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Técnicas Flashcards

(51 cards)

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1
Q

clasificación de microscopios y diferencias

A
  • ópticos: tienen su fuente luminosa de luz blanca

- electrónico: fuente de iluminación un haz de electrones

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2
Q

que es aumento y que tipos hay

A

es la magnificación que logran los equipos

40x, 100x, 400x

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3
Q

que es nitidez

A

esta relacionada con la resolución

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4
Q

que es la resolución

A

la distancia mínima a la cual debe estar un equipo para identificar dos puntos independientes

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5
Q

cual es el rango del tamño entre las celulas

A

micrómetros

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6
Q

cuanto mas juntos esten 2 puntos independientes, la resolución será:

A

mayor

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7
Q

partes del microscopio optico

A

lente ocular, lente objetivo, condensador, diafragma, platina, tornillos macro y micrometro, revolver, foco, tubo y base inferior

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8
Q

que hace el lente ocular y el objetivo

A
  • lente ocular: capta y amplifica imagenes dadas por el lente objetivo,
  • lente objetivo: amplifica las imagenes, pueden haber secos y de inmersión
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9
Q

que hace el condensador

A

concentra los haces luminosos sobre la preparación

-permite aumentar o disminuir la cantidad de luz que va a incidir

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10
Q

diafragma

A

regula la cantidad de luz que entra en el condensador

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11
Q

los responsables de mejorar el aumento de nuestras muestras son:

A

el lente ocular y el objetivo

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12
Q

que tipo de imagen obtenemos con el microscopio

A

imagen real, invertida y aumentada

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13
Q

lente ocular

A

donde posamos la vista, “x” es el aumento que presenta el lente

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14
Q

lente objetivo estan insertos en

A

un revolver, lo que permite elegir el objetivo donde queremos mirar nuestras muestras

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15
Q

sistema de amortiguación

A

es un sistema de protección del lente objetivo

-esta parte se hundirá cuando acerquemos mucho platina al objetivo

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16
Q

tipos de lentes objetivo

A
  • secos, que no utilizan ninguna ayuda para conducir los haces de luz
  • inmersión, el aceite de inmersión capta el 100% de los haces de luz, dando una mejor resolución y máximo aumento
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17
Q

poder de resolución

A

capacidad para distinguir separadamente 2 puntos muy cercanos entre sí

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18
Q

límite de resolución

A

distancia mínima que existe entre 2 puntos para verlos independientes

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19
Q

la resolución y el límite de resolución son

A

inversamente proporcionales

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20
Q

el poder de resolución del microscopio electronico de transmisión

A

2 Armstrong, esta aumentado en 1.000.000 la resolución del ojo humano

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21
Q

relación de longitud de onda con el poder de resolución

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A

mientras menor sea la longitud de onda, mejor será la resolución

22
Q

la longitud de onda esta relacionada directamente

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A

con la fuente de iluminación

23
Q

la apertura numérica es

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A

la capacidad que tiene para captar los haces de luz o de electrones
-es el indice de refracción multiplicado por el seno del ángulo (N x sen a)

24
Q

la relación entre apertura numérica y resolución es

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A

directamente proporcional

25
con el aceite de inmersión
tenemos nuestra mejor resolución
26
microscopio electrónico de transmisión (MEC)
- mayor resolución - utiliza imanes qu permiten conducir los hacees de electrones - se detectan los electrones transmitidos
27
en MET se obtienen
regiones electrodensas y electroclaras, relacionada directamente con la cantidad de electrones que va a incidir
28
en electroclaras
hay transmisión de electrones
29
en electrodensas
se genera sombra porque no hay transmisión de electrones
30
microscopio electrónico de barrido (SEM)
da imagenes de 3 dimensiones - haz luminosos de electrones - tiene detectores de electrones
31
diferencia microscopio optico y electronico
- optico: muestras vivas | - electronico: muestras muertas
32
en SEM
se detectan electrones secundarios - zonas mas planas van a tener menor cantidad de electrones - zonas más 3D más electrones
33
procesamiento histológico para lograr la tinción
1) Obtención de la muestra 2) Fijación: en formalina para detener procesos (evita proteólisis o degradaciones) 3) Deshidratación y aclaramiento: remover el exceso de formalina 4) Impregnación en parafina fundida 5) Inclusión de parafina, cuando la parafina se solidifica
34
diferencia entre deshidratación y aclaramiento
- deshidratación: sacarle todo el agua y reemplazarla por formalina - aclaramiento: se sacan excesos, es como un lavado previo para que la muestra no rechaza el paso siguiente de parafina
35
tinción hematoxilina/eosina
celulas incoloras se les da tipo de contraste, para visualizar el nucleo y el citoplasma
36
hematoxilina
es un colorante, que se prepara en presencia de metales
37
con hematoxilina y metales se forma un complejo llamado
"hemalumbre", que es catiónico con características básicas
38
hematoxilina tiñe
los grupos fosfatos del ADN, quedando purpura o morado el núcleo -debido a que los grupos fosfatos tienen carga negativa, el complejo hemalumbre va a precipitar en estos lugares
39
eosina se utiliza
como contraste para distinguir el citoplasma del nucleo
40
eosina tiene
grupos carboxilicos, que dan caracteristicas acidas
41
eosina es afin
a grupos aminos de las proteinas citoplasmaticas
42
blastocistos son
celulas pluripotenciales: con la capacidad de diferenciarse en 3 líneas germinales
43
celulas reprogramadas IPS cells
celulas pluripotenciales inducidas, que despues pueden diferenciarse
44
como se hizo el experimento de IPS cells
a partir de fibroblastos adultos de la piel humana, los reprogramo para expresar factores de transcripciones que estan presentes solo en celulas embrionarias
45
imnunohistoquímica e inmunofluorescencia
- identificar un tipo de especifico de proteina - basada en la utilización de anticuerpos - anticuerpo va a tener una porción variable que es la que va a reconocer nuestro antigeno y una porcion constante
46
Inmunohistoquímica
- es indirecta - utilización de anticuerpo primario para unirse a proteina de interes - este anticuerpo es reconocido por un anticuerpo secundario con enzima marcadora (peroxidasa o fosfatasa alcalina) - en presencia de sustratos adecuados producen precipitados colorados qu permiten identificar el complejo anticuerpo-anticuerpo - podremos ver el lugar especifico de presencia de proteina
47
Inmunofluorescencia
- es directo | - utilización de anticuerpo marcado con colorante fluorescente para que se una a proteina de interes
48
mecanismo de inmunofluorescencia
el fluorofosforo que esta unido al anticuerpo, se excita y emite fluorescencia que sera captado por microscopio de fluorescencia
49
inmunofluorescencia vemos de color
- verdes: las neuronas - rojo: celulas de Schwann - azul: fluoroforo, que se intercala en el DNA (tinción DAPI)
50
proteina fluorescente verde (GFP) se encuenta naturalmente en
medusa que sufre modificaciones postraduccionales que le otorgan fluorescencia
51
GFP es codificada
de forma normal por uin solo gen que puede clonar e introducir en otras especies mediante ingeniería genética

biocel se pasa si o si (5 decks)

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