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Introducción A La Ingeniería Genética > Prueba N°1 (Clase 1 - 7) > Flashcards

Prueba N°1 (Clase 1 - 7) Flashcards

(55 cards)

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1
Q

¿Qué es el dogma central de la biología molecular?

A

Flujo de información genética: ADN → ARN → proteína.

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Q

¿Qué es un codón?

A

Triplete de bases que codifica un aminoácido.

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3
Q

¿Qué hace el tRNA?

A

Traduce codones del mRNA a aminoácidos.

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4
Q

¿Qué es la PCR y quién la inventó?

A

Técnica para amplificar ADN, inventada por Kary Mullis.

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5
Q

¿Qué es el ADN recombinante?

A

ADN artificial formado por la unión de secuencias de diferentes organismos.

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6
Q

¿Qué hacen las enzimas de restricción?

A

Cortan el ADN en secuencias específicas.

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7
Q

¿Qué es un plásmido?

A

Molécula circular de ADN que se usa como vector en bacterias.

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8
Q

¿Qué es la ligasa?

A

Enzima que une fragmentos de ADN.

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9
Q

¿Qué permite la selección con X-gal/IPTG?

A

Ver si el gen fue insertado correctamente (colonias azules vs blancas).

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10
Q

¿Qué significa PCR?

A

Reacción en cadena de la polimerasa.

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11
Q

¿Qué hace la PCR?

A

Amplifica un fragmento específico de ADN.

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12
Q

¿Qué es la Taq polimerasa?

A

Enzima resistente al calor que copia ADN.

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13
Q

¿Qué pasos tiene la PCR?

A

Desnaturalización, alineamiento, extensión.

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14
Q

¿Qué es un primer en PCR?

A

Fragmento corto que marca el inicio de la amplificación.

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15
Q

¿Qué es la RT-PCR?

A

PCR que parte desde ARN → útil para virus.

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16
Q

¿Qué mide la qPCR?

A

La cantidad de ADN durante la amplificación (en tiempo real).

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17
Q

¿Qué es la secuenciación de ADN?

A

Técnica para leer el orden de nucleótidos en el ADN.

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18
Q

¿Qué es un ddNTP?

A

Nucleótido sin grupo 3’-OH que termina la síntesis en secuenciación Sanger.

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19
Q

¿Por qué se usa fluorescencia en Sanger?

A

Para identificar en qué base termina cada fragmento.

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20
Q

¿Qué significa NGS?

A

Next Generation Sequencing: permite secuenciar millones de fragmentos simultáneamente.

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21
Q

¿Qué tecnologías NGS existen?

A

Illumina, PacBio, Oxford Nanopore.

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22
Q

¿Qué fases incluye la secuenciación masiva?

A

Fragmentación, amplificación, lectura, ensamblaje y anotación.

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23
Q

¿Qué es la mutagénesis dirigida?

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A

Introducción controlada de mutaciones en una secuencia específica.

24
Q

¿Qué es la transfección estable?

Study These Flashcards
A

Integración del ADN en el genoma para expresión permanente.

25
¿Qué es CRISPR/Cas9?
Herramienta de edición genética que corta el ADN en una secuencia específica.
26
¿Qué es el ARN guía (sgRNA)?
Molécula que dirige a Cas9 hacia el ADN objetivo.
27
¿Qué es el sitio PAM?
Secuencia adyacente al ADN objetivo necesaria para que Cas9 corte (ej. NGG).
28
¿Qué diferencia hay entre NHEJ y HDR?
NHEJ es propensa a errores (knockout), HDR permite inserciones precisas (knockin).
29
¿Qué es el transcriptoma?
Conjunto de todos los mRNA expresados en una célula.
30
¿Qué es la transcriptómica?
Estudio del transcriptoma completo para analizar expresión génica.
31
¿Qué son los microarreglos?
Chips con sondas para medir expresión de genes conocidos.
32
¿Qué es RNA-Seq?
Técnica que usa NGS para secuenciar y cuantificar todos los mRNA.
33
¿Qué significa expresión diferencial?
Cambio en la cantidad de un mRNA entre condiciones distintas.
34
¿Qué se puede detectar con RNA-Seq que no con microarrays?
Genes nuevos, splicing alternativo, expresión de bajo nivel.
35
¿Qué es la epitranscriptómica?
Estudio de modificaciones químicas en el ARN que afectan su función sin cambiar su secuencia.
36
¿Qué es la m⁶A?
Modificación por metilación que regula estabilidad, traducción y splicing.
37
¿Qué es la pseudouridilación?
Conversión de uridina a pseudouridina, mejora la estructura y estabilidad.
38
¿Cómo se estudia la epitranscriptómica?
Mediante secuenciación NGS, espectrometría de masas y análisis bioinformático.
39
¿Por qué es importante en desarrollo y enfermedad?
Modula la expresión en células madre, cáncer, neurodegeneración, etc.
40
¿Cuántos codones hay en el código genético y qué codifican?
Hay 64 codones: 61 codifican aminoácidos (incluyendo ATG) y 3 son codones de término.
41
¿Cuál es el tamaño aproximado del genoma humano y de E. coli?
El humano tiene ~3x10^9 pb y E. coli ~10^6 pb.
42
¿Cómo se genera una oveja transgénica?
Inyectando un cigoto con ADN, no mediante transfección de células mamarias.
43
¿Qué enzima se obtiene de los retrovirus para transformar ARN en ADN?
La transcriptasa reversa, no 'polimerasa inversa'.
44
¿Se puede obtener inequívocamente una secuencia de ADN a partir de una de proteínas?
No, por la degeneración del código genético.
45
¿Cuál fue el principal avance de la secuenciación Sanger automatizada?
El uso de ddNTPs fluorescentes y detección automatizada por láser.
46
¿Cuál es la metodología para clonar genes del virus del Dengue en E. coli?
Transcripción reversa, diseño de partidores o uso de enzimas de restricción, clonación separada en vector, digestión, ligación, transformación, selección.
47
¿Cuál es la importancia biotecnológica de expresar proteínas virales en E. coli?
Permite estudiarlas, producirlas para diagnóstico o vacunas.
48
¿Cómo se interpreta una electroforesis de productos de secuenciación Sanger?
Se leen las bandas de abajo hacia arriba, obteniendo la secuencia complementaria en dirección 5' a 3'.
49
¿Qué problemas resuelve el PCR respecto al clonamiento clásico?
1) Especificidad: amplifica una secuencia entre muchas. 2) Cantidad: genera muchas copias sin bacterias.
50
¿Cómo se puede introducir roturas de doble hebra dirigidas en eucariontes?
Con CRISPR/Cas9 usando gRNA o con proteínas diseñadas como zinc fingers o TALEs.
51
¿Qué principios básicos aplican en la digestión y análisis de plásmidos?
Se hace electroforesis, se usa corriente y marcador, se visualiza con intercalante, se separan por tamaño.
52
¿Qué debe mostrar el plásmido final tras cortes con BamHI, PvuII y HindIII?
Bandas que reflejen los fragmentos generados por cada combinación en tamaños correctos y ordenados.
53
¿Qué es la transcriptómica?
Estudio del conjunto total de RNAs transcritos en una célula bajo una condición dada.
54
¿Qué tecnologías se usan para análisis transcriptómico?
Microarreglos y RNA-seq.
55
¿Cómo dificultan los polimorfismos o redundancia los análisis transcriptómicos?
Dificultan asignar lecturas a un gen específico por la similitud entre variantes.

Introducción A La Ingeniería Genética (1 decks)

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