Microscopes Flashcards

1
Q

Qu’est-ce que ca veut dire quand un rayon est réfracté?

Qu’est-ce que l’indice de réfraction?

A

Il passe d’un milieu à un autre. Il est dévié à l’interface entre les deux milieux par rapport à sa direction d’incidence.
Indice de réfraction : combien un milieu ralentit la vitesse de la lumière.

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2
Q

La direction et l’angle de déviation sont déterminés par quoi?

A

Les indices de réfraction des deux milieux formant l’interface

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3
Q

Foyer?

Distance focale?

A

Foyer : Une lentille convexe focalise des rayons lumineux en un point spécifique, le foyer.
Distance focale : distance entre le centre de la lentille et le foyer.

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4
Q

La puissance d’une lentille dépend de quoi?

A

La distance focale

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5
Q

Types de microscopes optiques (5)

A
À fond noir
À fond clair
À contraste de phase
Confocal
À fluorescence
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6
Q

Microscopie à fond clair :

Observe êtres vivants ou non vivants?

A

Vivants

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7
Q

Microscopie à fond clair :

Qu’est-ce qui dévie les rayons lumineux?

A

Miroirs

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8
Q

Microscopie à fond clair :

Un ou plusieurs objectifs?

A

Plusieurs

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9
Q

Les microscopes compensateurs font quoi?

A

Produisent des images qui demeurent au focus quand on change l’objectif.

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10
Q

Le grossissement total : calculé par quoi?

A

multipliant le grossissement de l’objectif par celui de l’oculaire.

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11
Q

Résolution

A

Capacité d’une lentille à séparer ou distinguer des petits objets qui sont près l’un de l’autre, donc rend l’image plus nette

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12
Q

Longueur d’onde plus courte = Résolution _______

A

plus grande

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13
Q

Caractéristiques de l’huile à immersion

A

possède un indice de réfraction similaire à celui du verre. En substituant l’huile à l’air, il en résulte en une augmentation de l’ouverture numérique et de la résolution.

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14
Q

Distance de travail d’un objectif

A

La distance entre la surface antérieure de la lentille et la surface de la lame couvre-objet ou l’échantillon après une mise au point fine.

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15
Q

Microscope à fond noir :

Observe quelles sortes d’organismes?

A

Vivants, non colorés ou peu contrastés.

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16
Q

Le microscope à contraste de phase : transforme quoi?

A

Transforme de légères différences d’indice de réfraction et de densité cellulaire en différences d’intensité lumineuse observables.

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17
Q

Le microscope à contraste de phase : Observe quelle sorte d’organisme?

A

Cellules vivantes

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18
Q

Microscope confocal : utilise quelle sorte de rayon?

Caractéristique unique de ce microscope?

A
  • Laser

- Compile des images à différents points pour reconstruire une image 3D

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19
Q

Microscopie à fluorescence : éclaire échantillon avec quelles lumières(3)?

A

UV
Violette
Bleu

20
Q

Microscopie à fluorescence :

échantillons contrastés par quoi?

A

Fluorochrome

21
Q

Buts de préparation des échantillons (3)

A

Augmenter la visibilité

Accentuer les particularités morphologiques spécifiques

Préserver les échantillons en vue d’études ultérieures

22
Q

Définition de la fixation

A

Procédé par lequel les structures internes et externes des cellules et des organismes sont conservées et fixées en place.

23
Q

Deux sortes de fixation et explique

A

Fixation à la chaleur : conserve la morphologie générale mais pas les
structures intracellulaires (les détruits).
Fixation chimique : protège les structures cellulaires fines et la morphologie
de micro-organismes plus grands et plus délicats.

