Outils D’étude De La Cellule

Question 1

2 types de microscopie photonique ?

Answer 1

• Confocal : échantillon épais, au moins 1 laser, possibilité de 3D
• A fluorescence (utilisation de fluochrome)

Question 2

Qu’est-ce que le fluochrome ?
Donner des exemples

Answer 2

C’est une molécule qui émet des photons après excitation.

Dapi : émet dans le bleu , excité dans les UV
Fluorescéine : émet dans le vert, excité dans le bleu
Rhodamine : émet dans le rouge, excité dans le vert

Question 3

2 types de microscopes électroniques ?

Answer 3

• EM balayage : électrons balaient surface échantillon (image lisse 3D)
• EM transmission : électrons plus ou moins transmis (image en 2D, nuances de gris, rugueux)

Question 4

Qu’est ce que l’immunofluorescence ?

Answer 4

Utilisation d’un anticorps lié à un fluochrome contre un antigène donné afin de le repérer facilement.
Pour amplifier le signal, des AC secondaires peuvent être utilisés : immunofluorescence indirecte

Question 5

Par quel moyen peut-on voir la protéine intra cellulaire ? Cela a-t-il une conséquence ?

Answer 5

Perméabilisation de la cellule entraînant la mort de celle-ci

Question 6

Qu’est ce que la cytométrie en flux ?

Answer 6

Technique de détection, tri et comptage afin de quantifier des cellules/ molécules intracellulaires…

Question 7

Méthodes pour faire rentrer un transgène dans une cellule vivante ?

Answer 7

-Micro-injection
-Electroporation
-Transfection (ADN encapsulé dans liposomes)

Question 8

Culture primaire :

Answer 8

-Tissu prélevé
-Bon modèle physiologique
-Durée de vie courte

Question 9

Culture en lignée :

Answer 9

-Cellules tumorales, cancéreuses, primaires immortalisées
-Génome modifié
-Durée de vie longue

Question 10

Culture de cellules souches :

Answer 10

-Ex : issues du blastocyte
-Donne tout types de cellules organiques