Séquence 4 - Méthodes d'étude des cellules Flashcards
(44 cards)
Avec l’aide de quel appareil se fait l’étude des cellules ?
Microscopes plus ou moins performants
Par quel moyen se fait l’obtention d’un échantillon de tissus en provenance d’un organisme vivant ?
Biopsie
Quelle est la taille d’une cellule ?
Entre 10 et 100 um
Comment peut-on voir les organites cytoplasmiques ?
A la microscopie électronique
Quelles sont les méthodes d’étude des cellules ?
La microscopie optique
La microscopie électronique
Les méthodes d’étude de la composition cellulaire
La culture cellulaire
L’immuno-sérologie
Qu’est ce que la microscopie optique ?
Il s’agit d’études effectuées à l’aide d’un microscope, assemblage plus ou moins complexe de lentilles (généralement deux) et d’une source de lumière, permettant d’obtenir différents grossissements de l’image
La résolution de cet appareil peut atteindre combien de micromètre ?
0,2 micromètre
Pourquoi la méthode de la microscopie optique nécessite la coloration et la fixation ?
Sans la coloration et la fixation, la cellule resterait transparente et donc invisible
Pourquoi la méthode de la microscopie optique nécessite des coupes très fines ?
Pour observer les structures de manière indépendante en limitant les superpositions
Quelles sont les étapes de la méthode de la microscopie optique ?
Prélèvement de tissu ou de cellules (par biopsie ou pds)
Fixation des structures (permet de stabiliser les structures cellulaires)
Découpage (le tissu est découpé un fines lamelles à l’aide d’un microtome)
L’échantillon est soumis à des techniques de visualisation des structures (coloration)
Lors de la microscopie optique, comment peut se faire l’étape de la fixation des structures ?
Par déshydratation ou par congélation
Que permet la congélation ?
Des coupes très fines, sans inclusion préalable
Quelles sont les principales colorations utilisées ?
L’hématoxyline-éosine
Rouge carmin
Résorcine
Fuschine
Que permet la microscopie électronique contrairement à la microscopie optique ?
Elle permet une meilleure résolution (jusqu’à 0,5 angström (0,5x10-10m)) et un agrandissement plus poussé (plusieurs milliers de fois)
De quelles étapes la microscopie électronique a-t-elle besoin ?
Interaction potentielle des électrons avec la matière vivante, et notamment avec l’eau qu’elle contient
Préparation par déshydratation ou cryogénisation
Traitement permettant d’accentuer le contraste entre différentes structures
Quelles sont les deux techniques utilisées pour la microscopie électronique ?
Microscopie électronique à transmission
Microscopie à balayage
Comment fonctionne la microscopie électronique à transmission ?
Un faisceau d’électrons est transmis à travers un échantillon très fin à étudier
Comment fonctionne la microscopie à balayage ?
Utilise un faisceau d’électrons émis depuis un canon et qui fonctionne comme une “sonde” qui explore l’échantillon –> émet un rayonnement caractéristique qui est enregistré
Quelles sont les différentes méthodes pour l’étude de la composition ?
Spectrométrie
Chromatographie
Histochimie (et son dérivé l’immunohistochimie)
Électrophorèse
En quoi consiste la spectrométrie ?
La spectrométrie consiste à décomposer une donnée en ses constituants, comme décomposer un mélange de molécules en ses plus simples composantes selon leur masse et de préciser ainsi leurs caractéristiques chimiques
Comment est effectuée l’analyse de la spectrométrie ? Que permet-elle de définir ?
Elle est effectuée en phase gazeuse
Elle permet notamment de définir la composition chimique des molécules
Qu’est ce que la chromatographie ?
La chromatographie est une méthode de séparation des constituants d’un mélange en phase liquide par exemple
Quel est le principe de la chromatographie ?
Le principe consiste à utiliser 2 phases, une fixe et une mobile (liquide ou gazeuse)
Il existe une méthode d’adaptation de la chromatographie, comment s’appelle-t-elle ?
La chromatographie d’exclusion