24
Q

Définition de la coloration

A

Rend les structures internes et externes de la cellule plus visibles en augmentant le contraste avec l’arrière-plan

25
Deux propriétés en communes à tous les colorants:
1. Possèdent des groupes chromophores (doubles liaisons conjuguées; donnent la couleur au colorant) 2. Peuvent se lier aux cellules par interaction ionique, covalente ou hydrophobe
26
Deux sortes de coloration
Coloration simple | Coloration différentielle
27
Coloration simple : | Deux sortes de colorants et différence entre les deux
Basiques : +, fixent à - | Acides : -, fixent à +
28
Deux exemples de coloration différentielle
Coloration de Gram | Coloration acido-alcoolo-résistante
29
Coloration acido-alcoolo-résistantes : utiles pour identifier quoi?
Espèces acido-alcoolo-résistantes du genre Mycobactérium
30
3 étapes de la coloration alcoolo-résistante
1. Chauffage avec un mélange de fuchsine basique + phénol (Méthode de Ziehl-Neelsen) 2. Décoloration (lavage) avec d’un mélange alcool-acide (les cellules acido-alcoolo résistantes vont rester rouges) 3. Contre-coloration: Bleu de méthylène. Les non acido-alcoolo résistantes apparaitront bleues
31
Pourquoi les cellules acido-alcoolo-résistantes ne sont pas facilement décolorés après lavage?
À cause du contenu en lipides très élevé de la paroi des organismes de ce genre
32
Coloration alcoolo-résistantes: | Quelles bactéries retienne le colorant?
Mycobactéries
33
3 exemples de colorations spécifiques (et explique)
1. Coloration négative (encre de chine ou nigrosine pour révéler les capsules) 2. Coloration des endospores (2 colorants, coloration de Shaeffer-Fulton) 3. Coloration des flagelles (épaissit flagelle avant le colorer)
34
Microscopie électronique : comment produire image?
Faisceau d'électrons
35
Microscopie électronique : Qu'est-ce qui crée une meilleure résolution?
Longueur d'onde d'un faisceau d'électron plus courte que celle de la lumière
36
Microscopie électronique : Différents outils (4)
Microscope électroniques à transmission (TEM) Microscope électronique à balayage La cryotomographie électronique La microscope à balayage de sondes
37
La microscopie électronique à transmission : Électrons font quoi? Faisceau d'électrons focalisé par quoi?
Électrons sont diffractés lorsqu'ils traversent l'échantillon Faisceau d'électrons est focalisé par des lentilles magnétiques pour former image visible
38
La microscopie électronique à transmission : | Comment apparaissent les régions sombres?
Régions plus épaisses de l'échantillon diffractent plus d'électrons
39
La microscopie électronique à transmission : | Nomme certains parties du microscope et un peu le trajet des électrons
- Filament de tungstène chauffé à blanc | - Canon à électrons génère faisceau qui est dirigé sur l'échantillon grâce au condenseur
40
La microscopie électronique à transmission : | Qu'est-ce qui permet une image nette?
La colonne contenant les lentilles et l'échantillon doit être sous vide.
41
Microscopie optique vs. TEM: Source de rayonnement Lentilles Image finale
``` -Source de rayonnement: Optique : Lumière TEM : Canon à électrons -Lentilles: Optique : Lentilles en verres convexes TEM : Lentilles magnétiques -Image finale: Optique : Oeil nu TEM : Écran ```
42
Préparation principale de TEM
Échantillon est coupé (mince) | Échantillons sont chimiquement fixés, déshydratés et souvent colorés à l'aide e produits opaques aux électrons
43
Deux autres méthodes de préparation d'échantillon à TEM
- Ombrage métallique (A): échantillon enduit d’une fine couche de métaux lourds - Cryodécapage (B): des échantillons congelés sont fracturés le long des lignes de plus grande fragilité (i.e., le milieu des membranes internes)
44
Microscopie électronique à balayage : comment produit une image? Quelle sorte d'image
À partir des électrons réfractés par la surface de l'objet plutôt qu'à partir des électrons transmis Image 3D de la surface du microoganisme
45
Cryotomographie électronique
Les échantillons sont plongés dans un liquide très froid et observés alors qu’ils sont encore congelés. Préserve l’état natif des structures cellulaires
46
Microscope à balayage de sonde : effet tunnel?
Balayent la surface d'un objet avec une sonde ponctuelle. | Permet de voir les atomes
47
Microscope à balayage de sonde : Microscope à force atomique?
Déplace une sonde à la surface d'un échantillon en maintenant la distance entre la pointe de la sonde et cette surface. Étudie les surfaces qui ne conduisent pas bien l'électricité.