu aqueux, on n'enlève pas l'eau (vs électronique), ce qui donne une réalité à la structure.
162
Vrai ou faux le microscope à balayage de sonde produit une image 3D
Vrai
163
Quel aspect important peut on observer par microscope à balayage de sonde?
les interactions entre des structures.
164
microscope à effet tunnel vs à force atomique?
Effet tunnel détecte les surfaces avec interaction entre e-, vs force atomique détecte avec un rayon laser qui balaye.
165
Quel type de surface est le mieux détecté par microscope à effet tunnel
les surfaces métalliques
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Quel type de surface est le mieux détecté par microscope à force atomique?
surfaces qui ne peuvent pas conduire l'électricité
167
lequel est lequel? tunnel ou atomique: 1 - Distance constante de hauteur varie? 2 - Distance varie et hauteur constante?
1- Force atomique 2- Effet tunnel
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Comment est formée l'image dans le microscope à force atomique?
un rayon laser est envoyé sur la pointe, et la deflexion de la lumière crée l'image 3D.