Práctica 6. Enzimas de Restricción, ADN Recombinante, RFLP Flashcards
(20 cards)
¿Qué son las enzimas de restricción?
Son endodeoxiribonucleasas que tienen la capacidad de cortar (digerir) ADN doble cadena en una secuencia específica
¿Qué permite el uso de enzimas de restricción?
El desarrollo de la ingeniería genética empleando tecnología de ADN recombinante.
¿Cómo se emplean las enzimas de restricción en la tecnología de ADN recombinante?
- Cortando secuencias de ADN de interés
- Posteriormente, ensamblarlas en la forma deseada
- Obtener una molécula de ADN artificial recombinante
¿Cómo puede ser empleada una molécula de ADN artificial recombinante?
Empleada para modificar la composición genética de un organismo
¿Dónde encontramos las enzimas de restricción?
Se encuentran de forma natural en bacterias
¿Qué papel tienen las enzimas de restricción en las bacterias?
Un papel protector contra los bacteriófagos, destruyendo su ADN y evitando que se repliquen dentro de la bacteria.
¿Cómo se protege el ADN de las bacterias contra la degradación?
Se protege con metilación
Bacteriófago no presenta metilación. Metilación es un mecanismo de defen
¿Qué reconoce cada enzima de restricción empleada en el laboratorio?
Reconoce una secuencia específica en la cual realiza el corte endonucleolítico.
¿Cómo se nombran las enzimas de restricción?
En base a la bacteria de la que fueron aisladas.
1. La primera letra del género
2. Las dos primeras letras de la especie
3. El orden de descubrimiento
Ej. EcoRI (Escherichia coli RI)
Secuencia y corte específico de la EcoRi
G|AATTC
CTTAA|G
| - donde se realiza corte
Secuencia y corte específico de Pstl (Providencia stuartii I)
CTGCA|G
G|ACGTC
¿La secuencia o corte específico se encuentra presente en varios lugares de la molécula de ADN original?
Verdadero
La enzima de restricción corta en cada uno de ellos.
¿A qué da lugar que la enzima corte en cada sitio específico?
A una serie de fragmentos de restricción
¿Qué son los fragmentos de restricción?
Son segmentos de ADN doble cadena producidos por la acción de una enzima de restricción que actúa sobre un ADN más largo
¿A qué da origen un ADN lineal que tiene un sitio de reconocimiento para una enzima de restricción?
Dará origen a dos moléculas de menor peso molecular
¿Qué pasa si el ADN lineal tiene 2 sitios de reconocimiento?
Se generarán 3 fragmentos
Cuanto más corta la secuencia de reconocimiento…
… mayor es el número de fragmentos generados
¿Por qué es complejo el estudio de las células eucariotas?
Porque la mayoría de sus genomas son hasta mil veces más complejas; difícilmente se podían aislar y estudiar genes individuales.
¿Qué permitió la tecnología del ADN recombinante?
Permitió aislar, secuenciar, manipular, conocer la estructura y función de genes individuales derivados de cualquier tipo de célula
¿Cuántas moleculas de ADN recombinante nos permite fabricar
