Técnicas Flashcards
(23 cards)
El método de examen es el conjunto de procedimientos especiales a los que se somete el material en estudio para posibilitar la visualización microscópica.
Se divide en:
1.
2.
El métodos de examen es el conjunto de procedimientos especiales a los que se somete el material en estudio para posibilitar la visualización microscópica.
Se divide en:
1. Métodos mediatos
2. Métodos inmediatos
Técnica inmediata
Transcurre en _______ tiempo entre la obtención y visualización
POCO TIEMPO
Técnica inmediata
Transcurre en poco tiempo entre la obtención y visualización
Los colorantes vitales pueden ser:
1.
2.
- Intravital: se introduce el colorante al organismo. Es in vivo. (Ejemplo: TINTA CHINA)
- Supravital: se separa la célula del organismo y luego entra en contacto con el colorante. Es in vitro. (Ejemplo: VERDE JANO)
Que es un colorante intravital y supravital?
Intravital: se introduce el colorante al organismo. Es in vivo. (Ejemplo: TINTA CHINA)
Supravital: se separa la célula del organismo y luego entra en contacto con el colorante. Es in vitro. (Ejemplo: VERDE JANO)
Técnica mediata (técnica histológica propiamente dicha)
Pasos:
A.
B.
C.
D.
E.
F.
a. Obtención de la pieza
b. Fijación
c. Inclusión
d. Montaje
e. Coloración
f. Montaje final
Explicar primer paso de la técnica mediata:
1. Obtención de la pieza
La pieza puede obtenerse por medio de distintos instrumentos como el bisturí. Si se obtiene de un organismo vivo se denomina biopsia y si se obtiene de uno muerto necropsia.
Explicar fijación
Produce muerte celular conservando su morfología
Evita autolisis (que el tejido se descomponga)
Fijadores pueden ser físicos o químicos
Explicar:
Fijación física y química
Físicos: congelación (nitrogênio líquido) y desecación
Químicos:
A. Simples: formol al 4% (universal - técnica de rutina)
Alcohol metílico
B. Compuesto:
Líquido de Zenqer
Líquido de Bouin
Qué significa ser un buen fijador?
- Actuar rápidamente.
- Conservar la morfología que presentaba in vivo.
- Evitar aparición de estructuras (artificios)
- Tener alto poder de penetración.
- Favorece la coloración.
- Ser económico.
- Evita secreción post morten
Tecnica mediata
Inclusión:
Es la penetración del material por agentes inclusores que le confieren firmeza y elasticidad para su corte.
Es con parafina
1. Deshidratación con álcool creciente
2. Aclaración con Xilol o Toluol que eliminan los lípidos
3. Penetración parafina: 60C por 6 horas
- Inclusión definitiva: formación del taco
Técnica mediata
Montaje
Se realiza el corte con micrótomo
Cortes delgados para que pueda ser atravesado por la luz
Tecnica mediata
Coloración
Se utilizan colorantes hidrosolubles
Se puede usar 1 colorante (simple)
2 (compuesto) = HyE, tricromicros
Explicar HyE
Que tiñen?
Hematoxilina actúa como?
Y eosina?
Tiñen estructuras con carga, ácidos y básicos
Hematoxilina actúa como básico y tiñe estructuras ácidas
Eosina es ácido y tiñe básicas
Los ácidos nucleicos son estructuras ________________y____________ (catiónico/aniónicos y ácidas/básicas) que están ubicadas en el_______________________(3).
Por esto, se colore con HyE
La hematoxilina que es un colorante que hay que activarlo con un mordiente (sal - alumbre de potasio). De esta manera es activada, lo que provoca un viraje de rojo a azul y, además, se comporta como catiónico.
Los ácidos nucleicos son estructuras ácidas y anionicas que están ubicadas en el núcleo, ribosomas, RER.
Por esto, se colore con HyE
La hematoxilina que es un colorante que hay que activarlo con un mordiente (sal - alumbre de potasio). De esta manera es activada, lo que provoca un viraje de rojo a azul y, además, se comporta como catiónico.
