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Téc. Bio Mol > OGMs > Flashcards

OGMs Flashcards

1
Q

O que são organismos transgênicos ?

A

São organismos contendo moléculas de DNA recombinante introduzidas intencionalmente (artificialmente) por intervenção humana em seu genoma

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2
Q

Como os transgênicos são produzidos ?

A

A partir de técnicas de biologia molecular

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3
Q

Qual o objetivo de produzir transgênicos ?

A

Associar (unir) sequências de DNA entre diferentes organismos integrando DNA exógeno em plantas, animais e microorganismos. Dessa forma, novas características podem ser inseridas ou, até mesmo, descartadas de um organismo

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4
Q

Com relação a produção de animais transgênicos e noucates, qual o método no qual o DNA endógeno é removido do genoma, e um DNA estranho é introduzido ?

A

O método I (Knock-out e Knock-in)

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5
Q

Se referindo a produção de animais transgênicos e noucates, no método II (transgênico) o DNA exógeno é adicionado ao genoma.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Verdadeira

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6
Q

O método II (transgênico) de produção de animais transgênicos e noucates, é usado apenas em murino.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Falsa. É no método I

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7
Q

O que ocorre no método II (transgênico), quando o assunto é produção de animais transgênicos ?

A

Ocorre a supreexpressão de um gene construído após a microinjeção de DNA dentro de pronúcleo

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8
Q

Quais são os métodos de construção dos OGMs ?

A
  1. Método I - Knock-out e Knock-in (gene dirigido ou mutação dirigida)
  2. Método II - Transgênico
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9
Q

No método de construção Knock-out e Knock-in o DNA é introduzido primeiro em células embrionárias primordiais (ES).

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Verdadeira

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10
Q

No método Knock-out e Knock-in o que acontece com as células primordiais embrionárias (ES) que sofreram recombinação homologo ?

A

São identificadas e injetadas em um embrião de camundongos de 4 dias (um blastocisto)

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11
Q

Qual o nome do método de construção onde o DNA é integrado de uma forma randômica, injetando-o no pronucleo de um óvulo fertilizado ?

A

Transgênico

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12
Q

Qual o método de construção que é possível realizar em muitas espécies animais ?

A

Método II (transgênico)

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13
Q

Quais as etapas do método I de construção (Knock-out e Knock-in) ?

A
  1. O DNA exógeno é introduzido nas células embrionárias primordiais (ES)
  2. Depois ocorre a seleção de células que expressam o gene desejado
  3. Ocorre a injeção das células (ES) transformadas na massa interna de células (Blastocisto)
  4. Ocorre o implante no útero
  5. É realizado o teste de descendência (F1) para a presença do gene
  6. Ocorre o cruzamento de descendência de heterozigotos para produzir linhagem de transgênicos homozigotos (na F2)
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14
Q

Quais as etapas do método II de construção (Transgênico) ?

A
  1. O DNA (gene desejado, e com vetor) é injetado no pronucleo do óvulo fertilizado
  2. Ocorre o implante no útero
  3. É realizado o teste de descendência (F1) para a presença do gene
  4. Ocorre o cruzamento de descendência de heterozigotos para produzir linhagem de transgênicos homozigotos (na F2)
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15
Q

Qual tecnologia de transgene vai ocorrer apenas supreexpressão ?

A

O transgênico (Método II)

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16
Q

Qual tecnologia de transgene vai ocorrer supreexpressão, deleção e alteração ?

A

Knock-out e Knock-in (Método I)
* gene dirigido ou mutação dirigida

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17
Q

O método II ( Transgênico) é uma tecnologia de transgene mais dispencdiciosa, requer mais tempo e material.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Falsa. Na verdade é o método I (Knock-out e Knock-in) - gene dirigido ou mutação dirigida

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18
Q

Qual método de tecnologia de transgene permite a produção de diferentes linhas fenotípicas (sítio e número de cópias integradas) ?

A

O método II (Transgênico)

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19
Q

O método II (Transgênico) é simples, com tempo e fundos requeridos limitados.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Verdadeira

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20
Q

Qual método (tecnologia transgene) permite uma integração controlada e ocorre somente uma cópia ?

A

Knock-out e Knock-in (gene dirigido ou mutação dirigida)

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21
Q

O método II (Transgênico) ocorre a integração incontrolável e integração randômica (efeitos posicionais).

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Verdadeira

22
Q

Cite exemplos de camundongo transgênico (Knock-in)

A
  • (Nagy) com GFP (proteína verde fluorescente)
  • (BRINSTER) com hormônio de crescimento humano
  • Com beta-galactosidase
23
Q

A sequência gênica estrutural: fluorescência, refere a que tipo de camundongo transgênico ?

A

(Nagy) com GFP

24
Q

A sequência gênica estrutural: hormônio de crescimento, refere a que tipo de camundongo transgênico ?

A

(BRINSTER) com hormônio crescimento de humano

25
Q

A sequência gênica estrutural: beta-galactosidase, refere a que tipo de camundongo transgênico ?

A

Beta-galactosidase

26
Q

Quando ocorre o processo do camundongo transgênico com beta-galactosidase

A

Ocorre quando o promotor para um gene expressado nos progenitores de neurônios I (neurogenina 1) dirige a expressão de um gene repórter (beta-galactosidase)

As estruturas neurais expressando o transgene repórter são verde-azul escuro

27
Q

Onde são colhidas as células primordiais embrionárias (ES) ?

