Spectophotométrie Flashcards
Quelle est la différence entre la spectroscopie et la spectrophotométrie?
La spectrophotométrie se fait dans l’UV ou le spectre du visible tandis que la spectroscopie se fait dans l’infrarouge et dans l’ultraviolet
Quelles sont les applications du spectrophotomètre?
- Identifier un composé (selon les maxima du spectre d’absorption)
- Doser un composé (ADN, ARN, protéines) dans une solution
- Mesurer la vitesse d’une réaction enzymatique
- Détecter un coenzyme (ex l’état d’oxydation de l’hème)
- Analyser la pureté d’une préparation purifiée d’acides nucléiques
ou de protéines
Quel sera le spectre d’un mélange de composés?
La somme des spectres de chacun des composés
Qu’est-ce que l’absorbance?
L’énergie des ondes absorbée par les molécules de la solution
Quelles parties des protéines absorbent dans la région UV?
Les doubles liaisons, les liens peptidiques, les ponts disulfures entre deux cystéines et les groupements aromatiques de certains acides aminés (Trp, Tyr et Phe)
À quelle longueur d’ondes les acides nucléiques absorbent les radiations?
Environ 260 nm
De quoi l’absorbance des acides nucléiques dépend-t-elle?
De leur taille et de leur composition
Quels sont les composantes du spectrophotomètres?
La lampe et la cuvette
