TIPOS DE PCR

Question 1

PCR estándar

Answer 1

🔹 Descripción: Amplificación de un segmento de ADN utilizando dos cebadores. La detección de la amplificación es mediante geles de agarosa o poliacrilamida, empleados para observar regiones pequeñas en número de pares de bases.
🔹 Aplicación: Detección cualitativa de un segmento de ADN.

Question 2

PCR anidada

Answer 2

🔹 Descripción: Variante de PCR en la que el producto de amplificación inicial se usa como molde para realizar una segunda amplificación, utilizando iniciadores que se ubican dentro de la primera secuencia amplificada.
🔹 Aplicación: Detección cualitativa de un segmento de ADN. Altamente sensible y específica.

Question 3

PCR in situ

Answer 3

🔹 Descripción: Los productos generados a partir de muestras biológicas como secreciones y tejidos pueden visualizarse en el sitio de amplificación. Permite la detección de cantidades pequeñas de material genético.
🔹 Aplicación: Detección localizada de material genético en tejidos o secreciones, especialmente útil cuando se requiere conservar el contexto histológico.

Question 4

PCR múltiple

Answer 4

🔹 Descripción: Amplificación de dos o más segmentos de ADN utilizando varios partidores (cebadores) en una sola reacción de amplificación. La detección se realiza mediante geles de agarosa.
🔹 Aplicación: Detección cualitativa de varios segmentos de ADN en una sola reacción de PCR. Permite evaluar múltiples blancos simultáneamente.

Question 5

PCR-RFLP (polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción)

Answer 5

🔹 Descripción: PCR estándar con paso posterior de digestión con enzimas de restricción, lo cual permite evaluar variaciones en los sitios de corte del ADN amplificado.
🔹 Aplicación: Detección de polimorfismos tipo RFLPs (variaciones genéticas que modifican el tamaño de los fragmentos de restricción).

Question 6

RT-PCR (PCR con transcriptasa inversa)

Answer 6

🔹 Descripción: Utiliza ARN como molde inicial. Se requiere una transcriptasa inversa para convertir el ARN en ADN complementario (ADNc), que posteriormente se amplifica.
🔹 Aplicación: Análisis de expresión génica y detección de virus de ARN.

Question 7

qPCR o PCR en tiempo real (PCR-TR)

Answer 7

🔹 Descripción: Variante de PCR estándar en la que se utilizan tinciones o sondas con fluoróforos para la detección de los fragmentos amplificados. Puede ser también múltiple.
🔹 Aplicación: Detección cualitativa de uno o varios segmentos de ADN. También permite la cuantificación del ADN presente en la muestra o la expresión de genes.