Transfert de gène Flashcards

(47 cards)

1
Q

protéines recombinantes

A

protéines produites par des cellules dont le contenu génétique a été modifié

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2
Q

production de protéine préférable

A

production par génie génétique

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3
Q

problèmes liés à l’utilisation d’hormone de croissance humaine

A

extraite à partir d’hypophyse de cadavres (contamination par le prion : Creuzfeld-Jacob)

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4
Q

problèmes liés à l’utilisation d’insuline de porc

A

un AA de plus que l’homme : réaction antigénique

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5
Q

problèmes liés à l’utilisation de FSH humaine

A

prélèvement d’urine de femmes ménopausées

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6
Q

synthèse de protéines recombinante : transcription d’un …

A

ADNc (complémentaire)

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7
Q

technique de sous-clonage

A

insertion du gène dans un vecteur

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8
Q

exemples de vecteurs pour le sous-clonage

A

plasmide, adénovirus inactivé

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9
Q

vecteur d’expression

A

transporteur génétique du gène d’intérêt codant pour la protéine recherchée

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10
Q

étapes du processus biotechnologique

A
(vecteur + cellule hôte)
production
séparation
extraction
purification
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11
Q

utilisation d’hôtes procaryotes

A

pas de modifications post traductionnelles (glycolysation)

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12
Q

utilisation d’hôtes eucaryotes

A

production de petits peptides (insuline)

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13
Q

utilisation de cellules CHO (ovaires de hamster chinois) comme hôtes

A

production de protéines complexes (poids moléculaire élevé)

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14
Q

utilisation de plantes comme hôtes

A

production de molécules à effet thérapeutique (ex : tabac)

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15
Q

utilisation d’animaux transgéniques comme hôtes

A

gène inséré en aval de la caséine : molécule sécrétée dans le lait
(investissements lourds et marchés très restreints)

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16
Q

banques cellulaires

A

congelées (décongelées lors de besoin de production)

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17
Q

objectifs des thérapies géniques

A

addition d’un gène exogène :

  • restauration d’une fonction perdue
  • invalidation d’un gène
  • acquisition d’une nouvelle fonction cellulaire
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18
Q

transgenèse directe

A

micro-injection dans un ovocyte fécondé

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19
Q

caractéristiques de la transgenèse directe

A

délicat
intégration au hasard
rentabilité faible

20
Q

éléments utilisés losr du ciblage génétique par recombinaison homologue

A
  • enzyme de recombinaison (recombinase : CRE)
  • séquences flanquantes connues
  • cassette de sélection
21
Q

caractéristique du ciblage génétique par recombinaison homologue

A

remplacement ou insertion contrôlée

22
Q

comparaison du ciblage génétique (recombinaison) à la transgenèse directe

A

le ciblage génétique par recombinaison homologue est plus efficace que la transgenèse directe

23
Q

knock-in

A

apport d’un gène

expression ou surexpression

24
Q

knock-out

A

altération d’un gène

absence d’expression

25
préparation de cellules ES à partir de ...
la masse cellulaire interne (embryon de la même espèce)
26
préparation de souris transgéniques à partir de cellules ES
préparation de cellules ES insertion ADN (vecteur) sélection des cellules recombinées (gène de sélection) injection dans un blastocyte souris mosaïque/chimérique génération suivante : souris transgénique
27
pour des souris transgéniques il faut que le ...
transgène soit intégrés aux gamètes
28
thérapie génique in vivo
injection directe du transgène
29
problèmes de la thérapie génique in vivo
accessibilité du tissu à traiter | nature du vecteur (utilisation de vecteurs viraux)
30
thérapie génique ex vivo
greffe de cellules génétiquement modifiées
31
cellules souches pluripotentes induites (IPS)
cellules adultes ramenées à l'état de cellules souches embryonnaires indifférenciées par injection de gène précis à l'aide de virus
32
exemple de cellules transformées en IPS
globules rouge
33
ARN interférents
petis ARN (ARNsi/ARNmi) susceptibles d'inhiber ou détruire spécifiquement un ARN cible
34
le siRNA est ...
complémentaire de l'ARNm
35
interférence ARN
"post-transcriptional gene silencing"
36
pri-microARN
repliement du précurseur du microARN | longue épingle à cheveux : 1 000 nt
37
pré-microARN
pri-microARN coupé par Drosha | courte épingle à cheveux : 100 nt
38
Drosha
endonucléase du nucléoplasme
39
exportine-5
exporte le pré-microARN dans le cytoplasme
40
Dicer
endonucléase du cytoplasme | transforme le pré-microARN en miARN sb
41
complexeRISC
protéine argonaute + ARNmi
42
obstacles à l'utilisation d'ARN interférents (knock-down)
franchir les membranes cellulaires pour atteindre les cellules cibles absence de toxicité estimer leur stabilité et les doses à administrer s'assurer de leur spécificité
43
utilisation des ARN interférent en thérapie humaine
pathologies tumorales | dégénérescence maculaire
44
utilisation des ARN interférent contre les pathologies tumorales
inhibition des EGFR (récepteur de facteur de croissance )
45
utilisation des ARN interférent contre la dégénérescence maculaire
inhibition des VeGF
46
bioinformatique
banque de données de séquences (AN, protéines) | banques de maladies (Orphanet)
47
application du transfert de gène au mammouth
fécondation à partir de sperme congelé de mammouth clonage reproductif à partir d'une cellule congelée clonage à partir du séquençage du génome du mammouth