Partim bacterio - Voedingsbodems Flashcards
(40 cards)
N-bron - Basiselementen voedingsbodem
De meeste microben van klinisch belang vereisen voor een snelle ontwikkeling complexe stikstof-verbindingen zoals de afbraakproducten van eiwitten: peptonen, polypeptiden en aminozuren. Bij de bereiding van voedingsbodems worden vooral peptonen of vleesextracten gebruikt, maar ook bv. ammoniumzouten.
De peptonen zijn meestal afkomstig van eiwitten uit melk of vlees. Ze bevatten naast de stikstofverbindignen ook zouten van Na en K, spoorelementen, vitaminen en groeifactorenen en zijn meestal vrij van koolhydraten
C- en energiebron - Basiselementen voedingsbodem
Als onmiddelijke energiebron voegt men aan de meeste voedingsbodems een vergistbaart koolydraat toe, meestal glucose (0,5%) omdat dit door de meesta microorganisme kan gebruikt worden
S en P bron - Basiselementen voedingsbodem
Zwavel is meestal afkomstig van aminozuren. Fosfor is aanwezig in verschillende organische extracten of kan als fosfaat worden toegeniend
Na+, K+, MG2+ en Cl- - Basiselementen voedingsbodem
Worden meestal als zouten toegevoegd aan het medium
Water - Basiselementen voedingsbodem
Vers gemaakte voedingsbodems bevatten meer dan 90%
Agar - Basiselementen voedingsbodem
Is enkel aanwezig in vaste voedingsbodems en ontbreek bij vloeibare voedingsbodems. Agar is een product dat bereid wordt uit zeewieren. Het hoofdbestanddeel is een zeer lange ketten van polysacchariden, die NIET door micro-organismen kan afgebroken worden. Als agar opgelost wordt in water en daarna opgekookt wordt tot 100 graden, zal het na afkoelen (onder 45 graden) een gel vormen, die zeer stevig is bij concentraties van 1,5 to 2%
Bufferoplossingen
De meerderheid van de commensale en pathogene bacteriën groeien het best bij een neutrale of licht alkalische pH. Schimmels en sommige bacteriën kunnen echter groeien in aanwezigheid van een aanzienlijke hoeveelheid zuur.
Micro-organisme die groeien, geven zure afbraakproducten af aan het voedingsmedium met een daling van de pH als gevolg. Hierdoor wordt de groei van diezelfde micro-organisme geremd. Bufferoplossing voorkomen deze groeiremming door de pH te stabiliseren
Groeifactoren - Andere elementen
Toevoeging van groeifactoren zorgt voor een aanrijking van het medium. Dit kan bv. met:
- Gistextract: belangrijke bron van vitaminenen uit de B groep
- Bloed of serum
- Bepaalde enzymen
Selectieve inhibitoren - Andere elementen
Zijn stoffen die worden gebruikt om een voedingsbodem selectief te maken, dwz door toevoeging van dergelijke stoffen zullen slechts een of enkele welbepaalde soorten micro-organismen op deze voedingsbodem groeien
Voorbeelden Selectieve inhibitoren
- Kristalviolet en galzouten remmen de groei van de meeste gram+ bacteriën
- Natriumazide remt de groe van de meeste gram- bacteriën
pH-indicatoren - Andere elementen
pH-indicatoren worden gebruikt om bepaalde biochemische omzettingen te volgen, bv. Zuurvorming uit suiker.
Fenolrood (6,8 - 8,4 geel –> rood)
netraalrood (6,8 -8,0 rood –> geel)
Vier grote groepen van voedingsbodems
- Algemene voedingsbodems
- Verrijkte voedingsbodems
- Selectieve voedingsbodems
- Electieve voedingsbodems
Algemene voedingsbodems
Algemene laten der groei toe van de meeste (niet Alle)) Micro-organisme, zodat uit een onbekend staal de meeste micro-organisme kunnen geïsoleerd worden
Werking TSA
Tryptic Soy Agar
Bevat alle ingrediënten om de meeste micro-organismen te laten groeien
Uitzicht TSA
Geen identificatie van de kiem mogelijk
Werking TSB
Tryptic Soy Broth
Bevat alle ingrediënten om de meeste micro-organisme te laten groeien
Uitzicht TSB
Geen identificatie van de kiem of kiemen mogelijk! Vloeibare tegenhanger van TSA
Soorten Verrijkte voedingsbodems
- Bloedagar met Alfa of Beta hemolyse en Gamma-Hemolyse
Werking bloedagar
Sommige bacteriën kunnen hemolysines produceren. Dit zijn enzymen die rode bleodcellen, aanwezig in de bloedagar, lyseren. Aan de hand van de verschillende hemolyse patronen worden streptokokken onderverdeeld in 3 groepen (zie uitzicht)
Uitzicht Bloedagar
A-hemolyse:
Is een gedeeltelijke hemolyse met een groene verkleuring rond ede kolonies door oxydatie van hemoglobine tot methemoglobine (bv. Streptococccus pneumoniae)
B-hemolyse:
Micro-organismen die hemolysisnes produceren geven op de bloedagar een heldere opklaringszone rond de kolonie, afkomstig van gelyseerde rode bloedcellen (bv. Streptococcus pyogenes)
Y-hemolyse: Geen hemolyse (bv. Streptococcus mutans)
Samenstelling bloedagar
Is een TSA verrijkt met 5% bloed (vaak schapen)
Selectieve voedingsbodems Algemeen
Selectieve voedingsbodems worden gebruikt om uit een mengflora met diverse micro-organismen bepaalde soorten selectief te isoleren, met uitsluiting van anderen. Ze bevatten dan ook steeds een aantal remmende factoren die sommige micro-organismen zullen doden. De andere kiemen die er niet gevoelig voor zijn, zullen echter wel groeien. Meestal zijn er ook een aantal indicatoren aanwezig, die toelaten een onderscheid te maken tussen de micro-organismen die er wel op groeien
Soorten Selectieve voedingsbodems
- Cetrimide agar (Cet)
- MacConkey agar (McC)
- Mannitol Salt phenol-red Agar (MSA)
- Nickerson agar (Nick)
- Sabouraud (dextrose) glucose agar (SAB)
Cet algemeen
Cet wordt gebruikt voor de isolatie en differentiatie van Pseudomonas sp.
