Microscopia

Question 1

Robert Hooke

Answer 1

1635- 1703

Componentes básicos
1665- observó la célula

Question 2

Luz visible

Answer 2

490 - 780

Question 3

Refracción

Answer 3

Cambio de dirección de la luz a un medio de distinta densidad

Question 4

Imagen real

Answer 4

Amiplifica
Invierte
Captura en una pantalla

Question 5

Imagen virtual

Answer 5

Se amplifica
No se invierte
No se captura en pantalla

Question 6

Lentes del microscopio óptico

Answer 6

1. Condensador
2. Objetivo - imagen real
3. Ocular- imagen virtual

Question 7

Máxima capacidad de amplificación ( aumentos) de un objeto

Answer 7

2,500 X

Nota: una lupa o lente objetivo tiene 4X

Question 8

Campo claro

Answer 8

• características estructurales
• fondo : blanco
• muestras teñidas
• poco aumento

Question 9

Preparación muestras en campo claro

Answer 9

1. Cortes de 4 micras (1 mm = 1000 micras)
2. Sacar H2O de la muestra sólida
3. Reemplazar por cera
4. Enfriamiento
5. Rebanadas en porta objetos

Question 10

Campo oscuro

Answer 10

• Fondo: negro
• Poco aumento
• escaso contraste

Question 11

¿En que se basan los “principios de la microscopia”?

Answer 11

Radiación electromagnética
Partículas y ondas
Luz= fotones

Question 11

Campo claro - USOS

Answer 11

Muestras teñidas o de alto contraste

Question 12

Campo oscuro USOS

Answer 12

Bacterias
Protozoarios
Tejidos sin teñir
Cultivos celulares

Question 13

Contraste de fase

Answer 13

• anillos de fase
• luz atraviesa un cuerpo y la luz se hace lenta sobre la muestra
• imágenes con un halo luminoso

Ej: conteo de espermatozoides
15-40 millones/ml
Mediana 250 millones / eyaculacion

Question 14

Contraste de fases USOS

Answer 14

Escaso contraste - casi transparentes
Células vivas
Tiempo real

Question 15

Normansky

Answer 15

• primas de wollas
• polarización de la luz
• relieve/ repujado de células
• estructuras / superficie

Question 16

Normansky/ diferencial de interferencia USOS

Answer 16

Sin teñir
Gruesas
Apariencia seudo relieve

Question 17

Microscopía estereoscópica

Answer 17

La luz se emite por arriba y se refleja.
No atraviesa la muestra.
Cuerpos GRANDES y OPACOS

3D
Colores
No se invierte - cx

Question 18

Epifluorescencia USOS

Answer 18

Estructuras específicas mediante reacciones antígeno- anticuerpo

IHC

Question 19

Microscopia electrónica - INTRO

Answer 19

Max Knoll , Ernst Ruska

1931 Alemania

Question 20

M. Electrónica CARACTERÍSTICAS

Answer 20

1. Transmisión: campos magnéticos, emisión electrones.
   Los ē se desvían por imanes
2. Condensador: placa fotográfica de zinc.
   Se ve Si los ē pasaron por la muestra.
3. óptica (fotones) y electrónico (ē)
4. Blanco y negro
5. Máxima magnificación: 500,000 X

Question 21

M. Electrónica USOS

Answer 21

Virus
DNA
Membranas
Aminoácidos

Question 22

M. Electrónica TIPOS

Answer 22

1. Transmisión

2. Barrido

Question 23

Transmisión (electrónica) PREPARACIÓN DE MUESTRA

Answer 23

1. Muestra tejido
2. 1er contraste: osmio, glutaraldehido
   Se pega el metal a las células
3. Colocar en molde
4. Rellenar con epon (polímero)
5. Calentar a 60 C/ 8 hrs = sólido
6. Cortar 0.5 micras (ultra microtomo)
7. Rejilla de cobre
8. 2da tinsion- Uranilo y plomo
9. Los ē rebotan donde no hay metal y siguen trayecto hasta la placa, formando una imagen 2D

Question 24

Barrido (electrónica) PREPARACIÓN DE MUESTRA

Answer 24

Electrones 1. Muestra se coloca en metal y vaporizador (anillo de oro) 2. Se baña la muestra en oro 3. Rayo ē barre/ escanea muestra 4. Rayos rebotan sobre el oro y son captados por el sentillador 5. Se crea imagen

Question 25

Barrido CARACTERÍSTICAS

Answer 25

Blanco y negro 2D Cosas grandes o pequeñas

Question 26

Epifluorescencia (m. Estereoscópico)

Answer 26

La luz viene de arriba Lámpara de mercurio --> luz UV Muestras preparadas con anticuerpos Lámpara emite luz UV específicamente al anticuerpo. 2D

Question 27

Fluoresecencia EJEMPLOS

Answer 27

1. Anticuerpos- reconocen antígeno por su glucoproteina. Linfocitos B de 2. Cariotipo: representación gráfica de cromosomas en una célula

Question 28

Confocal (m. estereoscópica)

Answer 28

2D ó 3D Enfoca el láser y toma fotos Junta imágenes Crea imagen 3D

Question 29

Fraccionamiento celular DEFINICIÓN- OBJETIVO

Answer 29

Conjunto de técnicas y métodos. Objetivo: separar organelos que componen una célula.

Question 30

Etapas fracción celular

Answer 30

1. Rompimiento de células | 2. Separación fracción deseada

Question 32

Desarrollo centrifugal

Answer 32

1940

Question 33

Citología/ citoquimica

Answer 33

Estudio estructural de la célula 1. Desarrollo 2. Forma 3. Dimensiones 4. Constitucion física

Question 34

Citología TÉCNICA

Answer 34

1. Raspado de células 2. Esparcimiento en laminilla 3. Tinsion Ej: papanicolau Raspado mucosa nasal no se quita tejido

Question 35

Citología CÉLULAS

Answer 35

1. Anuclear: parte ketarinisada (protección patogenos) 2. Superficial 3. Intermdiate 4. Parabasal

Question 36

Histologia

Answer 36

Comportamiento células en su conjunto.

Question 37

Tinsiones

Answer 37

1. Hematoxilina: básico y tiñe ácidos. Ej: núcleo El núcleo es ácido por el RNA/ DNA (ácidos nucleicos) - demasiados fosfatos 2. Eosina: ácido y tiñe básicos. Ej: citoplasma

Question 38

IHC - Inmunohistoquimica

Answer 38

Utilización anticuerpos que se unen específicamente a un blanco.

Question 39

Centrifugacion diferencial

Answer 39

Distintas densidades de componentes celulares