A

Da massa interna de células de blastocistos de camundongo

28
Q

As células primordiais embrionárias (ES) são crescidas continuamente em cultura (sem sinais de envelhecimento e limite de células descendentes)

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Verdadeira

29
Q

As células primordiais embrionárias (ES) em cultura permanecem indiferenciadas. Porque isso ocorre ?

A

Por causa do LIF (fator inibitório de leucemia), do contrário elas se agregariam e se diferenciariam

30
Q

As células primordiais embrionárias (ES) são totipontetes.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa?

A

Falsa. Elas são pluripotentes - retém o potencial para produzir todas as células (do animal, somáticas e germinativas)

31
Q

Quais células podem ser introduzida em um embrião já existente, e ainda ser cultivada, manipuladas e então reijetadas em blastocistos onde elas podem vir a contribuir todas as partes do embrião ?

A

As células primordiais embrionárias (ES)

32
Q

O que é Neo e o ele faz ?

A

Gene de Neomicina. Ele confere resistência ao G418 (análogo da Neomicina)

33
Q

O que é HSV-TK e o que ele faz ?

A

Gene da Timidina Cinase de HSV (herpes-vírus simples). Ele confere susceptibilidade ao aciclovir

34
Q

Quando o aciclovir fosforila ele se torna tóxico e mortal para a célula. Porque ?

A

Porque ele leva o bloqueio da replicação do DNA

35
Q

O aciclovir é analogo da Neomicina.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Falsa. Ele é análogo da Timidina

O análogo da Neomicina é o G418

36
Q

A Timidina Cinase (TK) de mamíferos é capaz de fosforilar aciclovir.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Falsa. Ela é incapaz. A Timidina Cinase (TK) de HSV (herpes simples) que tem a capacidade de fosforilar o aciclovir

37
Q

As células de mamíferos transformadas com HSV-TK passam a fosforilar aciclovir e morrem.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Verdadeira

38
Q

Sobre o direcionamento gênico usando o sistema de seleção positiva-negativa (utilizadas no método I) responda:

A inserção DIRECIONAL de DNA vetor ocorre pelo recombinante com DNA vetor integrado no gene alvo.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa?

A

Verdadeira

39
Q

Sobre o direcionamento gênico usando o sistema de seleção positiva-negativa (utilizadas no método I) responda:

Como se chama o processo no qual o recombinante com DNA vetor é integrado aleatóriamente ao genoma

A

Inserção aleatória de DNA vetor

40
Q

A inserção ALEATÓRIA ocasiona a vida e a inserção DIRECIONAL ocasiona a morte.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Falsa. É ao contrário. A inserção DIRECIONAL gera vida e inserção ALEATÓRIA gera a morte

41
Q

Sobre os resultados da alteração da sequência endógena responda:

O que ocorre no método Knock-out ?

A

Ocorre a deleção da expressão do gene do tipo selvagem. Por substituição da região gênica endógena por fragmentos de DNA não funcional

42
Q

Sobre os resultados da alteração da sequência endógena responda:

O que ocorre no método Knock-in ?

A

Ocorre a substituição do gene tipo selvagem pelo gene - X (seja repórter, transgene, trans-espécie, etc). Por substituição da região genica endógena por fragmentos de DNA funcional

43
Q

Sobre os resultados da alteração da sequência endógena responda:

O método Knock-out a deleção ocorre por fragmentos de DNA não funcional, e o método Knock-in a substituição ocorre por fragmentos de DNA funcional.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Verdadeira

44
Q

Com relação ao regiões gênicas substituídas no OGM responda:

Qual o objetivo da sequência codificadora ?

A

Estudar a expressão do gene, na verdade do promotor

45
Q

Com relação ao regiões gênicas substituídas no OGM responda:

Qual o objetivo do promotor ?

A

Expressar o gene em determinado local e tempo, para obter o produto ou para estudar o efeito da sua expressão

46
Q

O que é GFP ?

A

Proteína verde fluorescente

47
Q

O que é CAT ?

A

Cloranfenicol acetil-transferase

48
Q

O GFP, o CAT e a beta-galactosidase são exemplos de: ?

A

Genes repórteres

49
Q

Quais são as etapas para a identificação de camundongos transgênicos nocaute-Southern

A
  1. Extração de DNA
  2. Digestão do DNA com enzimas de restrição
  3. Análise por Southern
  4. Conclusão
50
Q

Com relação a identificação de camundongos transgênicos nocaute-Southern responda:

O que ocorre na etapa de extração de DNA da calda ?

A
  1. É adicionado na calda cortada proteínas K tampão
  2. Depois durante a noite ocorre a incubação (52-55 graus)
  3. Logo após é feito a transferência do sobrenadante para tudo com isopropanol
  4. Nessa etapa ocorre a precipitação
  5. E por fim o DNA é dissolvido em tampão
51
Q

Quais as etapas para a construção de um camundongo transgênico ?

A
  1. Transferência células (ES)
  2. Identificação Recombinantes homólogos
  3. Injeção dos blastocistos
  4. Identificação químeras
  5. Cruzamento das químeras (BACKCROSS)
  6. Nascimento descendência
  7. Cruzamento heterozigotos
  8. Nascimento descendência
  9. Identificação homozigotos
52
Q

Geração de animais-modelo para estudo de doenças humanas (principalmente de herança dominante), como, fibrose cística, doença inflamatória crônica de intestino, Alzheimer, doenças de Prion; é uma aplicação dos organismos transgênicos.

Essa afirmação é verdadeira ou falsa ?

A

Verdadeira

Téc. Bio Mol (2 decks)

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