MTB: Semana 3 y 4

Question 1

Que es la inmunohistoquimica

Answer 1

La inmunocitoquímica es una técnica de identificación celular o componentes celulares por medio de interacciones anticuerpo-antígeno.

Question 2

Reactantes primarios de inmunohistoquímica

Answer 2

1. Anticuerpos policlonales –> Se filtra la sangre del animal para obtener las células plasmáticas y sus clones (policlonales) en el antisuero.
2. Anticuerpos monoclonales –> Producción constante
   de 1 anticuerpo puro cuya especificidad es
   conocida.
3. Lectinas –> Proteínas que se pueden unir a los carbohidratos del tejido con un nivel alto de especificidad.

Question 3

Para que se utilizan biomarcadores especificos

Answer 3

Se pueden dirigir terapias especificas mejorando el resultado y pronóstico

Question 4

Utilidad de la inmunohistoquímica

Answer 4

Clasificar tumor y su origen:
–> nódulo hepático –> biopsia –> poco diferenciado –> aplicación de inmunohistoquímica

Question 5

Marcador de citoqueratina:

Answer 5

Se encuentra en cualquier epitelio en MEMBRANA
- Ae1/Ae3: epiteliales
- Ck7: diafragama para arriba
- Ck20: diafragma para abajo

Question 6

Utilidad de biomarcador de citoqueratina

Answer 6

Tinción para cáncer de pulmón, colon y epiteliales, puede determinar metástasis, carcinomas

Question 7

Marcadores linfoides (CDs)

Answer 7

Son NUCLEARES
- LT: CD3, CD5
- LB: CD19, CD20, CD23
- Tinción CD45: células del sistema inmune

Question 8

Marcador para proliferación celular

Answer 8

Ki67 –> NUCLEAR
* si se enceuntra en ganglio NO es patologico

Question 9

Antígeno carcinoembrionario (AFP)

Answer 9

Marcador CITOPLASMATICO
- Cáncer de colon

Question 10

Marcadores de cáncer de mama

Answer 10

• Estrógenos y progesterona NUCLEARES
• HER2 MEMBRANA
• Ki67 NUCLEAR

Question 11

Positividad en inmunohistoquímica:

Answer 11

Color cafe en nucleo, membrana o citoplasma

Question 12

Control positivo en inmunohistoquímia

Answer 12

En la orilla / de lado se pone tejido que ya tuvo resultado positivo

Question 13

Características de tejido que alteran inmunohistoquímica

Answer 13

• Necrosis –> resultado negativo
• Mala fijación de tejido
• Tiempo en formol
• Disponibilidad de anticuerpos

Question 14

Para que NO sirve la inmunohistoquímica:

Answer 14

• Linfomas: separar benignos o malignos
• Tumores de tejidos blandos: subclasificación
• neoplasias de anexos cutáneos: subclasificación

Question 15

Definición de inmunofluorescencia

Answer 15

Técnica con antigenos/anitcuerpos (inmunomarcaje) unidos a colorantes fluorescentes para identificar tejidos
- Antig-antic + fluorocromo

Question 16

Fluorocromo

Answer 16

Marcador colorante fluorescente que crea contraste en zonas determinadas de elementos de interés

Question 17

Fluoróforo

Answer 17

Parte de una molécula (como fluorocromo) que tiene propiedad de fluorescencia

Question 18

Positividad de inmunfluorescencia

Answer 18

Verde fosfo (tmb rojo, azul, amarillo)

Question 19

Duración de fluorocromo

Answer 19

3-5 horas y ya no vuelve a prender

Question 20

Inmunofluorescencia directa

Answer 20

• Detección de antigenos en muestra
• Requiere un solo anticuerpo
• Una sola etapa
• Fluorescente = presencia de antigeno

Question 21

Inmunofluorescencia indirecta

Answer 21

• Detección de anticuerpos en suero
• Requiere dos anticuerpos
• Dos etapas
• Fluorescente = presencia de anticuerpo

Question 22

Utilidades de inmunofluorescencia

Answer 22

• Deposito de anticuerpos en enfermedades (glomerulopatias y piel!)
• Ampollas dermicas
• Clasificación tumores blandos y cerebrales
• Determinación de HER2 para mejorar tratamiento

Question 23

Marcadores importantes de inmunofluorescencia

Answer 23

IgG, IgA, IgM, C3, C1q, cadenas kappa

Question 24

Ventajas de la inmunofluorescencia

Answer 24

Rapido, sencillo, ALTA especificidad y sensibilidad (99%)

Question 25

Desventaja de inmunofluorescencia

Answer 25

Caro, no hay mucho personal capacitado, fotoblanqueo (muestra pierde fluorescencia)

Question 26

Que hace la microscopia electronica

Answer 26

Amplifica imagen que tiene el tejido y utiliza electrones

Question 27

Tipos de ME

Answer 27

De barrido (chiquito) y de transmisión (grande - casi toca techo)

Question 28

Fijación para ME

Answer 28

Glutaraldehido al 2%

Question 29

Enfermedades que se ven en ME

Answer 29

- Renales: glomerulopatías primarias - M. esq.: miositis - Pulmón: distinciones tumorales

Question 30

Microtromo de ME(T) que hace cortes de 70-100 nm

Answer 30

Ultramicrotromo

Question 31

Que es la secuenciación

Answer 31

Realiza síntesis de nuevos fragmentos de ADN --> Proporciona información sobre composición genética de un organismo

Question 32

Tipos de secuenciación mas comunes

Answer 32

- Sanger/desoxi/terminacion de cadena - De proxima generación

Question 33

Utilidad de secuenciación

Answer 33

- Neoplasias - Paternidad

Question 34

Tipo de secuenciación que utiliza colores fluorescentes

Answer 34

Illumina / automática

Question 35

Que es la PCR

Answer 35

Reacción en cadena de la polimerasa --> amplifica un fragmento de ADN y estudiua acidos nucleicos

Question 36

Primer termociclador de PCR

Answer 36

Babyblue --> funciones por aplicacion de ciclos de temperatura muy alta --> bloque de parafina --> pipeta --> electroforesis

Question 37

Aplicaciones de PCR

Answer 37

- Paternidad - Virus - Investigación

Question 38

PCR con grafica de colores con zondas de taqman y SYBR green

Answer 38

De tiempo real (QPCR)

Question 39

Técnica PCR que utiliza ARN mensajero

Answer 39

PCR en reversa (RT-PCR)

Question 40

Tipo de muestra en estudio transoperatorio

Answer 40

Muestra congelada para microtromo criostato

Question 41

Tinciones para estudio transoperatorio

Answer 41

- Rapido H&E - Diffquick