Los ácidos nucleicos son estructuras ácidas y anionicas que están ubicadas en el núcleo, ribosomas, RER.
Por esto, se colore con HyE
La hematoxilina que es un colorante que hay que activarlo con un mordiente (__________________________). De esta manera es activada, lo que provoca un viraje de rojo a azul y, además, se comporta como _____________(aniónico/catiónico) .
Los ácidos nucleicos son estructuras ácidas y anionicas que están ubicadas en el núcleo, ribosomas, RER.
Por esto, se colore con HyE
La hematoxilina que es un colorante que hay que activarlo con un mordiente (sal - alumbre de potasio). De esta manera es activada, lo que provoca un viraje de rojo a azul y, además, se comporta como catiónico.
Las proteínas son estructuras _____________y______________ que están ubicadas en _______________________________________ (4).
Las proteínas son HyE positivas y a traves de la ___________ que es un método ___________, e un colorante _______ y __________.
Las proteínas son estructuras básicas y catiónicas que están ubicadas en el citoesqueleto, mitocondrias, gránulos de zimogeno (lisosomas) y REL (citocromo p450).
Las proteínas son HyE positivas y a traves de la Eosina que es un método DIRECTO, e un colorante ácido y aniónico.
Técnica de Feulgen
- Es para discriminar ADN (desoxirribosa)
- Es ácido clorhidrico con reactivo de Schiff (colorante). Esto va a dar un color magenta
Método específico para la determinación del ADN basado en el contenido de desoxirribosa del ADN. Por medio de hidrólisis ácida débil se eliminan los grupos púricos. Entonces se abre el anillo de desoxirribosa y se forma un grupo aldehído.
Este reacciona con el reactivo de Schiff con lo que se observa el típico color magenta. Como control se emplean cortes tratados con la enzima desoxirribonucleasa antes de la coloración, por lo general el material Feulgen (+) está limitado a la cromatina nuclear.
Técnica de PAS
Se emplea para determinar la presencia de GLÚCIDOS, pues son electroneutros y no se tiñe con HyE.
El método de PAS se basa en que el ácido peryódico (HIO4) primero oxida grupos hidroxilos (OH) libres de dos átomos de carbono vecinos transformándose en grupos aldehídos. Los grupos aldehídos recién formados reaccionan con el reactivo de Schiff dando el color magenta característico.
Se encuentra en el Aparato de Golgi, glucocalix, inclusiones de glucógeno, GAGs, fibras reticulares y gránulos de mucígeno. Célula caliciforme, c mucípara y membrana basales.
Se tiñe pues reactivo de Schiff se une a aldheidos (glúcidos).
Técnica de Sudán
Colorante hidrofóbico de color negro que se une a las grasas.
Como la deshidratación con alcohol previo a la inclusión en parafina y luego los solventes de la parafina arrastran lípidos, para teñirlos es necesario una fijación y procesamiento previo que los conserva en los tejidos.
Hay que fijar/ incluir con congelación.
Tiñe adipocitos y mielina del sistema nervioso.
Ortocromasia
propiedad por la que el elemento teñido presenta una coloración semejante a la del colorante.
Metacromasia
propiedad resultante de la interacción entre ciertos colorantes y ciertas sustancias presentes en los
tejidos a colorear dando como resultado final el viraje del color azul al rojo.
El colorante debe:
• Ser catiónico.
• En solución acuosa diluida debe presentarse en estado monomérico y de color azul (absorbe luz de mayor
longitud de onda)
• Su forma polimérica debe ser de color rojo (absorbe luz de menor longitud de onda).
Metacromasia
El colorante debe ser:
(3)
propiedad resultante de la interacción entre ciertos colorantes y ciertas sustancias presentes en los
tejidos a colorear dando como resultado final el viraje del color azul al rojo.
El colorante debe:
• Ser catiónico.
• En solución acuosa diluida debe presentarse en estado monomérico y de color azul (absorbe luz de mayor
longitud de onda)
• Su forma polimérica debe ser de color rojo (absorbe luz de menor longitud de onda).
